Anticuerpos Anticitoplasma de Neutròfilos

Sociedad Española de Inmunología Taller de Autoinmunidad 2013

ANTICUERPOS ANTICITOPLASMA DE NEUTRÓFILO (ANCA)

ÍNDICE 1-Objetivos 2-Organizadores 3-Colaboradores 4-Apoyo Logístico y agradecimientos 5-Introducción 5.1-Patrones de inmunofluorescencia indirecta (IFI) de anticuerpos anticitoplasma de neutrófilo (ANCA) 5.1.1-Consenso Internacional 5.1.2-Otras propuestas de definición de patrones ANCA atípicos 5.2-Métodos para la determinación de anticuerpos antiproteinasa 3 (a-PR3) y antimieloperoxidasa (a-MPO) 5.2.1.-Recomendaciones internacionales y del Grupo Español de Autoinmunidad (GEAI) 5.2.2.-Métodos 6-Laboratorios participantes 7-Resúmenes de historia clínica de los pacientes 8-Métodos 8.1- Datos enviados por los participantes 8.2- Resumen de las técnicas utilizadas 9-Resultados 9.1-Resultados por sueros 9.2-Análisis de los sueros sin consenso 9.3-Resumen de resultados e imágenes de inmunofluorescencia indirecta 10-Conclusiones 10.1.-Patrones IFI 10.2.-Técnicas de determinación de anticuerpos anti-MPO y anti-PR3 11-Bibiografía

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1-OBJETIVOS Los objetivos del presente taller se han centrado en el estudio de anticuerpos anticitoplasma de neutrófilo (ANCA) en dos aspectos: 1.1-El abordaje de los anticuerpos asociados a enfermedad inflamatoria intestinal, concretamente a la colitis ulcerosa. Por un lado se ha tratado el tema de los ANCA con patrón atípico, que constituyen un aspecto no muy bien definido por los consensos internacionales (1,2). Presentan además la dificultad de su distinción de los distintos anticuerpos antinucleares o anticitoplásmicos concomitantes y han sido objeto de distintas aproximaciones (3,4,5). Recientes publicaciones han caracterizado sus antígenos diana, especialmente en hepatopatías autoinmunes y colitis ulcerosa (3,6,7). Por otro lado, también recientemente, se ha descrito la asociación de colitis ulcerosa a anticuerpos específicos de vasculitis asociados a ANCA (8,9). Ello puede contribuir al diagnóstico diferencial entre colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn, en el que la determinación de ANCA juega un papel importante y por otro lado, puede afectar a la especificidad de los ANCA para el diagnóstico de vasculitis. 2.1-La comparación de distintas técnicas, en general cuantitativas, para la determinación de anticuerpos antimieloperoxidasa y antiproteinasa 3. La distinta sensibilidad y especificidad de dichas técnicas puede determinar su valor diagnóstico y su aplicación en el seguimiento de las vasculitis asociadas a ANCA. Se pretende con este taller, por un lado, conocer qué tipos de técnicas se utilizan en los laboratorios que determinan ANCA y por otro, comparar los resultados en una serie de casos concretos que pueden ser interesantes por sus características clínicas, de laboratorio o ambas. Una comparación estadística exhaustiva de los métodos no es el objeto de este taller, por el número reducido de pacientes estudiado para cada tipo de patología y por la falta de una técnica “gold standard”, que nos impide una comparación objetiva. No obstante, creemos que de este estudio descriptivo puede obtenerse una buena “fotografía” de lo que es actualmente la determinación de ANCA en España y pueden discutirse casos interesantes y el comportamiento de las distintas técnicas en cada uno de ellos.

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2-ORGANIZADORES

Dra. Mª Rosa Julià

Dr. Pedro Martínez

F.E.A. Inmunología

F.E.A. Inmunología

Servicio de Inmunología

Servicio de Inmunología

Hospital Universitari Son Espases

Hospital Universitario Virgen de la Arrixaca

Palma de Mallorca

Murcia

3-COLABORADORES Eduardo Villegas Martín. Residente Servicio Inmunología Hospital Universitari Son Espases. Dra Dora Pascual Salcedo (Hospital La Paz. Madrid) y Dra Margarita Rodríguez Mahou (Hospital Gregorio Marañón. Madrid), ambas han contribuido con sueros propios al Taller.

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4-APOYO LOGÍSTICO Dra. Ángela Carrasco. Responsable de talleres de la junta del Grupo Español de Autoinmunidad (GEAI)

Entidades colaboradoras: Bio-Rad Laboratories S.A. Análisi y Genética S.L. Grifols IZASA Distribuciones Técnicas S.A. Menarini Diagnósticos S.A. Palex Medical S.A. Phadia (Thermo Fisher Scientific)

AGRADECIMIENTOS Sujetos voluntarios donantes del suero para el Taller Dra Ángela Carrasco, Dra Dora Pascual, Dra Margarita Rodríguez Mahou y Entidades colaboradoras

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5-INTRODUCCIÓN 5.1-Patrones de inmunofluorescencia indirecta (IFI) de anticuerpos anticitoplasma de neutrófilo (ANCA) 5.1.1-Consenso Internacional El consenso internacional sobre ANCA acordado en 1999 (1) y su adenda de 2003 (2) establecen la siguiente nomenclatura para los patrones IFI de ANCA:

C-ANCA: patrón clásico de fluorescencia granular con acentuación central o interlobular . C-ANCA atípico: patrón difuso “flat”, sin acentuación interlobular P-ANCA: patrón perinuclear, con o sin extensión nuclear, incluye ANA específicos de granulocito ANCA atípico: incluye todos los otros patrones IFI de reactividad específica para neutrófilos o monocitos. Con frecuencia se trata de una combinación de fluorescencia citoplásmica y perinuclear.

-Se distingue entre patrones C y C atípico y no entre P y P atípico para evitar que un patrón C se atribuya, por el clínico, a vasculitis sistémica, si se emite el informe antes de la realización del ELISA para antiproteinasa 3 (a-PR3) o antimieloperoxidasa (a-MPO). -La extensión nuclear en los P-ANCA no es siempre útil para distinguir los que corresponden a a-MPO o no. -Se considera que la fluorescencia debe graduarse como negativa, positiva débil o positiva intensa, sólo sobre la base de la dilución de cribaje. -Para seguimiento se recomienda no utilizar los títulos de IFI sino las técnicas cuantitativas para a-MPO y a-PR3. -El informe debe indicar si el laboratorio no puede confirmar un P-ANCA , debido a un ANA concomitante y que serán realizadas técnicas cuantitativas para a-MPO y a-PR3. -Las muestras positivas deben ser estudiadas por técnicas cuantitativas para a-MPO y a-PR3.

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Respecto a los patrones atípicos de ANCA: -Se considera que no existe aún una prueba satisfactoria para detectar ANCA en enfermedad inflamatoria intestinal o hepatopatías autoinmunes (colangitis esclerosante o hepatitis autoinmune). -En general, serán aquellos en los que se obtiene positividad para cualquiera de los 4 patrones descritos en el recuadro pero que no correspondan a a-MPO o a-PR3. La IFI obtenida en etanol desaparece, en la mayoría de casos, en los portas fijados con formalina, aunque pueden obtenerse resultados poco consistentes en muestras individuales. Por ello el uso de portas fijados con formalina se deja a la elección del laboratorio. -No se recomienda, por el momento, la utilización de técnicas ELISA para antígenos distintos de MPO y PR3. 5.1.2-Otras propuestas de definición de patrones ANCA atípicos Algunos autores han propuesto patrones distintivos para los patrones ANCA atípicos: -El patrón “very p” , sin extensión nuclear, aunque, como ya se ha dicho no es aceptado por el consenso internacional por su inconsistencia para distinguir entre sueros a-MPO positivos o negativos (1,2). -El patrón mixto , por combinación de C-ANCA y P-ANCA, denominado “snow-drift like” (5). -Por último, Terjung et al (3) propusieron en 2001 la siguiente clasificación de patrones ANCA, basada en la presencia o no de puntos intranucleares y en los patrones IFI obtenidos en portas fijados con etanol o formalina. Este mismo grupo y otros, en sucesivas publicaciones (6,7), han caracterizado a los antígenos que dan lugar a este patrón p atípico, asociado a colitis ulcerosa y hepatitis autoinmune, como constituyentes de la membrana nuclear. Patrón

Tinción sobre portas Tinción sobre portas Etanol

Formalina

C-ANCA

Citoplásmica fina granular acentuada entre los lóbulos

P-ANCA

Fina, homogénea y en reborde, del citoplasma perinuclear

P-ANCA atípico tipo A

Amplia, no homogénea y en reborde, del citoplasma perinuclear, con múltiples puntos intranucleares Amplia, no homogénea y en reborde del citoplasma perinuclear, con múltiples puntos intranucleares junto a patrón citoplásmico difuso

Citoplásmica fina granular raramente acentuada entre los lóbulos Citoplásmica fina granular raramente acentuada entre los lóbulos Fina, no homogénea y en reborde del citoplasma perinuclear, con múltiples puntos intranucleares Fina, no homogénea y en reborde del citoplasma perinuclear, con múltiples puntos intranucleares junto a patrón citoplásmico difuso

P-ANCA atípico tipo B

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5.2-Métodos para la determinación antimieloperoxidasa (a-MPO)

de anticuerpos antiproteinasa 3 (a-PR3) y

5.2.1.-Recomendaciones internacionales y del Grupo Español de Autoinmunidad (GEAI) El consenso internacional sobre determinación de ANCA aconseja realizar, en aquellas muestras positivas por IFI, una confirmación por técnica ELISA para anticuerpos antiproteinasa 3 (a-PR3) y antimieloperoxidasa (a-MPO). Para el seguimiento de pacientes positivos se recomienda usar los niveles obtenidos por ELISA y no los títulos de IFI, ya que la correlación no es buena entre los resultados obtenidos por ambas técnicas (1,2). El protocolo del GEAI indica también la necesidad de realizar determinación de anticuerpos a-PR3 y a-MPO en muestras positivas por IFI y para el seguimiento se recomienda método cuantitativo (10). 5.2.2.-Métodos La sensibilidad y especificidad de las técnicas ELISA para a-MPO y a-PR3 ha ido aumentando desde los ELISA directos, técnicas de primera generación en las que los antígenos se fijan directamente a la placa, a los ELISA de captura, en los que se evitan cambios conformacionales, en PR3 o MPO, utilizando un anticuerpo fijado a la placa que une el antígeno por epítopos distintos a los de los autoanticuerpos (técnicas de segunda generación). Los ELISA de tercera generación o de alta sensibilidad (hsELISA: “highsensitivity” ELISA), utilizan una proteína como “anchor” o puente entre el antígeno y la placa. Éstos últimos se postulan como un sistema que aún preserva mejor las características antigénicas de PR3 y MPO (11,12), aunque existen estudios que les atribuyen una sensibilidad similar a los ELISA de captura (13). Algunos trabajos han detectado incluso una mejor capacidad diagnóstica de las técnicas de primera generación para a-MPO, mientras que las de segunda o tercera generación siguen siendo consideradas las más adecuadas para aPR3 (13). Recientemente han aparecido técnicas de quimioluminiscencia que, en algunos casos, combinan técnicas con antígenos unidos directamente a la placa con otras tipo “anchor” (14). Estas técnicas se han descrito equiparables a las técnicas ELISA de última generación y presentan, junto a los ELISA fluorescente de pocillo individual, la ventaja de la rapidez en la obtención de resultados y de permitir carga contínua de muestras. De todas formas, su implantación es muy reciente y se requieren más estudios para confirmar su utilidad. Existen también en el mercado distintos métodos cualitativos como dot-blot o inmunofluorescencia para el cribaje de a-MPO y a-PR3 .

