AISLAMIENTO DE AZOTOBACTER

PRÁCTICA 7: AISLAMIENTO DE  AZOTOBACTER I. INTRODUCCIÓN Actualmente la mayoría de cultivos agrícolas dependen de los fertilizantes químicos sintéticos, los cuales proporcionan nutrimentos asimilables por las plantas. Sin embargo, su uso prolongado ocasiona contaminación ambiental y daños ecológicos, además de un incremento en el costo de producción y el impacto negativo en la salud animal y humana. Una alternativa es utilizar biofertilizantes para promover la agricultura orgánica y las tecnologías limpias y seguras. Las bacterias fijadoras de nitrógeno (diazótrofas) fueron las primeras en producirse comercialmente con fines de biofertilización. De este grupo, las más utilizadas como biofertilizantes corresponden al género Azotobacter , el cual comprende siete especies a) A. chroococcum, b) A. vinelandii , c) A. beijerinckii ,d) ,d) A. paspali , e) A. armeniacus, f) A. nigricans y g) A. salinestris. Los microorganismos de este género fijan asimbióticamente nitrógeno y son solubilizadoras de fosfato. Además realizan procesos de biodegradación de plaguicidas como el endosulfan. En vida libre, fijan al menos 10 mg de N 2  por gramo de carbohidrato consumido. Los métodos más utilizados para aislar bacterias del género  Azotobacter   incluyen el aislamiento en medio libre de nitrógeno, enriquecimiento en solución de Winogradsky y posterior siembra en medio libre de nitrógeno, y siembra de gránulos individuales de suelo en medio libre de nitrógeno.

II. OBJETIVO Aislar Azotobacter  e  e identificar.

III. MATERIAL Y METÓDO 1. MATERIAL - Suelo de cultivo de caña de azúcar - medio 77 o Ashby - Placas Petri - Mechero - Láminas y laminillas - Lugol - Dos frascos pequeños de boca ancha anc ha

2. PROCEDIMIENTO

Muestra: 200g de suelo de cultivo de caña de azúcar

Colocar 100g a cada frasco (A y B)

Incubar a 30°C pH7

Observación microscópica en fresco

Presencia de película

Colocar 2 asadas de la película en una lámina con 1 gota de lugol. Colocar lámina cubreobjeto.

Sembrar por estría en Agar 77 o Ashby

IV. RESULTADO 21/10/16  Azotobacter : Diplococo capsulado

Figura 1: Observación microscópica de Azotobacter .

24/10/16

Figura 2: Aislamiento de Azotobacter  en agar 77 V. COMENTARIO 

La formación de película de mucígel alrededor de los gránulos en el agar 77 permite inferir que es producido por bacterias aeróbicas presuntivas de  Azotobacter sp. debido a sus condiciones habituales de crecimiento en fuentes cálcicas, evidenciada en la solubilización del carbonato de calcio presente en el medio.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Flores A, Contreras J, Reyes M, Rodríguez R. Aislamiento e identificación de cepas nativas del suelo mexicano del género  Azotobacter.