CROMATOGRAFIA CROMATOGRAFI A EN PAPEL
Técnicas de Laboratorio Químico
CROMATOGRAFIA La cromatografía comprende un conjunto de técnicas que tienen como finalidad la separación de mezclas basándose en la diferente capacidad de interacción de cada componente en otra sustancia. De forma general, consiste en pasar una fase móvil líquida o gas (una muestra constituida por una mezcla que contiene el compuesto deseado en el disolvente) a través de una fase estacionaria fija líquida o sólida. La fase estacionaria retrasa el paso de los componentes de la muestra, de forma que los componentes la atraviesan a diferentes velocidades y se separan en el tiempo. Cada uno de los componentes de la mezcla presenta un tiempo característico de paso por el sistema, denominado tiempo de retención. Cuando el tiempo de retención del compuesto deseado difiere del de los otros componentes de la mezcla, éste se puede separar mediante la separación cromatográfica Separación de una mezcla por la interacción diferencial de sus componentes con una fase estacionaria sólida o líquida en una fase móvil líquida o gas.
CROMATOGRAFIA EN PAPÉL •
La cromatografía en papel es una técnica simple, y económica muy utilizado en los laboratorios para realizar análisis cualitativos ya que no requiere de ningún tipo de equipamiento sofisticado. La fase estacionaria está constituida simplemente por una tira de papel filtro.
COMO SEPARAR LOS COMPONENTES DE UN PLUMÓN DE COLOR POR CROMATOGRAFIA Materiales - Una tira de papel poroso que puede ser papel filtro de una cafetera - Rotuladores de diferentes colores. (analito) - Un vaso de vidrio. - Alcohol. - Un lápiz grafito. Procedimiento
COMO SEPARAR LOS COMPONENTES DE A PLUMÓN DE COLOR •
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Primero se prepara el papel. Se recorta una tira de papel poroso con unas dimensiones de 1,5 cm de ancho y que sea un poco más larga que la longitud del vaso que se va a utilizar para realizar la cromatografía. Luego de cortado el papel, se deberá marcar con lápiz grafito una línea paralela y a un cm de la base. Papel horizontal
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Al centro de esta linea se marcará un punto de la muestra, repitiendo unas tres veces para cargar mejor el color (mas concentrado). Esta mancha debe ser intensa pero no muy grande, como una especie de punto grueso.
FASE MÓVIL •
Es momento de adicionar al vaso una cantidad de solvente(alcohol, acetona, agua o mezclas líquidos) aproximadamente 1 cm de altura, medida desde el fondo del vaso. Ocupar un solvente en que la muestra es soluble.
CAMARA CROMATOGRAFICA •
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Preparada la muestra se coloca el listón fijo con cinta adhesiva dentro del vaso, soportándolo con una varilla de manera que quede colgando en un vaso que contiene hasta aproximadamente 1 cm de solvente. El extremo del papel debe quedar contactando el líquido, la mancha de muestra queda ubicada fuera del líquido. Se tapa el vaso para evitar la evaporación del solvente.
LA SEPARACIÓN •
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A medida que el agua (el disolvente) va desplazándose por el papel filtro (el medio poroso), arrastra consigo los pigmentos que contiene la mancha de tinta. Como no todos son arrastrados con la misma velocidad, al cabo de un rato se forman unas franjas de colores que corresponden a los componentes de la tinta del rotulador
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Se observan como aparecen manchas de diversos colores sobre el papel, lo que indica la variedad de tintas utilizadas para crear un color determinado.
Este experimento, lo podemos repetir con diversas tintas de colores para poder comparar los componentes de cada una de ellas.
Cámara cromatografíca El disolvente asciende entonces por capilaridad a lo largo de la placa, arrastrando a los compuestos a diferentes velocidades, según el grado de adsorción
Factor de retención (R f )
CROMATOGRAMA
Al comparar el valor del factor de retension en el cromatograma obtenido con otros de sustancias patrones , es posible identificar los componentes de la muestra. Si dos cromatogramas responden al mismo valor ; entonces se trata del mismo compónene
Pigmentos vegetales •
Para preparar una muestra de pigmentos vegetales, es necesario la previa disminución del tamaño y mezcla de la muestra con el solvente.
EXTRACCION •
Se extrae la mezcla de pigmentos y a través de su paso por la fase estacionaria, será posible separar los diferentes componentes de esta muestra.
Utilizando el solvente adecuado Se pueden separar e identificar las clorofilas, Xantofilas y carotenos, •