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Técnicas cuantitativas más utilizadas para determinación de a-PR3 y a-MPO ELISA directo

ELISA de captura

ELISA de alta sensibilidad “anchor”

Quimioluminiscencia

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6-LABORATORIOS PARTICIPANTES Nombre del Hospital Clínica Universidad de Navarra Complejo Hospitalario de Jaén Consorcio Hospital General de Valencia Fundación Jiménez Díaz Hospital Clínico Universitario de Valencia Hospital San Pedro de Alcántara Hospital Universitario de Cruces Hospital Central de la Defensa "Gómez Ulla" Hospital Clínic de Barcelona Hospital Clínico de San Carlos Hospital Clínico Universitario Santiago de Compostela Hospital de Bellvitge Hospital de la Princesa Hospital de León Hospital Universitario Marqués de Valdecilla Hospital de Merida SES Hospital de Sant Pau Hospital Donostia Hospital General de Albacete Hospital Infanta Cristina Hospital Infanta Margarita Hospital Infanta Sofia Hospital Joan XXIII Hospital Ramón y Cajal Hospital Severo Ochoa Hospital Torrecardenas Hospital U. Germans Trias i Pujol Hospital Universitari Son Espases Hospital Universitario "La Paz" Hospital Universitario 12 de Octubre Hospital Universitario A Coruña "Teresa Herrera" Hospital Universitario Central de Asturias Hospital Universitario de Canarias Hospital Universitario de Gran Canaria Dr. Negrin Hospital Universitario Gregorio Marañon Complejo Hospitalario Universitario Insular Materno Infantil Hospital Universitario Nuestra Sra de la Candelaria Hospital Universitario Puerta de Hierro Hospital Universitario Puerta del Mar Complejo Asistencial Universitario Salamanca Hospital Universitario Vall d'Hebron Hospital Universitario Virgen de la Arrixaca Hospital Universitario Virgen del Rocío Hospital Virgen de la Macarena Hospital Virgen de las Nieves. Hospital de Jerez Catlab. Parc Logistic de Salut UDIAT-CD Corporacio Parc Tauli

Responsable Alfonso Sánchez Ibarrola Esther Ocaña Pérez Goitzane Marcaida Benito / Juana Rodríguez Delgado María José Martínez Becerra Paz Laporta Martín Luis Fernández Pereira María Aránzazu Pacho de Lucas Carmen Jiménez Garófano Odette Vinyas Gomis / Mila Garcia Romina Dieli Crimi Pablo Eiras Martínez Jordi Bas Cecilia Muñoz Calleja / Margarita García Marcos Dra. Sara Calleja Antolín Marcos López Hoyos Manuel Espárrago Rodilla Carmen Gelpí Sabater Álvaro Prada Iñurrategui / Raquel Sáez Jesús Ontañón Rodríguez María Inmaculada Alcalá Peña / Mª Luisa Vargas Pérez Aurora Jurado Roger Alexandru Vlagea Rosa María Pastor Barellas Angela Carrasco Sayalero / Garbiñe Roy Ariño Juana Jiménez Jiménez Francisco Javier Muñoz Vico Eva Mª. Martínez Cáceres Mª Rosa Julià Benique / Eduardo Villegas Martín Dora Pascual-Salcedo Pascual / Rita Álvarez Doforno Antonio Serrano / Estela Paz Artal Silvina Torio Gómez / Jose Javier Cid Fernández Lourdes Mozo Avellaned Yvelise Barrios del Pino Inmaculada Alarcón Torres Margarita Rodríguez Mahou Olga Montes Ares / Alberto Torio Ruiz Delia Almeida González Aresio Plaza López Carmen Rodríguez Hernández María Belén Aparicio Hernández Ana Marín Sánchez Pedro Martínez García / Jose Marcos García Pacheco Marco Antonio Montes Cano Concepción González Rodríguez Laura Jaimez Gámiz Juan Francisco Rodríguez Gutiérrez Montserrat Alsina Donadeu / Francisco Pujalte Mora María José Amengual Guedan

Total 48 laboratorios participantes

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7-RESUMEN DE HISTORIA CLÍNICA DE LOS PACIENTES SUERO 1: RVM Varón de 71 años, afecto de hipertensión arterial, diabetes mellitus tipo II, hiperuricemia y cardiopatía isquémica. Tras ingreso en urgencias por ITU (06-11-2012) y empeoramiento general, ingresa de forma programada (07-11) y se diagnostica, por TAC abdominal y colonoscopia, de colitis ulcerosa. Durante el ingreso, 15 días antes de la toma de muestra para el taller, se produce cuadro de bacteriemia por Klebsiella pneumoniae, que se trata con antibiótico de amplio espectro. Recibe,además, tratamiento con Linagliptina, Micardis, Alopurinol, Sintrom, Pantoprazol y Dacortin. SUERO 2: AMZF Mujer de 33 años. Diagnosticada de Lupus eritematoso sistémico, nefritis lúpica y gromerulonefritis rápidamente progresiva por inmunocomplejos, demostrada por biopsia renal percutánea. Antecedente de toxemia gravídica y rinitis alérgica. Presenta el debut de LES en el post-parto (08/2012). Recibe bolus de corticoides y rituximab. En el momento actual se encuentra en tratamiento por hemodiálisis. SUERO 3: MSR Mujer de 68 años diagnosticada de enfermedad de Wegener con afectación pulmonar, con biopsia compatible. Además presenta hipertensión arterial, alergia a TrimetoprimSulfametoxazol, DM tipo II, dislipemia y síndrome ansioso-depresivo. En el momento de la toma de muestra se encuentra ingresada por ITU debida a Klebsiella pneumoniae, que se resuelve con tratamiento con amoxicilina-clavulámico. Su tratamiento habitual incluye Dacortin, esomeprazol, Novomix 30/70 Flexpen, Metformina, AAS, Candesartan, Simvastatina, Fenofibrato, Tramadol, Bromazepam, Duloxetina, calcio Vit D y bifosfonatos. SUERO 4: JAPH Mujer de 32 años, diagnosticada de colitis ulcerosa, con colonoscopia compatible. Presenta antecedente previo de infección por Dientaomeba fragilis (1 mes antes de la toma de muestra del taller), ya erradicada. Actualmente en tratamiento con Dacortín, Pentasa, Kilor y Omeprazol. SUERO 5: BJM Mujer de 33 años, diagnosticada de colitis ulcerosa, con colonoscopia compatible. En Marzo de 2012 sufre hepatitis aguda con serologías virales negativas. Actualmente en tratamiento con Mesalazina.

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SUERO 6: APSO Mujer de 39 años que acude a urgencias (24/04/12) por cuadro de pielonefritis aguda tratada con clavulámico. Tras la suspensión del mismo comienza con tos no productiva y dolor torácico de características pleuríticas, disnea de esfuerzo y fiebre. En Rx de tórax se aprecia infiltrado en base izquierda con derrame pleural e imágenes nodulares en hemitórax derecho. En la analítica se constata VSG 120, Hb: 10.8, leucocitosis (15300) con eosinofilia (10.5%), PCR 18 mg/dl y sedimento de orina patológico con hematuria y leucocituria, sin síntomas miccionales. IgE:318, IgA:944, IgE frente a Aspergillus negativa. Estudio de parásitos en heces: negativo. Serología HIV y estudio microbiológico en orina: negativo. El TAC torácico indica afectación parenquimatosa con nódulos y masas bilaterales. Presenta también derrame pleural, y adenopatías mediastínicas y parahiliares inferiores a 10 mm. Se realiza fibrobroncoscopia, lavado broncoalveolar (BAL) y biopsia transtorácica y pleural, obteniéndose resultados negativos para PCR y cultivos de micobacterias, bacterias y hongos. En BAL se obtiene cociente CD4/CD8 > 3.5 y eosinofilia de 1%. El estudio de Anatomía Patológica objetiva fibrosis pulmonar, granulomatosis necrotizante con granulomas en empalizada y en uno de los informes se objetiva granuloma de aspecto necrótico claramente caseoso. En todos los casos las tinciones para bacterias y hongos son negativas y no hay signos de vasculitis. SUERO 7 : JCP Varón de 79 años. Diagnosticado de Enfermedad de Wegener en 2003, tras estudio de cuadro tóxico en el que se evidenció patrón radiológico compatible con nódulos pulmonares bilaterales y bronquiectasias. Presenta además: enfermedad renal crónica, estenosis bilateral de carótidas, dislipemia, calcificación de aorta abdominal, tiroidopatía y bradicardia sinusal. En tratamiento con Doxazosina , Dacortin, Omeprazol, Esertia, Adiro, Plusvent, Atorvastatina, Kilor, Duphalac. SUERO 8: CCB Mujer de 57 años. Diagnosticada de L.E.S. en 1993, con sintomatología cutánea, articular y renal. La biopsia renal indicó nefritis lúpica proliferativa focal tipo III. En 2010 se evidencian, por RMN, lesiones en sustancia blanca y presencia de anticuerpos antifosfolípido a título moderado, por lo que se diagnostica de SAP secundario a LES. Actualmente en tratamiento con Omeprazol, calcio, AAS, amlodipinio, aliskiren, ezetimiba, micofenolato, ácido risedrónico, lormetazepam, citalopram, prednisona. SUERO 9: FBS Mujer de 65 años. Diagnosticada de colitis crónica. En el momento actual, por clínica y biopsia de muestra endoscópica, se diagnostica de colitis ulcerosa severa con marcada actividad. Presenta además: varices, obesidad, necrosis avascular de cabeza de fémur e insuficiencia mitral. Recibe tratamiento con: ramipril, bisoprolol, torasemida, sintrom, sinvastatina. SUERO 10: MMM Paciente con esclerosis sistémica difusa y vasculitis necrotizante, con afectación del sistema nerviosos periférico y vascular confirmada por biopsia del nervio sural y muscular.

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8-MÉTODOS En primer lugar se mostrarán todos los datos sobre las técnicas utilizadas por cada laboratorio participante. El número de laboratorios participantes es de 48, no todos participan en todas las determinaciones y algunos presentan más de una determinación por parámetro y suero, con distintos fabricantes, de aquí que el número de informes emitidos por parámetro y suero sea diferente del número de participantes. Se mostrarán de manera resumida, las técnicas con las que se han informados resultados en este taller, con las siguientes excepciones: •

IFI-METANOL: El escaso número (4) y la diversidad de resultados hace que no se considere esta técnica en el análisis de resultados.

•

ANTI-MEMBRANA BASAL GLOMERULAR: Todos los sueros son negativos para los 11 laboratorios que informan esta técnica.

•

ASCA: Sólo hay un resultado por suero, excepto para el nº 5 que hay dos (uno positivo y otro negativo). No se considera esta técnica en el análisis de resultados.

•

ANA: Se ha alcanzado consenso en todos los sueros analizados. Se mostrarán los resultados de cada participante así como en las tabas de resumen por técnicas y por sueros, pero dado que los anticuerpos antinucleares no son el objeto de este taller, sino una herramienta para resolver las posibles interferencias con los ANCAs, no se considerará esta técnica en el análisis de resultados.

•

PANEL ANCA: Se mostrarán los resultados de cada participante así como en las tablas de resumen por técnicas y por sueros. A pesar de que se ha alcanzado consenso en todos los sueros analizados no se considerará esta técnica en el análisis de resultados dado el bajo número de laboratorios que informan y la falta de concreción de los antígenos que incluye cada fabricante en este panel.

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8.1.- Datos enviados por los participantes. Nº Laboratorio 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 47 48 49 50

Fabricante INOVA Euroimmun INOVA INOVA

IFI ETANOL Dil. screening 20 10 20 20

Título final 20 10 20 100

Fabricante INOVA Euroimmun INOVA INOVA

IFI FORMALINA Dil. screening 20 10 20 20

INOVA INOVA Menarini Movaco. Grifols INOVA

20 20 20 20 10

20 20 320 20 20

INOVA INOVA Menarini Movaco. Grifols INOVA

Zenit.Menarini Zenit.Menarini INOVA Euroimmun

40 20 20 20

40 20 20 2560

Menarini INOVA MBL.Menarini Menarini INOVA Zenit.Menarini Euroimmun Biosystems Zenit.Menarini INOVA Zenit.Menarini Biosystems Euroimmun Zenit.Menarini Casero INOVA Euroimmun Zenit.Menarini Euroimmun INOVA Euroimmun Euroimmun Biosystems INOVA Kallestad Biosystems Euroimmun Biosystems INOVA INOVA Menarini Palex INOVA MBL.Menarini INOVA

20 20 20 20 10 20 10 10 40 20 20 20 10 20 25 20 40 20 20 20 20 20 20 20 10 10 10 10 20 20 40 40 20 20 20

640 20 20 400 1280 20 640 640 160 20 1280 1280 10 320 25 20 40 40 320 20 1280 640 640 160 1280 10 40 40 20 320 40 40 20 640 2560

Casero Immco. Grifols Immco. Movaco Biosystems Euroimmun Biosystems Euroimmun Casero Biosystems

20 20 20 20 20 20 10 20

IFI METANOL Dil. screening

Título final 20 10 20 100

Fabricante

Tít. final

20 20 20 20 10

20 20 320 20 20

INOVA

20

20

INOVA Euroimmun

20 20

2560 20

Menarini INOVA

20 20

20 20

Menarini INOVA Zenit.Menarini Euroimmun Biosystems Zenit.Menarini INOVA Zenit.Menarini Biosystems Euroimmun

20 10 20 10 10 40 20 20 20 10

20 10 20 640 640 160 20 1280 1280 10

Biosystems

10

640

INOVA Euroimmun Zenit.Menarini Euroimmun INOVA Euroimmun Euroimmun

20 40 20 20 20 20 20

20 40 40 320 20 1280 640

Menarini Kallestad Biosystems Euroimmun

20 10 10 10

80 10 10 40

INOVA INOVA Menarini Palex INOVA MBL.Menarini INOVA

20 20 40 40 20 20 20

20 20 40 40 20 640 2560

Palex

40

40

20 20 20 20 20

Immco. Grifols Immco. Movaco Biosystems Euroimmun

20 20 20 20

20 20 20 20

20 80 20

Euroimmun INOVA Biosystems

20 10 20

20 80 20

Biosystems

20

20

No especifica

14

Fabricante Kallestad Euroimmun

IFI ANA Dil. screening 80 10

T. final 640 10

3

Euroimmun

80

1280

4 5 6 7 8 9 10 11 12

Euroimmun Biosistems Phadia Immunoconceps INOVA

160 80 ANA-CTD 40 40

160 320 F-EIA 5120 320

Immunoconceps

80

160

Kallestad Euroimmun

80 20

1280 10240

Nº Lab. 1 2

13

17 18 19 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39

45 47 48 49 50

Directo Anchor F-EIA Anchor Anchor Captura Anchor Directo Captura Anchor Dot-blot F-EIA F-EIA Anchor

<3.5 <5 <3.5

Fabricante Phadia INOVA Euroimmun AESKULISA Phadia Wieslab.EuroD. Phadia Phadia Phadia Phadia Wieslab.EuroD. Phadia Wieslab.EuroD. Phadia Phadia Euroimmun Phadia Phadia Phadia

ANTI-PR3 Tipo técnica Captura Quimioluminis. IFI sobre Ag purificado Directo Anchor Captura Anchor F-EIA Anchor Anchor Captura Anchor Captura Captura Anchor Dot-blot F-EIA F-EIA Anchor

V. Ref <10 <6,66 P/N <18 <7 <5 <7 <5 <5 <7 <7 <8 <5 <5

V. Ref <10 <5 P/N <18 <3 <8 <3 <7 <3 <3 <7 <7 <6 <3 <3

Immunoconceps

80

640

Immunoconceps Euroimmun Delta biolo. A.G INOVA

80 80 100 40

1600 640 1280 640

Zenit INOVA Wieslab.EuroDiag Phadia

Quimioluminis (directo) Directo Captura

<20 <21 <10 <3.5

Zenit INOVA Wieslab.EuroD. Phadia

Quimioluminis (directo) Directo Captura Captura

<20 <21 <7 <3

INOVA Biosystems INOVA Immunoconceps Immunoconceps INOVA Euroimmun Euroimmun Immunoconceps Medica INOVA Euroimmun Euroimmun

80 160 160 80 160 40 100 160

320 2560 2560 1280 640 640 100 160

Orgentec.Alegria Phadia Phadia

Directo Captura Captura

<5 <3.5 <3.5

Orgentec. Phadia Phadia

Directo Captura

<5 <2 <3.5

160 160 80 80

1280 160 1280 2560

Orgentec.Palex Phadia INOVA Biorad Phadia Wieslab.EuroDiag Phadia Wieslab.EuroDiag

<5 <5 <6 <1 <5 P/N <3 <5

Euroimmun Phadia INOVA Biorad Phadia Wieslab.EuroD. Phadia Wieslab.EuroD. D-tek. Palex

Anchor F-EIA Directo Luminex Anchor Directo F-EIA Captura Dot-blot Dot-blot

<20 <3 <3,5 <1 <3 P/N <2 <5

D-tek. Palex

Anchor F-EIA Directo Luminex Anchor Directo F-EIA Captura Dot-blot Dot-blot

INOVA Kallestad

80 40

160 1280

Biorad Wieslab.EuroDiag

Luminex Directo

1A1

Biorad Wieslab.EuroD.

Luminex Directo

1A1

Euroimmun

10

40

INOVA Immunoconceps

160 80

1280 640

Euroimmun Orgentec.Palex Phadia Zenit RA.Menarini Menarini

IFI sobre Ag purificado Monotest Anchor Quimioluminis (directo) Directo

P/N <5 <5 10 <7

Euroimmun Orgentec. Phadia Zenit RA Menarini

IFI sobre Ag purificado Monotest Anchor Quimioluminis (directo) Captura

P/N <5 <3 10 <5

INOVA Kallestad Immunoconceps

80 40 40

320 1280 2560 320

<6 <5 <5

Phadia D-tek. Palex Wieslab.EuroD. Orgentec. Orgentec.

Captura Dot-blot Directo Directo Directo

<2

20

Captura Dot-blot Directo Directo Directo

<3.5

Euroimmun

Phadia D-tek. Palex Wieslab.EuroDiag Orgentec.Palex Orgentec.Palex

Immco. Movaco

80

5260

Directo

20

640

Directo

<18 <5 <5

AESKULISA Phadia Orgentec.

Directo

Euroimmun

AESKULISA Phadia Orgentec.Palex

Directo

<18 <3 <5

Euroimmun INOVA

80 160

1280 320

Wieslab.EuroDiag Zenit RA.Menarini IZASA Orgentec.Palex

Captura Quimioluminiscencia Quimioluminiscencia Directo

<5 10 20 <1

Wieslab.EuroD. Zenit RA. IZASA Orgentec.

Captura Quimioluminiscencia Quimioluminiscencia Directo

<5 10 20 <1

40 41 42 43 44

ANTI-MPO Tipo técnica Captura Quimioluminis. IFI sobre Ag purificado Directo

Wieslab.EuroDiag Phadia Phadia Phadia Phadia Wieslab.EuroDiag Phadia Wieslab.EuroDiag Phadia Phadia Euroimmun Phadia Phadia Phadia

14 15 16

Fabricante Phadia INOVA Euroimmun AESKULISA

<2 <3 <2

<6 <5 <5

15

Nº Lab.

ANTI-MBG Tipo V. Fabricante técnica Referencia

PANEL ANCA (Azurocidina,BPI,CatepsinaG,Elastasa,Lactoferrina,Lisozima...) Fabricante

Tipo técnica

V. Referencia

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Wieslab.EuroDiag

Directo

20

Phadia

F-EIA

<10

Phadia

Anchor

<7

Wieslab.EuroDiag

si/no

Wieslab.EuroDiag

si/no

13 14 15 16 17 18 19 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34

Phadia

<10

Phadia INOVA

F-EIA Directo

<10 <20

Phadia Wieslab.EuroDiag

F-EIA Directo

<10 P/N

D-tek. Palex

Dot-blot

35

Euroimmun

Captura

<5

Orgentec

Directo

<10

AESKULAB. Grifols

Directo

>0.5 D.O.

Orgentec.Palex Wieslab.EuroDiag

Directo Directo

>4 DO ratio

Euroimmun

Dot-blot

Orgentec.Palex

Directo

36 37 38 39 40 41 42 43 44 45

Menarini

Orgentec.Palex

<10

Directo

20

47 48 49 50

<1

16

8.2.- Resumen de las técnicas utilizadas IFI ETANOL Informes totales para esta técnica: 57

IFI-ETANOL. Dil. screening 8%

7%

2% 18%

Dilución de screening 1/10 = 11 1/20 = 40 1/25 = 1 1/40 = 5

65%

IFI-ETANOL

No titulan = 31

46% 54%

Si titulan = 26

IFI-ETANOL. Fabricante/distribuidor 2% 4%

Biosystems = 9 16%

Casero = 3

19% 5%

Euroimmun = 11 Immco = 2 INOVA = 17

2% 19%

Kallestad = 1 Menarini/Zenit = 11

29%

4%

MBL.Menarini = 2 Movaco = 1

17

IFI FORMALINA Informes totales para esta técnica: 48

IFI-FORMALINA. Dil. screening

8%

21% 1/10 = 10 1/20 = 34 1/40 = 4

71%

IFI FORMALINA

38% No titulan = 30 Si titulan = 18 62%

IFI-FORMALINA.Fabricante/distrib.

2% 19%

Biosystems = 6

13%

Euroimmun = 11 Immco = 2

2% 2%

23%

INOVA = 17 Kallestad = 1 MBL.Menarini = 1

35%

4%

Menarini/Zenit = 9 Movaco = 1

18

IFI ANA Informes totales para esta técnica: 42

IFI-ANA. Dilución de screening 2%

5%

7%

1/10 = 2

21%

1/20 = 3 17%

1/40 = 7 1/80 = 18

5%

1/100 = 2 1/160 = 9 ELISA = 1

43%

IFI-ANA

7%

No titulan = 3 Si titulan = 39

93%

IFI-ANA. Fabricante/distribuidor

2%

5%

Biosystems = 2

24%

Euroimmun = 14 33%

Immco = 1 INOVA = 10 Kallestad = 4

10%

Menarini = 10 2% 24%

Phadia = 1

19

ANTI-MPO 8.2.4. ANTI-MPO Informes totales para esta técnica: 53

ANTI-MPO. Tipo de Técnica 4% 4%

Anchor = 20

8%

Directo = 16 37%

9%

Captura = 4 Quimioluminis = 5

8%

Dot-blot = 4 Luminex = 2 IFI Ag purificado = 2

30%

4%

ANTI-MPO.Fabricante/distribuidor

4% Phadia = 20

4%

Wieslab.EuroDiag = 10

6%

Orgentec = 7 37%

6%

INOVA = 4 Euroimmun = 3

8%

Zenit RA.Menarini = 3 AESKULISA = 2

13% 18%

Biorad = 2 D-tek. Palex = 2

20

ANTI-PR3 Informes totales para esta técnica: 54

ANTI-PR3. Tipo de Técnica 4% 4%

Anchor = 21

7%

Directo = 12

9%

39%

Captura = 8 Quimioluminis = 5 Dot-blot = 4

15%

Luminex = 2 IFI Ag purificado = 2

22%

ANTI-PR3.Fabricante/distribuidor

4% 4%

Phadia = 21

4%

Wieslab.EuroDiag = 10

6%

Orgentec = 6 38%

7%

INOVA = 4 Euroimmun = 4

7%

Zenit RA.Menarini = 3 AESKULISA = 2

11% 19%

Biorad = 2 D-tek. Palex = 2

21

PANEL ANCA (Azurocidina, BPI, Catepsina G, Elastasa, Lactoferrina, Lisozima) Informes totales para esta técnica: 9

PANEL ANCA. TIPO DE TÉCNICA

11% 11% Directo = 7 Captura = 1 Dot-blot = 1 78%

PANEL ANCA.Fabricante/distribuidor

22% 34%

Orgentec = 3 Wieslab.EuroDiag = 3 AESKULISA = 1

11%

Euroimmun = 2 33%

22

9-RESULTADOS 9.1.- Resultados por sueros SUERO 1. RESULTADOS POR LABORATORIO LAB. 1 2 2B 3 3B 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 13B 14 15 16 16B 17 18 19 21 21B 22 23 24 24B 25 26 27 28 29 29B 30 31 32 33 34 34B 35 36 36B 37 37B 38 39 40 40B 41 42 43 44 45 45B 47 47B 48 48B 49 50 50B 50C 50D

IFI-ETANOL C-ANCA A-ANCA P-ANCA A-ANCA

IFI-FORM. POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

IFI-METANOL

P-ANCA C-ANCA Negativo Negativo A-ANCA

NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

X-ANCA

Negativo A-ANCA P-ANCA P-ANCA

A-ANCA P-ANCA P-ANCA Negativo A-ANCA P-ANCA P-ANCA C-ANCA Negativo P-ANCA A-ANCA A-ANCA A-ANCA P-ANCA Negativo C-ANCA A-ANCA Negativo cANCA 1/40 P-ANCA Negativo Negativo Negativo C-ANCA Negativo Negativo Negativo Negativo A-ANCA P-ANCA A-ANCA Negativo P-ANCA A-ANCA P-ANCA A-ANCA A-ANCA A-ANCA A-ANCA Negativo Negativo A-ANCA A-ANCA A-ANCA

IFI-ANA Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo 0,3 Negativo Negativo

ANTI-MPO N <1 Negativo 2,4

ANTI-PR3 N 2,2 Negativo 15 (indeterminado) 0,3 NEG 0,4 0,2 0,4 0,1 1,4 0,3 NEGATIVO N 0,4 Negativo 0,6 0,4 0.4

POSITIVO NEGATIVO

Negativo Negativo

NEGATIVO NEGATIVO

Negativo

NEG 0,1 0 0,1 0 0,3 0,1 NEGATIVO N 0 Negativo 0,1 <0,01 0.0

Negativo Negativo Negativo Negativo

<20 NEG (0,6) 0,2

<20 NEG (1,4) <0,1

Negativo

NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO

Cit. Ref. periférico

OTROS

OTROS

PANEL ANCA MBG

NEGATIVO Negativo

MBG

Negativo

MBG

Negativo

PANEL ANCA

NEGATIVO

MBG

0,8

PANEL ANCA MBG MBG

Negativo 1 Negativo 3,16 U/ml

PANEL ANCA MBG MBG

Negativo 0,01 N

MBG

N

1,2 0,1 UI/ml (N) 0,8

4,8 0,3 UI/ml (N) 0,8

POSITIVO NEGATIVO

No muestra Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo

1,27 0 Negativo 3,04 U/ml Negativo 0,01

1,96 1 Negativo 2,03 U/ml Negativo 0,01

POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo

N Negativo 0,39 N Negativo


Negativo Negativo

N NEG

N NEG

PANEL ANCA

PR3

Negativo

negativo 1,1 0 0 1,4

negativo 2,3 0,1 39 4,6

ASCA

negativo

MBG

2,7

0,1 UI/ml (N) NEGATIVO Negativo 1,17 Negativo

0,3 UI/ml (N) NEGATIVO Negativo 6,99 7; 13; Inespecifico

PANEL ANCA PANEL ANCA MBG PANEL ANCA

NEGATIVO Negativo 6,53 Negatiu

Neg (1,61 U/ml) NEG 1,2

Positivo (21,1 U/ml) NEG 2,5

negativo Negativo 14.7 Negativo

negativo Negativo 0 Negativo

PANEL ANCAS

BPI: 1.08, resto neg

NEGATIVO

NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO

Negativo Negativo NEGATIVO Negativo Negativo Negativo

NEGATIVO

Negativo

POSITIVO POSITIVO NEGATIVO

Negativo

NEGATIVO NEGATIVO CIT. "FLAT"

Negativo

Positivo

Negativo Negativo

23

SUERO 1. RESUMEN IFI-ETANOL TOTAL 57 A-ANCA = 20 P-ANCA = 14 C-ANCA = 6 Negativo = 17

IFI-FORMALINA TOTAL 45 Negativo = 31 Positivo = 14

IFI-ANA TOTAL42 Negativos: 42

ANTI-MPO TOTAL53 Dudoso = 1 Negativo = 52

ANTI-PR3 TOTAL54 Dudoso = 3 Positivo (bajos) = 2 Negativo = 49

PANEL ANCA TOTAL9 BPI: 1 PR3: 1 Negativos: 7; 77,8%

SUERO 1. ETANOL

30%

34%

A-ANCA = 20 P-ANCA = 14 C-ANCA = 6 Negativo = 17

11% 25%

SUERO 1. FORMALINA

31% NEGATIVO = 31 POSITIVO = 14 69%

SUERO 1. ANTI-PR3

SUERO 1. ANTI-MPO

6%

2% 4% Dudoso = 3

Dudoso = 1

Positivo = 2 (bajos)

Negativo = 52

98%

Negativo = 49

90%

24

SUERO 2. RESULTADOS POR LABORATORIO LAB. 1 2 2B 3 3B 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 13B 14 15 16 16B 17 18 19 21 21B 22 23 24 24B 25 26 27 28 29 29B 30 31 32 33 34 34B 35 36 36B 37 37B 38 39 40 40B 41 42 43 44 45 45B 47 47B 48 48B 49 50 50B 50C 50D

IFI-ETANOL C-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA

IFI-FORM. POSITIVO POSITIVO POSITIVO C-ANCA

IFI-METANOL IFI-ANA Positivo 80 Nuclear moteado

P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA C-ANCA

POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO

P-ANCA

P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA

P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA C-ANCA C-ANCA P-ANCA P-ANCA Negativo P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA

Nuclear moteado Nuclear moteado Nuclear moteado 20 Nuclear moteado Nuclear moteado

ANTI-MPO 134 >246 Positivo 300

ANTI-PR3 N <0,6 Negativo 2

OTROS

OTROS

NEG 0,5 0,9 0,7 0,5 0,7 0,5 NEGATIVO N 0,4 Negativo 1 0,5 0.5

PANEL ANCA MBG

NEGATIVO Negativo

MBG

Negativo

MBG

Negativo

PANEL ANCA

NEGATIVO

MBG

0,8

PANEL ANCA MBG MBG

3 Negativo 4 U/ml

0,01 N

POSITIVO POSITIVO

Nuclear moteado Nuclear moteado

POSITIVO POSITIVO

Nuclear moteado

>200 >600 134 >134 >134 >200 >600 235,4 >134 >134 Positivo 4600 >600 >600

POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO

Nuclear moteado Positivo Nuclear moteado Nuclear moteado

148,7 >123 POS ALTO (337) >240

<7,3 <20 NEG (1,1) <0,1

POSITIVO POSITIVO POSITIVO

No muestra Nuclear moteado Nuclear moteado Nuclear moteado Nuclear moteado Nuclear moteado Nuclear moteado Moteado Nuclear moteado

>100 >134 UI/ml (P) 135

2,2 0,4 UI/ml (N) 0,8

862 >134 Positivo >100 U/ml Positivo (>8) >134

2,6 1 Negativo <1,23 U/ml Negativo 0,2

MPO

N

PANEL ANCA MBG MBG

Nuclear moteado moteado grueso Nuclear moteado Moteado

452,36 PFU Positivo

0,88 N Negativo

MBG

N

C-ANCA POSITIVO POSITIVO POSITIVO


>8 POS

N NEG

PANEL ANCA

MPO

Nuclear moteado

negativo


negativo 1,9 0,2 0

ASCA

POSITIVO POSITIVO

positivo 100 >100 200

Nuclear moteado matriz

POSITIVO

POSITIVO POSITIVO

P-ANCA

POSITIVO

P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA


MBG P-ANCA P-ANCA P-ANCA


Nuclear moteado Nuclear moteado Nuclear moteado

P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA

POSITIVO

Negativo


Nuclear moteado


Nuclear moteado

ND

Moteado Nuclear moteado

>134 UI/ml (P) POSITIVO > 200 204,83 >100


Positivo (>300 U/ml) Positivo (>134 Ui/ml) >100

Neg (1,74 U/ml) NEG 2

6000 4,51 > >739 CU

negativo Negativo Negativo Negativo


NEGATIVO Negativo 5,09

PANEL ANCAS

Negativo

25

SUERO 2. RESUMEN IFI-ETANOL TOTAL: 54 C-ANCA: 4 Negativo: 1 P-ANCA: 49

IFI-FORMALINA TOTAL: 43 POSITIVO: 43

IFI-ANA TOTAL: 41 Moteado: 37 Positivo: 3 Negativo: 1

ANTI-MPO TOTAL: 52 POSITIVO: 52

ANTI-PR3 TOTAL: 52 Negativo: 52

PANEL ANCA TOTAL 6 MPO: 1 Negativo: 5 (83,3%)

SUERO 2. IFI-ETANOL 7% 2% C-ANCA = 4 Negativo = 1 P-ANCA = 49 91%

SUERO 2. IFI-FORMALINA

0%

Positivo = 43 Negativo = 0

100%

SUERO 2. MPO

0%

Positivo = 52 Negativo = 0 100%

SUERO 2. PR3

0%

Positivo = 0 Negativo: 52 100%

26


IFI-ETANOL C-ANCA P+C P-ANCA Negativo

IFI-FORM. NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO C-ANCA debil

IFI-METANOL

C-ANCA C-ANCA C-ANCA Negativo C-ANCA

Débil POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO

Negativo

IFI-ANA Negativo Nuc. Mot. y citop. Negativo

ANTI-PR3 22 62,02 Negativo 15 (indeterminado) 11 56 17 18 16 12 75 13 76,5 16 24 Negativo 13 15 15

OTROS

OTROS

PANEL ANCA MBG

LACTOFERRINA + Negativo

MBG

Negativo

MBG

Negativo

PANEL ANCA

LACTOFERRINA +

MBG

0,8

PANEL ANCA MBG MBG

Anti-Lactoferrina 1 Negativo 3,65 U/ml

PANEL ANCA MBG MBG

0,01 N

MBG

N

POSITIVO POSITIVO

Negativo Negativo

Negativo C-ANCA C-Dudoso Negativo Negativo C-ANCA C-ANCA C-ANCA Negativo C-ANCA Negativo C-ANCA C-ANCA P-ANCA Negativo C-ANCA C-ANCA

NEGATIVO NEGATIVO

Negativo

NEG 0,2 0,1 0,1 0 0,1 0 NEGATIVO N 0 Negativo 0,1 <0,01 0

NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO POSITIVO

Nuclear moteado Negativo Negativo Nuclear moteado

<20 NEG (0,3) <0,1

<20 POS ALTO (125) 18

NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO

No muestra Negativo Negativo Negativo Nuclear moteado Negativo Negativo Negativo Negativo

1,4 0,1 UI/ml (N) 0,8

1,7 14 UI/ml (P) 21,6

1,37 0 Negativo <1,23 U/ml Negativo 0,01

5,26 20 Negativo <1,23 U/m Negativo 21

Negativo cANCA 1/40 C-ANCA A-ANCA Negativo Negativo C-ANCA C-ANCA Negativo Negativo Negativo C-ANCA Negativo C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA Negativo

NEGATIVO POSITIVO

Negativo Negativo Negativo


N 14 IU/ml 52,21 Pos.DEB Negativo

Negativo Negativo

N NEG

N NEG

PANEL ANCA

N

Negativo


negativo 1,1 15 0 >200

ASCA

negativo

MBG

2,3

0,1 UI/ml (N) NEGATIVO

14 UI/ml (P) POSITIVO DÉBIL

0 Negativo

0,96 Negativo


LACTOFERRINA Positivo lactoferrina 2,04 PR-3

Neg (0,8 U/ml) NEG 1,3

Neg (9,37 U/ml) Positivo (22 Ui/ml). 1,2


40 Negativo Negativo 238 CU

PANEL ANCAS

Lactoferrina: 1.02

C-ANCA NEGATIVO C-ANCA C-ANCA

C-ANCA C-ANCA A-ANCA A-ANCA C-ANCA Negativo C-ANCA C-ANCA P-ANCA

Negativo Negativo 0,3 Negativo Negativo


Negativo

POSITIVO

POSITIVO POSITIVO

Negativo

POSITIVO NEGATIVO

POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO NEGATIVO

Negativo Nuclear moteado NEGATIVO Negativo Negativo Negativo

POSITIVO

Negativo


Negativo


Nuclear moteado

ND

Negativo Negativo

27

SUERO 3. RESUMEN IFI-ETANOL

IFI-FORMALINA

IFI-ANA

ANTI-MPO

ANTI-PR3

PANEL ANCA

TOTAL: 57

TOTAL: 44

TOTAL: 41

TOTAL: 52

TOTAL: 51

Positivo: 28 (63,6%)

Moteado: 6 (14,6%)

Negativo: 52

C-ANCA: 32 A-ANCA: 4

Negativo: 16 (36,4%) Negativo: 35 (85,4%)

Positivo: 32

62,3%

TOTAL: 8 Lactoferrina: 6 (75%)

Negativo: 19

37,7%

PR-3: 1

P-ANCA: 3

Negativo: 1

Negativo: 18 Técnica. Fabricante Positivo Neg Anchor. Euroimm

0

1

Anchor. Phadia

21

0

Captura. Wieslab

6

1

Directo. Aeskulisa

0

2

Directo. INOVA

0

2

Directo. Orgentec

0

6

Directo. Zenit

1

0

Dot-blot

1

0

Dot-blot. D-tek

1

1

Dot-blot. Euroimm

0

1

IFI. Euroimmun

0

2

Luminex. Biorad

0

1

Quimiolum. INOVA

2

0

Quimiolumi. Zenit

0

2

SUERO 3. ETANOL SUERO 3. FORMALINA

32% C-ANCA = 32

36% Positivo = 28

A-ANCA = 4 56%

Negativo = 16

P-ANCA = 3 Negativo = 18

5%

64%

7%

SUERO3. ANTI-MPO

SUERO 3. ANTI-PR3

0%

Positivo = 0 Negativo = 52

51%

49%

Positivo: 32 Negativo: 19

100%

28


IFI-ETANOL P-ANCA A-ANCA A-ANCA A-ANCA

IFI-FORM. POSITIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO

IFI-METANOL

P-ANCA C-ANCA A-ANCA A-ANCA A-ANCA

POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

X-ANCA

IFI-ANA Negativo Nucleolar Negativo

ANTI-PR3 N 2,35 Negativo 2,1

OTROS

OTROS

NEG 0,3 0,2 0,2 0,2 0,4 0,1 NEGATIVO N 0,3 Negativo 0,5 0,3 0.3

PANEL ANCA MBG

NEGATIVO Negativo

MBG

Negativo

MBG

Negativo

PANEL ANCA

NEGATIVO

MBG

0,8

PANEL ANCA MBG MBG

Negativo 0 Negativo 3,41

PANEL ANCA MBG MBG

Negativo

MBG

N

POSITIVO NEGATIVO

Negativo Negativo

A-ANCA P-ANCA P-ANCA Negativo A-ANCA P-ANCA A-ANCA P-ANCA Negativo P-ANCA A-ANCA A-ANCA A-ANCA Negativo Negativo P-ANCA P-ANCA

NEGATIVO NEGATIVO

Negativo


Nuclear moteado Negativo Negativo Negativo

<20 NEG (0,2) 0,4

<20 NEG (0,3) <0,1

1,2 0,3 UI/ml (N) 0,8

1,8 0,2 UI/ml (N) 0,8

1,99 0 Negativo <1,23 Negativo 0,01


C-ANCA pANCA 1/320 P-ANCA P-ANCA A-ANCA A-ANCA C-ANCA A-ANCA A-ANCA P-ANCA Negativo A-ANCA P-ANCA A-ANCA A-ANCA P-ANCA A-ANCA A-ANCA

POSITIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO



PR3 Negativo 0,26 N Negativo

NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

Nuc. homogéneo Negativo

N NEG

N NEG

PANEL ANCA

N

Negativo

negativo

Negativo Negativo

negativo 1,3 0 12,8 (dudoso) 1,8

ASCA

NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

negativo 1,2 0,4 1,5 1,8

MBG

2,3

NEGATIVO

Nuclear moteado




A-ANCA A-ANCA P-ANCA


POSITIVO

M. insuficiente

NEGATIVO

Negativo

Neg (8,01 U/ml) M. insuficiente 1,3

Neg (2,2 U/ml) M. insuficiente 2,2



PANEL ANCAS

Negativo

Negativo A-ANCA P-ANCA P-ANCA

A-ANCA Negativo A-ANCA C-ANCA A-ANCA



Negativo

NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

P-ANCA

No muestra Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Fibrilar Negativo Negativo

NEGATIVO

POSITIVO POSITIVO

NEGATIVO POSITIVO Otro.Describir

POSITIVO Negativo Negativo Negativo

ND

Negativo Negativo

N

29

SUERO 4. RESUMEN IFI-ETANOL TOTAL: 56 A-ANCA: 27 C-ANCA: 4 P-ANCA: 18 Negativo: 7

IFI-FORMALINA TOTAL: 46 POSITIVO: 15 Negativo: 31

IFI-ANA ANTI-MPO ANTI-PR3 PANEL ANCA TOTAL: 39 TOTAL: 52 TOTAL: 52 TOTAL: 7 Negativo: 7 Moteado: 2 Negativo: 52 Positivo: 1 Fibrilar: 1 Negativo: 51 Nucleolar: 1 Homogéneo: 1 Negativo: 34 (87,2%)

SUERO 4. IFI-ETANOL

13% A-ANCA: 27 48%

C-ANCA: 4 P-ANCA: 18

32%

Negativo: 7 7%


33% POSITIVO: 15 Negativo: 31 67%

SUERO 4. ANTI-MPO

SUERO 4. ANTI-PR3

0%

2%

100%

Positivo: 0

Positivo: 1

Negativos: 52

Negativos: 51

98%

30


IFI-ETANOL Negativo P-ANCA P-ANCA A-ANCA

IFI-FORM. NEGATIVO POSITIVO C. débil R.perif. NEGATIVO

IFI-METANOL

Nuclear A-ANCA ANA ANA Negativo

Citoplasma fibroso X-ANCA Atípico "pocos…. NEGATIVO NEGATIVO

Nuclear homogé.

IFI-ANA homogéneo 640 Nuclear Nuclear homogéneo

ANTI-PR3 N 25,35 Positivo 5

OTROS

OTROS

NEG 0,8 0,9 1 0,8 0,7 0,6 NEGATIVO N 1,2 Negativo 1,3 1,1 0.8

PANEL ANCA MBG

NEGATIVO Negativo

MBG

Negativo

MBG

Negativo

PANEL ANCA

NEGATIVO

MBG

0,8

PANEL ANCA MBG MBG

3 Negativo 4,26

NEGATIVO POSITIVO

Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo

A-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA ANA P+C/ negativo P-ANCA No muestra P-ANCA Negativo P-ANCA C-ANCA P-ANCA ANA P-ANCA P-ANCA

NEGATIVO NEGATIVO

Nuclear homogéneo

NEG 2,1 2 1,3 2,1 0,6 2 NEGATIVO N 2,6 Negativo 3,2 2,6 1.7

Nuclear homogéneo Positivo Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo

<3,8 <20 NEG (0,9) 2,3

<7,3 34 NEG (0,8) 1,2

1,6 2,3 UI/ml (N) 0,8

8,6 0,9 UI/ml (N) 0,8

NEGATIVO POSITIVO

No muestra Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo Homogéneo+fibras cit. Nuclear homogéneo

3,43 2 Negativo 2,54 Positivo (1,1) 1,7

38,7 1 Positivo 8,95 Positivo (1,1) 0,6

C-ANCA pANCA 1/320 P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA A-ANCA Negativo

POSITIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO POSITIVO

Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo Homogéneo


PR3 Negativo 0,51 N Negativo

NEGATIVO

Negativo Nuclear homogéneo

1,1 NEG

Negativo Negativo A-ANCA ANA P-ANCA P-ANCA P-ANCA

NEGATIVO

Negativo

POSITIVO ANA POSITIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO


P-ANCA Negativo P-ANCA P-ANCA

Negativo A-ANCA A-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA A-ANCA A-ANCA

N. homog. + ¿Actina? Negativo 0,4 Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo

ANTI-MPO N 5,328 Negativo 10

Nuclear homogéneo

POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO No muestra NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO POSITIVO

Nuclear Homo.

POSITIVO Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo

POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO


POSITIVO

Homogeneo Nuclear homogéneo

PANEL ANCA MBG MBG

Negativo

MBG

N

1,2 NEG

PANEL ANCA

Lactoferrina +

negativo 1,5 2,7 61,3 3,4

negativo 4,5 0,7 101 4,5

ASCA

negativo

MBG

3,5


0,9 UI/ml (N) POSITIVO DÉBIL

10,2 Negativo

21,52 23, 30 inesp.


NEGATIVO Negativo 10,99 Inespecifico

Neg (10,9 U/ml) NEG 1,5

Neg (3,64 U/ml) NEG 8,1

negativo Negativo 29 Negativo

negativo 1.03 61 114 CU

PANEL ANCAS

Negativo

N ASCA+

31


IFI-FORMALINA

IFI-ANA

ANTI-MPO

TOTAL: 53

TOTAL: 44

TOTAL: 41

TOTAL: 53

TOTAL: 53

%

P-ANCA: 27

POSITIVO: 25

Positivo: 37 (90,2%)

POSITIVO: 5

POSITIVO: 16

30,2

A-ANCA: 15

X-ANCA: 3

Negativos: 4

Negativos: 48

Negativos: 37

69,8

C-ANCA: 2

Negativo: 16

Técnica. Fabricante ANTI-MPO POSITIVOS

Negativo: 9

PANEL ANCA

ANTI-PR3

Anchor. Euroimm

TOTAL: 9 Lactoferrina: 1 AESKULAB.

POSITIVO Negativo 1

0

Luminex 2 de 2 (1,1 ambos)

Anchor. Phadia

0

20

Directo: 1 Orgentec de 5 Quimiolum: Zenit 2 positivos de 3.

Captura. Wieslab

1

6

Directo. Aeskulisa

0

2

Directo. INOVA

2

0

Directo. Orgentec

4

2

Directo. Wieslab

0

1

Directo. Zenit

0

1

Dot-blot

0

1

Dot-blot. D-tek

1

1

Dot-blot. Euroimm

0

1

IFI. Euroimmun

1

1

Luminex. Biorad

2

0

Quimiolum. INOVA

2

0

Quimiolumi. Zenit

2

1

SUERO 5. FORMALINA

SUERO 5. ETALNOL

17% P-ANCA = 27

4% 51%

36%

POSITIVO = 25

A-ANCA = 15

X-ANCA = 3 57%

C-ANCA = 2

Negativo = 16

Negativo = 9

28%

7%

SUERO 5. ANTI-MPO

SUERO 5. ANTI-PR3

9%

30% Positivo = 5

POSITIVO: 16

Negativo = 48

Negativos: 37 70%

91%

32


IFI-ETANOL C-ANCA A-ANCA A-ANCA A-ANCA


IFI-METANOL

P-ANCA C-ANCA Negativo A-ANCA A-ANCA

POSITIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

X-ANCA

IFI-ANA Negativo Negativo Negativo

ANTI-PR3 N <0,6 Negativo 2,7

OTROS

OTROS

NEG 0,3 0,1 0,3 0 0,2 0,1 NEGATIVO N 0,2 Negativo 0,4 0,2 0

PANEL ANCA MBG

NEGATIVO Negativo

MBG

Negativo

MBG

Negativo

PANEL ANCA

NEGATIVO

MBG

0,8

PANEL ANCA MBG MBG


PANEL ANCA MBG MBG

Negativo 0,01 N

MBG

N

POSITIVO NEGATIVO

N. homogéneo Negativo

P-ANCA P-ANCA P-ANCA Negativo A-ANCA P-ANCA A-ANCA A-ANCA Negativo P-ANCA A-ANCA A-ANCA A-ANCA Negativo Negativo C-ANCA A-ANCA

NEGATIVO NEGATIVO

Negativo

NEG 0,2 0,1 0,2 <0,01 0,8 0 NEGATIVO N 0 Negativo 0,1 <0,01 0

NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

N. homogéneo Negativo Negativo Negativo

<20 NEG (0,5) <0,1

<20 NEG (0,4) 0,3

NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

1,2 0,1 UI/ml (N) 0,8

2 0,1 UI/ml (N) 0,8

POSITIVO NEGATIVO

No muestra Negativo Negativo Negativo Negativo M. INSUF. Negativo Negativo Negativo



P-ANCA pANCA 1/320 P-ANCA A-ANCA A-ANCA A-ANCA P-ANCA A-ANCA A-ANCA A-ANCA Negativo A-ANCA P-ANCA

NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO




Negativo Negativo

N NEG

N NEG

PANEL ANCA

N

Negativo

negativo 1,5 0 0

negativo 1,5 0 0

ASCA

negativo

P-ANCA A-ANCA A-ANCA P-ANCA

Negativo Negativo 0,2 N. moteado Negativo


Negativo

NEGATIVO

NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO

Negativo Negativo

MBG P-ANCA A-ANCA A-ANCA


Negativo N. moteado Negativo

A-ANCA A-ANCA Negativo P-ANCA A-ANCA Negativo A-ANCA A-ANCA A-ANCA

NEGATIVO

Mot. y nucleolar

NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO

Nuclear moteado


Negativo

POSITIVO

Homogeneo Negativo

0,1 UI/ml (N) NEGATIVO Negativo 0 Negativo


Neg (1,36 U/ml) NEG 1,5

Neg (2,19U/ml) NEG 1,4





PANEL ANCAS

Negativo

33

SUERO 6. RESUMEN IFI-ETANOL TOTAL: 55 A-ANCA: 29 P-ANCA: 15 C-ANCA: 3 Negativo: 8

IFI-FORMALINA TOTAL: 43 Positivo: 8 Negativo: 35

IFI-ANA ANTI-MPO ANTI-PR3 PANEL ANCA TOTAL: 40 TOTAL: 52 TOTAL: 52 TOTAL: 8 Homogéneo: 3 Negativo: 52 Negativo: 52 Negativo: 8 Moteado: 4 Negativo: 33 (82,5%)

SUERO 6. ETANOL

15% 5%

A-ANCA: 29 P-ANCA: 15 53%

C-ANCA: 3 Negativo: 8

27%


19% Positivo: 8 Negativo: 35 81%

SUERO 6. ANTI-MPO


SUERO 6. ANTI-PR3


34


IFI-ETANOL C-ANCA P-ANCA A-ANCA C-ANCA


IFI-METANOL IFI-ANA Positivo 80 Nuclear homogéneo

Citoplasma NEGATIVO C-ANCA Negativo Negativo

citoplasma debil NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

Negativo

C-ANCA NEGATIVO Negativo C-ANCA

Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo C-ANCA Negativo Negativo C-ANCA Negativo C-ANCA Negativo Negativo Negativo C-ANCA Negativo

Nuclear moteado m. insuficiente Negativo

ANTI-MPO N

ANTI-PR3 N

OTROS

OTROS

Negativo 1,3

Negativo 1,8 NEG 0,2 0,1 0,3 0,1 0,2 0 NEGATIVO N 0 Negativo 0,3 3,9 0.2

PANEL ANCA MBG

NEGATIVO Negativo

MBG

Negativo

MBG

Negativo

PANEL ANCA

NEGATIVO

MBG

0,8

PANEL ANCA MBG MBG

1 Negativo 4,87

PANEL ANCA MBG MBG

0,01 N

MBG

N

NEGATIVO NEGATIVO

Negativo Negativo

NEGATIVO

Negativo

NEG 0,1 0,1 0,1 <0,01 0,4 0 NEGATIVO N 0 Negativo 0,2 <0,01 0

NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO

Citoplás. mot. fino Negativo Negativo Mitocondrial

<20 NEG (0,4) <0,1

<20 NEG (0,4) 0,3

No muestra Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Mot./homogéneo Negativo Negativo

1,1 0,1 UI/ml (N) 0,8

1,5 0,2 UI/ml (N) 0,8



NEGATIVO NEGATIVO

N Negativo Negativo Negativo Negativo


N Negativo 0 N Negativo


P-ANCA

Perinuclear NEGATIVO

Negativo Negativo C-ANCA Negativo Negativo Negativo C-ANCA Negativo

NEGATIVO NEGATIVO

Negativo Citoplás. Mot. difuso

N NEG

N NEG

PANEL ANCA

N

NEGATIVO


NEGATIVO

Negativo

negativo

Negativo Negativo

negativo 1,4 0,1 0

ASCA

NEGATIVO NEGATIVO

negativo 1,1 0,1 0

MBG C-ANCA Negativo Negativo

POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO


Negativo C-ANCA Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo A-ANCA A-ANCA

POSITIVO

Nucleolar


m. insuficiente


Negativo

POSITIVO

Negativo Citoplás. mot. fino



0 Negativo

0,74 Negativo

Neg (1,53 U/ml) m. insuficiente 1,1

Neg (2,28U/ml) m. insuficiente 1,3




NEGATIVO Negativo 3,7 Negatiu

PANEL ANCAS

Negativo

35

SUERO 7. RESUMEN IFI-ETANOL TOTAL: 54 C-ANCA: 14 A-ANCA: 3 P-ANCA: 1 Negativo: 36

IFI-FORMALINA TOTAL: 42 Positivo: 8 Negativo: 34 (81%)

IFI-ANA TOTAL: 39 POSITIVO: 9 dispar Negativo: 30 (76,9%)

ANTI-MPO TOTAL: 49 Negativo: 49

ANTI-PR3 PANEL ANCA TOTAL: 49 TOTAL: 7 Negativo: 49 Negativo: 7

SUERO 7. ETANOL

26% C-ANCA: 14 A-ANCA: 3 6% 66%

2%

P-ANCA: 1 Negativo: 36



SUERO 7. ANTI-MPO


SUERO 7. ANTI-PR3


36


IFI-ETANOL C-ANCA C-ATIPICO C-ATIPICO C-ANCA

IFI-FORM. POSITIVO C-ATIPICO POSITIVO C-ANCA

IFI-METANOL

Citoplasma C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA

citoplasma fuerte NEGATIVO Patrón atípico…. POSITIVO POSITIVO

citop. granular…

C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA

C-ANCA C-ANCA C-ANCA Negativo C-ANCA C-ANCA C-ANCA P-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA Negativo Negativo C-ANCA C-ANCA C-ANCA

IFI-ANA Positivo 80 Citop.mot.difuso Citop.mot.difuso Nucleolar + Anti-citoes. Citop.mot.difuso 4,5 Negativo Citop.mot.difuso



OTROS

OTROS

NEG 0,3 0,2 0,2 0 0,2 0,1 NEGATIVO N 0 Negativo 0,2 <0,01 0.2

PANEL ANCA MBG

NEGATIVO Negativo

MBG

Negativo

MBG

Negativo

PANEL ANCA

NEGATIVO

MBG

0,8

PANEL ANCA MBG MBG

Negativo 1 Negativo 4,26 Negativo

POSITIVO POSITIVO

Nucleolar Citop.mot.difuso

POSITIVO

Citop.mot.fino

NEG 0 0,1 0,1 <0,01 0,2 0 NEGATIVO N 0 Negativo 0,1 <0,01 0

NEGATIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO

Nucleolar Nucleolar Nucleolar Citop.mot.difuso

<20 NEG (0,6) <0,1

<20 NEG (0,4) <0,1

1,2 0,0 UI/ml (N) 0,8

1,3 0,2 UI/ml (N) 0,8



Cit moteado. ANA mot

Citop. refuerzo...

No muestra Citop.mot.difuso Negativo Citop.mot.difuso Nucleolar Negativo Citoplasmatico Negativo Nucleolar

POSITIVO POSITIVO

N

N

PANEL ANCA MBG MBG

Negativo Citop.mot.fino Nucleolar Nucleolar

0,49 N Negativo

0,48 N Negativo

MBG

N

C-ANCA POSITIVO POSITIVO POSITIVO

Moteado/homogéneo SIN MUESTRA

N NEG

N NEG

PANEL ANCA

N

Patrón ribosomal

negativo

Citop.mot.difuso Citop.mot.difuso


ASCA

POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO


MBG

2,4

0,0 UI/ml (N) NEGATIVO Negativo 0 Negativo



NEGATIVO Positivo lisozima 3,76 Negatiu

Neg (1,34 U/ml) NEG 1,1




PANEL ANCAS

Negativo

NEGATIVO

P-ANCA C-ANCA C atípico C atípico P-ANCA C-ANCA C-ANCA A-ANCA A-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA

POSITIVO POSITIVO NEGATIVO

Negativo Negativo C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA

NEGATIVO

comp.ribosomal


Nucleolar

POSITIVO >1/80 POSITIVO

POSITIVO Citop.mot.difuso Nucleolar Citop.mot.difuso

Nuclear moteado

POSITIVO C

Citoplasmático comp.ribosomal

N

37

SUERO 8. RESUMEN IFI-ETANOL IFI-FORMALINA IFI-ANA ANTI-MPO ANTI-PR3 PANEL ANCA TOTAL: 56 TOTAL: 46 TOTAL: 40 TOTAL: 52 TOTAL: 52 TOTAL: 9 C-ANCA: 42 (75%) Positivo: 39, 84,8% Citopl/Ribos/Nucleolar: 31 (77.5%) Negativo: 52 Negativo: 52 Negativo: 8 Atípico: 6 Atípico: 2 Moteado: 2 Lisozima: 1 P-ANCA: 3 Negativo: 5 Positivo no especifica: 2 Eurodiagnostic) Negativo: 5 Negativo: 5

SUERO 8. IFI ETANOL 9% 5%

C-ANCA: 42

11%

Atípico: 6 P-ANCA: 3 75%

Negativo: 5


11% 4%

Positivo: 39 Atípico: 2 85%

Negativo: 5

SUERO 8. ANTI-MPO


SUERO 8. ANTI-PR3


38


IFI-ETANOL C-ANCA C-ANCA P-ANCA C-ANCA


IFI-METANOL IFI-ANA Positivo 80 Nucleolar

C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA


C-ANCA

C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA

C-ANCA Negativo Negativo C-ANCA P-ANCA C-ANCA C-ANCA Negativo Negativo C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA Negativo C-ANCA C-ANCA


ANTI-PR3

<1 Negativo 1

21,25 Negativo 139 49 144 48 59 42 45 172 28 200,1 45 69 Negativo 44 47 44

POSITIVO POSITIVO

Negativo Negativo

POSITIVO

Negativo

NEG 0,2 0,2 0,2 0,1 0,2 0,2 NEGATIVO N 0 Negativo 0,2 0,2 0

POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO C-ANCA POSITIVO NEGATIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO


<3,8 <20 NEG (0,3) 0,2

<7,3 23 POS ALTO (151) 58

No muestra Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo

1 0,2 UI/ml (N) 0,8

2,1 55 UI/ml (P) 61,1

Negativo

POSITIVO POSITIVO

C-ANCA cANCA 1/40 C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA Negativo C-ANCA

POSITIVO POSITIVO

A-ANCA A-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA C-ANCA A-ANCA C-ANCA Negativo C-ANCA C-ANCA C-ANCA

Negativo

ANTI-MPO

0,63 3,45 0 69 Negativo <1,23 Negativo <1,23 Negativo Negativo 0,01 59

POSITIVO POSITIVO



POSITIVO

Negativo Negativo

NEG

NEG

POSITIVO

Negativo

POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO

Negativo Negativo


negativo 1,7 38 0 155


55 UI/ml (P) POSITIVO DÉBIL Negativo 1,95 Negativo

NEGATIVO Negativo Negativo Negativo

POSITIVO

Negativo

POSITIVO NEGATIVO POSITIVO

Negativo


Negativo

ND

Negativo Negativo

PR3 45 142,13 PFU Positivo

OTROS

OTROS

PANEL ANCA MBG

NEGATIVO Negativo

MBG

Negativo

MBG

Negativo

PANEL ANCA

NEGATIVO

MBG

0,8

PANEL ANCA MBG MBG


PANEL ANCA MBG MBG

N

MBG

N

PANEL ANCA

N

ASCA

negativo

MBG

2,8


NEGATIVO Negativo 4,4 PR3

Neg (1,42 U/ml) Positivo (129 U/ml) NEG Positivo (59 Ui/ml). 1,1 1,5


440 Negativo Negativo 91 CU

PANEL ANCAS Negativo

39


IFI-FORMALINA

IFI-ANA

ANTI-MPO

ANTI-PR3

PANEL ANCA

TOTAL: 56

TOTAL: 44

TOTAL: 40

TOTAL: 52

TOTAL: 53

%

C-ANCA: 44

P-ANCA: 42

Positivos: 2

Negativo: 52

Positivos: 36

67,9

TOTAL: 8 Negativo: 7

Atípico: 3

Negativo: 2

Negativo: 38 (95%)

Negativo: 17

32,1

PR3: 1. Mismo lab

P-ANCA: 2

neg para el ELISA

Negativo: 7 Téc. Fabric.

Positivo Negativo

Anchor. Euroimm

0

Anchor. Phadia

20

1 0

Captura. Wieslab

7

0

Directo. Aeskulisa

2

0

Directo. INOVA

1

1

Directo. Orgentec

0

6

Directo. Wieslab

0

2

Directo. Zenit

1

0

Dot-blot

1

0

Dot-blot. D-tek

0

2

Dot-blot. Euroimm

1

0

IFI. Euroimmun

0

2

Luminex. Biorad

0

1

Quimiolum. INOVA

2

0

Quimiolumi. Zenit

0

3

SUERO 9. IFI-ETANOL


5%

13% 4% C-ANCA: 44

5%

Atípico: 3

P-ANCA: 42

P-ANCA: 2

Negativo: 2

Negativo: 7 78%

95%

SUERO 9. ANTI-MPO

SUERO9. ANTI-PR3

0%

32% Positivo: 0

Positivos: 36

Negativo: 52

Negativo: 17 68%

100%

40


IFI-ETANOL P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA


IFI-METANOL

P-ANCA C-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA


P-ANCA

IFI-ANA Positivo 80 Nucleolar con homogéneo Nuclear moteado/homog.


OTROS

OTROS


PANEL ANCA MBG

NEGATIVO Negativo

MBG

Negativo

MBG

Negativo

PANEL ANCA

NEGATIVO

MBG

0,8

PANEL ANCA MBG MBG


PANEL ANCA MBG MBG

N

MBG

N

PANEL ANCA

MPO

ASCA

positivo

POSITIVO POSITIVO

Homogéneo y nucleolar Nuclear moteado

P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA C-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA

POSITIVO POSITIVO

Nuclear homogéneo

89 137 101 >134 >134 155 >600 150 128 >134 Positivo 355 124 136

POSITIVO POSITIVO POSITIVO POSITIVO

Nuclear homogéneo Positivo Moteado y nucleolar Negativo

57,8 106 POS ALTO (170) 99

<7,3 <20 NEG (1,4) ND


72,5 95 UI/ml (P) 136

2 0,3 UI/ml (N) 0,8

POSITIVO POSITIVO

No muestra Scl-70 Nuclear moteado Nuclear moteado Nuclear homogéneo Nuclear homogéneo Homogéneo y nucleolar Falta muestra Moteado tipo Scl-70

54,2 >134 Positivo 82,15 Falta muestra >134

7,44 1 Negativo <1,23 Falta muestra 0,01

P-ANCA pANCA>320 P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA A-ANCA P-ANCA


Nuclear homogéneo Hom.+nucleolar Nuclear moteado Nucleolar/ mot/hom

MPO >600 IU/ml 272,08 PFU Positivo


POSITIVO

Nucleolar SIN MUESTRA

POS

NEG


POSITIVO

Nucleolar

positivo 56,8

negativo 1,7

POSITIVO POSITIVO

Nuclear moteado Otro.Describir

200

0


Nucleolar moteado Nucleolar 6,2 Nucleolarhom.+Nucleolar Nuclear moteado/homog.

ANTI-MPO 108 198,9 Positivo 210

Tipo Scl-70

MBG P-ANCA P-ANCA P-ANCA


Scl-70 Nuclear moteado Nuclear moteado/homog.

P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA P-ANCA

POSITIVO

Negativo


Moteado y Nucleolar.


Nucleolar-Homogéneo

ND

Moteado y Nucleolar Nuclear homogéneo

95 UI/ml (P) POSITIVO > 200 102,23 55


Positivo (>300) Positivo (162) 48


133 3,79 > 670




PANEL ANCAS

Negativo

41

SUERO 10. RESUMEN IFI-ETANOL TOTAL: 54 P-ANCA: 51 (94,4%) C-ANCA: 2 A-ANCA: 1

IFI-FORMALINA TOTAL: 43 Positivo: 43

IFI-ANA TOTAL: 40 Negativo: 2 Positivo: 38 (95%)

ANTI-MPO TOTAL: 50 Positivo: 50

ANTI-PR3 TOTAL: 49 Negativo: 49

PANEL ANCA TOTAL: 7 Negativo: 6 MPO: 1

SUERO 10. IFI-ETANOL 2% 4% P-ANCA: 51 C-ANCA: 2 A-ANCA: 1 94%



SUERO 10. ANTI-MPO


SUERO 10. ANTI-PR3


42

9.2. Análisis de los sueros sin consenso:

Resumen de sueros según consenso del 75% de los participantes SUERO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

ETANOL Sin consenso P-ANCA Sin consenso Sin consenso Sin consenso Sin consenso Sin consenso C-ANCA C-ANCA P-ANCA

FORMALINA Sin consenso Positivo Sin consenso Sin consenso Sin consenso Negativo Negativo Positivo Positivo Positivo

ANA Negativo Nuclear moteado Negativo Negativo Nuclear Homogéneo Negativo Negativo Tipo Ribosomal Negativo Tipo Scl-70

MPO Negativo Positivo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Positivo

ANTI-PR3 Negativo Negativo Sin consenso Negativo Sin consenso Negativo Negativo Negativo Sin consenso Negativo

OTROS Negativo Negativo Lactoferrina Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo Negativo

Patrón IFI- ETANOL según dilución de cribaje del suero para cada laboratorio

Suero 1. IFI-Etanol. Positivos según Tit. cribaje 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

Positivo (%)

1/10. n = 11

1/20. n = 39

1/40. n = 5


Positivo (%)

1/10. n = 11

1/20. n = 40

1/40. n = 5

43

Suero 4. IFI-Etanol. Positivos según Tit. cribaje 100 80 60 Positivo (%) 40 20 0 1/10. n = 11

1/20. n = 39

1/40. n = 5

Suero 5. IFI-Etanol. Positivos según Tit. cribaje 120 100 80 60

Positivo (%)

40 20 0 1/10. n = 10

1/20. n = 38

1/40. n = 4

Suero 6. IFI-Etanol. Positivos según Tit. cribaje 100 80 60 Positivo (%) 40 20 0 1/10. n = 11

1/20. n = 40

1/40. n = 3


Positivo (%)

1/10. n = 10

1/20. n = 40

1/40. n = 3

44

Patrón IFI- FORMALINA según dilución de cribaje del suero para cada laboratorio SUERO 1. IFI-FORMALINA 100 80 60 Positivo (%) 40 20 0 1/10. n = 10

1/20. n = 31

1/40. n = 4

SUERO 3. IFI-FORMALINA 80 70 60 50 40 30

Positivo (%)

20 10 0 1/10. n = 9

1/20. n = 31

1/40. n = 4

SUERO 4. IFI-FORMALINA 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0

Positivo (%)

1/10. n = 10

1/20. n = 32

1/40. n = 4

SUERO 5. IFI-FORMALINA 120 100 80 60

Positivo (%)

40 20 0 1/10. n = 9

1/20. n = 32

1/40. n = 3

45

Sueros sin consenso, IFI Según fabricante. Suero 1 SUERO 1. ETANOL. TOTALES

30%

34%

SUERO 1. FORMALINA. TOTALES

A-ANCA = 20

31%

C-ANCA = 6

NEGATIVO = 31

P-ANCA = 14

POSITIVO = 14

Negativo = 17

69%

11%

25%

Suero 1.Formalina.Patrones Biosystems

Suero 1. Etanol.Patrones Biosystems

33%

A-ANCA

40%

Positivo

C-ANCA P-ANCA

56%

60%

Negativo

Negativo 11% 0%

Suero 1. Etanol.Patrones Euroimmun

Suero 1.Formalina.Patrones Euroimmun

18%

18% 37%

A-ANCA C-ANCA

Positivo

P-ANCA

Negativo

Negativo 36%

82%

9%

Suero 1. Etanol.Patrones INOVA

Suero 1.Formalina.Patrones INOVA

0% 24% A-ANCA

41%

C-ANCA 52%

P-ANCA 24%

Positivo Negativo

59%

Negativo

Suero 1.Formalina.Patrones Zenit

Suero 1. Etanol.Patrones Zenit

0% 36% 46%

0% 18%

A-ANCA C-ANCA

Positivo

P-ANCA

Negativo

Negativo

100%

46

Sueros sin consenso, IFI Según fabricante. Suero 3 SUERO 3. ETANOL TOTALES SUERO 3. FORMALINA TOTALES 7% 32%

A-ANCA = 4

36% Positivo = 28

C-ANCA = 32

Negativo = 16

P-ANCA = 3 64%

Negativo = 18

5%

56%


11%


11% 25% A-ANCA 33%

C-ANCA

Positivo

P-ANCA

Negativo

Negativo

45%

75%



18%

18% 0%

18% A-ANCA C-ANCA

Positivo

P-ANCA

Negativo

Negativo 82%

64%



0% 24% A-ANCA

38%

C-ANCA 6%

Positivo

P-ANCA

Negativo 62%

Negativo 70%



0% 25% 36% 55%

A-ANCA C-ANCA

Positivo

P-ANCA

Negativo

Negativo 9%

75%

47

Sueros sin consenso, IFI Según fabricante. Suero 4 SUERO 4. IFI-ETANOL TOTALES

SUERO 4. IFI-FORMALINA TOTALES

13%

33%

A-ANCA: 27 48%

POSITIVO: 15

C-ANCA: 4

Negativo: 31

P-ANCA: 18

32%

Negativo: 7

67%

7%



25% A-ANCA C-ANCA P-ANCA 62%

13%

50%

50%

Positivo Negativo

Negativo

0%



0% A-ANCA 45%

C-ANCA 55%

P-ANCA

45% 55%

Positivo Negativo

Negativo 0%



0% 35%

35%

A-ANCA C-ANCA

53%

Positivo

P-ANCA Negativo

Negativo 65%

12%



11% 36%

A-ANCA 46%

C-ANCA

Positivo

P-ANCA

Negativo

Negativo 9%

9%

89%

48

Sueros sin consenso, IFI Según fabricante. Suero 5 SUERO 5. ETALNOL TOTALES

SUERO 5. FORMALINA TOTALES

17% 28% A-ANCA = 15 C-ANCA = 2 4%

43%

Positivo = 25

P-ANCA = 27

57%

Negativo = 19

Negativo = 9

51%



0%

13%

13%

0% A-ANCA C-ANCA

Positivo

P-ANCA

Negativo

Negativo 74%

100%



8%

9% 31% A-ANCA

8%

53%

C-ANCA

Positivo

P-ANCA

Negativo

Negativo 91%



13%

18% 35%

A-ANCA C-ANCA

Positivo

P-ANCA

Negativo

Negativo 0% 47%

87%



18% 37%

A-ANCA C-ANCA P-ANCA

43%

Positivo 57%

Negativo

Negativo 36% 9%

49

Sueros sin consenso, IFI Según fabricante. Sueros 6 y 7 SUERO 6

SUERO 7

SUERO 6. ETANOL TOTALES

SUERO 7. ETANOL TOTALES

6%

15%

26%

A-ANCA: 29 53%

27%

P-ANCA: 1

P-ANCA: 15 Negativo: 8

A-ANCA: 3 C-ANCA: 14

C-ANCA: 3

Negativo: 36

2%

66%

5%



14% 25% A-ANCA

62%

13%

14%

C-ANCA

P-ANCA

0%

P-ANCA

Negativo

Negativo 72%

0%


18%

A-ANCA

C-ANCA


0%

0%

0%

18%

A-ANCA

A-ANCA 9%

C-ANCA P-ANCA

C-ANCA P-ANCA

Negativo

Negativo 73%

82%



0%

6%

41%

41%

A-ANCA C-ANCA

A-ANCA C-ANCA

47%

P-ANCA

47%

Negativo

Negativo

0%

18%



0%

20% 40%

P-ANCA

0%

40%

A-ANCA

20% 0%

A-ANCA

C-ANCA

C-ANCA

P-ANCA

P-ANCA

Negativo

Negativo 80%

50

Resultado para ANTI-PR3 según el tipo de técnica y fabricante SUERO 3. ANTI-PR3 25 20 15 Negativo.19

10

Positivo.32

5 An ch or An . E c h uro C ap or. i mm P D tura ha ire . d c t W ia o. ie s D Ae lab ir s D ec t ku ire o lis . a ct o. INO O V D rge A ire c t nte o. c Ze D D nit ot ot D - b -b ot -b lo t. lo t lo D t IF . Eu te k I. r Lu Eu oim m m ro Q in i m ui ex m m u io . B n Q lum i ora ui m . IN d io lu OV m i. A Ze ni t

0

SUERO 5. PR3 25 20 15

Negativo = 37

10

Positivo = 16

5 An ch o An r . E C c ho uro ap r i m D tur . Ph m ire a. a c t W dia o i D . Ae es la D irec s k b ir e to u c t . I lisa D o. O NO ire r V c t ge A o n Di . W tec re i e ct sl a o. b Z Do D en D t- b ot- it ot -b lo t blo t lo . D IF t. E -te I. ur k Lu Eu o im Q mi n r oi m m ui e m x. m u i Q olu Bi o n uim m ra . i o IN d lu O m V i. A Ze ni t

0

SUERO 9. PR3 25 20 15

Nenativo: 17

10

Positivo: 36

5 An ch o An r. E c h ur o C ap or. i m D tur Ph m ire a. a c t W dia o ie D . Ae s la D irec s ku b ire to l c t . I is a D o. O NO ire r V c t ge A o. n D Wi tec ire e c t sl a o. b Z D D eni o D t-b ot- t ot -b lo t blo t lo . D IF t. E -te I. ur k Lu Eu oim Q mi n roi m m ui e m x . mu i Q olum Bi o n ui m . I rad io N lu O m VA i. Ze ni t

0

SUERO 3. ANTI-PR3 Técnica. Fabricante Positivo Anchor. Euroimm 0 Anchor. Phadia 21 Captura. Wieslab 6 Directo. Aeskulisa 0 Directo. INOVA 0 Directo. Orgentec 0 Directo. Zenit 1 Dot-blot 1 Dot-blot. D-tek 1 Dot-blot. Euroimm 0 IFI. Euroimmun 0 Luminex. Biorad 0 Quimiolum. INOVA 2 Quimiolumi. Zenit 0 SUERO 5. ANTI-PR3 Técnica. Fabricante Positivo Anchor. Euroimm 1 Anchor. Phadia 0 Captura. Wieslab 1 Directo. Aeskulisa 0 Directo. INOVA 2 Directo. Orgentec 4 Directo. Wieslab 0 Directo. Zenit 0 Dot-blot 0 Dot-blot. D-tek 1 Dot-blot. Euroimm 0 IFI. Euroimmun 1 Luminex. Biorad 2 Quimiolum. INOVA 2 Quimiolumi. Zenit 2 SUERO 9. ANTI-PR3 Técnica. Fabricante Positivo Anchor. Euroimm 0 Anchor. Phadia 20 Captura. Wieslab 7 Directo. Aeskulisa 2 Directo. INOVA 1 Directo. Orgentec 0 Directo. Wieslab 0 Directo. Zenit 1 Dot-blot 1 Dot-blot. D-tek 0 Dot-blot. Euroimm 1 IFI. Euroimmun 0 Luminex. Biorad 0 Quimiolum. INOVA 2 Quimiolumi. Zenit 0

Neg 1 0 1 2 2 6 0 0 1 1 2 1 0 2

Neg 0 20 6 2 0 2 1 1 1 1 1 1 0 0 1

Neg 1 0 0 0 1 6 2 0 0 2 0 2 1 0 3

51

Resultado para ANTI-PR3 según el tipo de técnica SUERO 3. ANTI-PR3

SUERO 3. TIPO DE ´TÉCNICA

Tipo técnica Positivo Negativo

Anchor

21

25

Captura

6

1

20

Directo

1

10

Dot-blot

2

2

15

Positivo

10

Negativo

5

1

IFI

0

2

Luminex

0

1

Quimiolum.

2

2

.

Q ui m

io lu m

I Lu m in ex

IF

Do t- b lo t

Di re ct o

Ca pt ur a

An ch or

0

SUERO 5. ANTI-PR3

SUERO 5. TIPO DE TÉCNICA


25

Anchor

1

20

Captura

1

6

20

Directo

6

6

15

Positivo

Dot-blot

1

3

10

Negativo

5

IFI

1

1

Luminex

2

0

Quimiolum.

4

1

. io lu m

Q ui m

Lu m in ex

I IF

Do t- b lo t

Di re ct o

Ca pt ur a

An ch or

0

SUERO 9. ANTI-PR3

SUERO 9. TIPO DE TÉCNICA


Anchor

20

25

Captura

7

0

20

Directo

4

9

Dot-blot

3

1

IFI

0

2

Luminex

0

1

Quimiolum.

2

3

15

Positivo Negativo

10 5

1

. ui m io lu m Q

Lu m in ex

I IF

D ot -b lo t

D ire ct o

a C ap tu r

An ch or

0

52

Resumen resultados e imágenes IFI

Suero 1 Diagnóstico: Colitis ulcerosa

Patrón ANCA por I.F.I Según terminología consenso internacional: P-ANCA Según terminología participantes del Taller: A-ANCA / P-ANCA (no consenso)

Especificidad ANCA MPO: negativo PR3: negativo

ANA Negativo 54

Suero 1: A-ANCA / P-ANCA A. Marín. H Vall d’Hebrón. P etanol INOVA 1/20.

A. Marín. H Vall d’Hebrón. HEp-2 / neutrófilos etanol. Euroimmun

Garbiñe Roy. H Ramón y Cajal. P formalina INOVA 1/20

D.Pascual. H. La Paz. P metanol Biosystems 1/20

55

Suero 1: A-ANCA / P-ANCA IFI objetivo x100: No se detectan puntos intranucleares

M.R. Julià. H U Son Espases. P etanol casero I 1/20 56

Suero 2 Diagnóstico: Lupus eritematoso sistémico

Patrón ANCA por I.F.I Según terminología consenso internacional: P-ANCA Según terminología participantes del Taller: P-ANCA

Especificidad ANCA MPO: positivo PR3: negativo

ANA Positivo: anti-Sm, SSA, SSB, U1RNP 57

SUERO 2: P-ANCA, MPO+, ANA+ ML Vargas, I Alcalá. H Infanta Cristina. P etanol MOVACO 1/20

ML Vargas, I.Alcalá. H Infanta Cristina P formalina MOVACO 1/20

H Cruces. MA Pacho. Hep2 Kallestad 1/80

D. Pascual H. La Paz. P Metanol Biosystems 1/20

58

Suero 3 Diagnóstico: Granulomatosis con poliangiitis (G. Wegener)

Patrón ANCA por I.F.I Según terminología consenso internacional: C-ANCA / NEGATIVO Según terminología participantes del Taller: C-ANCA / NEGATIVO (no consenso)

Especificidad ANCA MPO: negativo PR3: positivo (no consenso) Lactoferrina: positivo

ANA Negativo 59

Suero 3: C-ANCA / NEGATIVO, PR3+, LACTOFERRINA+ M.A. Montes. H Virgen del Rocío. P etanol INOVA 1/20

D. Pascual. H La Paz. P formalina INOVA 1/20

A. Marín. H Vall d’Hebrón. Hep-2/neutrófilos etanol 1/10 Euroimmun

D. Pascual. H La Paz. P metanol Biosystems 1/20

60


Patrón ANCA por I.F.I Según terminología consenso internacional: P-ANCA Según terminología participantes del Taller: A-ANCA / P-ANCA (no consenso)


ANA Negativo 61

Suero 4: A-ANCA / P-ANCA Y Barrios, A Franco. H U de Canarias. P etanol Zenit 1/20

A. Marín. H Vall d’Hebrón. Hep-2/neutrófilos etanol Euroimmun 1/10

MJ martínez. Fundación Jiménez Díaz. P formalina INOVA 1/10

G.Roy. H Ramón y Cajal. P metanol Biosystem 1/20.

62

Suero 4: A-ANCA / P-ANCA Objetivo x100: Se observan puntos intranucleares

M.R. Julià. H U Son Espases. P etanol INOVA 1/20

63


Patrón ANCA por I.F.I Según terminología consenso internacional: P-ANCA Según terminología participantes del Taller: P-ANCA / A-ANCA (no consenso)

Especificidad ANCA MPO: negativo PR3: negativo (no consenso)

ANA Positivo, patrón homogéneo 64

Suero 5: P-ANCA / A-ANCA, ANA+ patrón homogéneo MA Pacho. H Cruces. P etanol INOVA 1/20

A.Marín. H Vall d’Hebrón. P formalina 1/10 Euroimmun

P. Martínez. H V Arrixaca. Hep2 Immunoconcepts 1/80

G. Roy. H Ramón y Cajal. P metanol Biosystems 1/20

65

Suero 5: P-ANCA / A-ANCA. IFI sobre portas de neutrófilos fijados con formalina G Roy. H.Ramón y Cajal. INOVA 1/20: resultado +/-

MJ Martínez. Fundación Jiménez Díaz INOVA 1/10: resultado -

P Martínez. H Virgen de la Arrixaca. MBL 1/20: resultado -

A Marín. H Vall d’Hebrón. INOVA 1/20: resultado +

66

Suero 5: P-ANCA / A-ANCA, ANA+ patrón homogéneo IFI Objetivo x100: No se observan puntos intranucleares

M.R. Julià. H U Son Espases. P etanol casero 1/20

M.R. Julià. H U Son Espases. P etanol Biosystems 1/20

67

Suero 6 Diagnóstico: Granulomatosis necrotizante pulmonar

Patrón ANCA por I.F.I Según terminología consenso internacional: P-ANCA Según terminología participantes del Taller: A-ANCA (no consenso)


ANA Negativo 68

Suero 6: P-ANCA / A-ANCA F. Pujalte, M. Alsina. Parc logístic de salut . P etanol Zenit 1/20

P. Eiras. H. Universitario Santiago. Hep2 Kallestad 1/40

M.Rodríguez. H Gregorio Marañón. P formalina INOVA 1/10

M.Rodríguez. H Gregorio Marañón. P metanol Biosystems 1/20

69

Suero 6 Objetivo X100: No se detectan puntos intranucleares

MR Julià. H.U.Son Espases. . P etanol casero 1/20

70

Suero 6: P-ANCA / A-ANCA

C Gelpí. H Sant Pau. P etanol casero absorbido con pellet Hep2

71

Suero 7 Diagnóstico: Granulomatosis con poliangiitis (G. Wegener)

Patrón ANCA por I.F.I Según terminología consenso internacional: NEGATIVO / C-ANCA ATÍPICO Según terminología participantes del Taller: NEGATIVO / C-ANCA ATÍPICO (no consenso)


ANA Negativo 72

Suero 7: ANCA negativo / C-ANCA atípico A.Sánchez. Clínica U. Navarra. P etanol INOVA 1/10

G.Roy. H Ramón y Cajal P formalina INOVA 1/10

P.Martínez. Hep2

Immunoconcepts 1/80

G.Roy. H Ramón y Cajal. P metanol Biosystems 1/10

73

Suero 7: negativo / C-ANCA atípico C.González. H Virgen de la Macarena. P etanol INOVA 1/20: res -

A Prada, R Sáez. H Donostia. P etanol INOVA 1/20: res. +

C.González. H Virgen de la Macarena. P formalina INOVA 1/20: res -

M.Rodríguez. H Gregorio Marañón. P formalina INOVA 1/10: res+

74

Suero Suero 8 8 Diagnóstico: Lupus eritematosos sistémico

Patrón ANCA por I.F.I Según terminología consenso internacional: C-ANCA Según terminología participantes del Taller: C-ANCA


ANA Anti-ribosomal P positivo 75

Suero 8: C-ANCA, anti-ribosomal P + E.Martínez. H.Trías i Pujol. P etanol Euroimmun 1/10

P.Eiras . H U. Santiago . P formalina MBL 1/20

A. Marín. H Vall d’Hebrón. Hep2 / neutrófilos etanol. Euroimmun 1/10

D.Pascual. H La Paz. P metanol INOVA 1/20

76


Patrón ANCA por I.F.I Según terminología consenso internacional: C-ANCA Según terminología participantes del Taller: C-ANCA

Especificidad ANCA MPO: negativo PR3: positivo (no consenso)

ANA Negativo 77

Suero 9: C-ANCA, PR3+ C.Gelpí. H.Sant Pau. P etanol “casero” 1/20

P.Eiras . H U. Santiago . P formalina MBL 1/20

P. Martínez. H Virgen de la Arrixaca. Hep2 Immunoconcepts 1/80


78

Suero 10 Diagnóstico: Vasculitis necrotizante y esclerosis sistémica difusa

Patrón ANCA por I.F.I Según terminología consenso internacional: P-ANCA Según terminología participantes del Taller: P-ANCA

Especificidad ANCA MPO: positivo PR3: negativo

ANA Anti-Scl70 positivo 79

Suero 10: ANCA p, MPO+, SCl70+ P. Eiras. H.C.U.Santiago Compostela. P etanol MBL 1/20

S.Toribio, J.J.Cid . H.U. A Coruña “Teresa Herrera”. P formalina Euroimmun 1/20

M. Espárrago. H. Mérida. Hep2 Euroimmun 1/20


80

Suero 10: ANCA p, MPO+, SCl70+ Objetivo X100: Se observan puntos intranucleares

MR Julià. H.U.Son Espases. P etanol Biosystems 1/20

81

10-CONCLUSIONES 10.1.-Patrones IFI

1-La nomenclatura de los participantes para sueros P-ANCA positivos en etanol y negativos en formalina varía, prácticament al 50%, entre A-ANCA y P-ANCA. Sería conveniente unificar criterios en cuanto a este tema. 2-La positividad, tanto en portas fijados en etanol como en portas fijados en formalina y el tipo de patrón informado, según la IFI en portas etanol, no dependen del origen de los portas (tipo de fabricante) sino de los laboratorios participantes. 3-El hecho de utilizar una dilución de cribaje de 1/10, 1/20 ó 1/40 tampoco condiciona la positividad o negatividad en etanol y formalina. 4- Los participantes no han descrito la presencia o ausencia de puntos intranucleares en sueros P-ANCA positivos. En nuestra experiencia, la detección de puntos intranucleares en sueros P-ANCA positivos de pacientes con colitis ulcerosa no es siempre positiva por microscopía de fluorescencia, por lo que su observación no es útil, en general. Además en sueros con P-ANCA debidos a anticuerpos a-MPO pueden hallarse también anticuerpos dirigidos a estructuras de la membrana nuclear que den dichos puntos en IFI, como ocurre con el suero 10 del taller. 5-En la mayoría de casos, la IFI sobre portas fijados con formalina es más sensible que la IFI sobre portas fijados con etanol. 6-La presencia de anticuerpos dirigidos contra antígenos del citoplasma (antiproteínas ribosomales, por ejemplo) puede dar lugar a patrones C-ANCA, difíciles de distinguir de los dirigidos a proteínas específicas de los neutrófilos, como ha ocurrido con el suero 8 del taller en el que se ha obtenido consenso cono C-ANCA positivo. 7-La absorción con pellet de células HEp2 puede ayudar a distinguir los ANA de los ANCA atípicos, como ocurre en el suero 6, sin embargo, sólo un laboratorio ha informado la utilización de esta técnica. 8-La mayoría de laboratorios no han utilizado portas fijados con metanol, por lo que no es posible deducir conclusiones válidas sobre los resultados obtenidos con los sueros del taller. Los dos sueros a-MPO positivos presentan además antinucleares por lo que también han sido informados como positivos en metanol. Los sueros A-ANCA positivos correspondientes a pacientes con colitis ulcerosa han sido informados positivos en portas fijados con metanol, por los laboratorios que han utilizado este substrato.

10.2-Técnicas de determinación de anti-MPO y anti-PR3

1-Un 12% de laboratorios utiliza técnicas cualitativas para detección de a-PR3 y a-MPO. En algunos laboratorios no se constata técnica cuantitativa de confirmación, necesaria además para un correcto seguimiento de los pacientes, según recomendaciones nacionales e internacionales (1,2,10). 2-Tal como refleja la literatura sobre el tema, existen diferencias en la sensibilidad de las distintas técnicas de detección de a-PR3: Respecto a los sueros nº 3 y 9, las distintas técnicas se comportan de forma similar en ambos: la mayoría de ELISA directos dan negativos, mientras que las técnicas “anchor” y de captura son positivas. Las dos técnicas de quimioluminiscencia utilizadas se comportan de forma opuesta , aunque hay pocos laboratorios que las usan. Estos sueros corresponden a un paciente no activo con granulomatosis con poliangiitis (anteriormente denominada Granulomatosis de Wegener) (suero 3) y a un paciente con colitis ulcerosa (suero 9). Este último caso apoya recientes publicaciones sobre la asociación entre a-PR3 y colitis ulcerosa y la utilidad en su diagnóstico diferencial (8,9). En ambos casos hay concordancia entre los patrones IFI y los ELISA, ya que la mayoría de los laboratorios que dan IFI positiva les atribuye un patrón C-ANCA, característico de PR3. El problema en el paciente 3 (positivo para PR3 en el 49% de determinaciones), es que no está activo, aunque la persistencia de un valor positivo de a-PR3 podría indicar la necesidad de un seguimiento estrecho, para evitar recaída, según postulan algunos autores (15). Otros trabajos describen que el exceso de sensibilidad de algunas técnicas ELISA de última generación puede crear confusión en este tipo de pacientes (16). El suero 5, que corresponde a un paciente con colitis ulcerosa, sólo en el 30% de las determinaciones ha dado a-PR3 positivo y no corresponde a patrón C-ANCA por IFI, por lo que la positividad a-PR3 es discutible. En este caso las técnicas que dan resultado positivo se encuentran dentro de los ELISA directos, dot-blot, quimioluminiscencia y técnica multiplex. Para la determinación de a-MPO hay algunos laboratorios que utilizan técnica directa (mientras que usan una de última generación para a-PR3), de acuerdo con algunos autores que describen mejor capacidad diagnóstica de esta técnica para a-MPO (13). 3- En cuanto a los dos pacientes a-MPO positivos, hay muy buena concordancia entre laboratorios (100% los dan a-MPO positivos) y entre el patrón P-ANCA por IFI y la positividad para a-MPO. Se trata de dos pacientes que presentan una conectivopatía, en el primer caso se trata de un lupus eritematoso sistémico y en el otro de una esclerosis sistémica. El primero no presenta clínica de vasculitis y la biopsia renal tampoco es compatible con vasculitis necrotizante, mientras que el segundo sí que es una vasculitis sistémica. Estos resultados apoyan el hecho de que la presencia de estos anticuerpos en enfermedades autoinmunes sistémicas no va siempre asociada a vasculitis sistémica. 4-La introducción del recientemente aparecido estándar internacional para a-PR3 y aMPO de los “Centers for Disease Control and Prevention (CDC), de Atlanta, puede contribuir a una mayor concordancia de las distintas técnicas, a pesar de que se ha descrito muy variable “binding” de distintos estándares a los diferentes kits (14,17). La

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utilización del estándar internacional podría ser de gran utilidad en la optimización de las técnicas con menor sensibilidad. 5-La detección de antígenos distintos de MPO y PR3 se ha realizado por una minoría de laboratorios. En los sueros de pacientes con colitis ulcerosa (1, 4, 5) , no se ha detectado, mayoritariamente, positividad para estos antígenos “minor”, de acuerdo con la literatura (18).

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Anticuerpos Anticitoplasma de Neutròfilos

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