analisis kandungan protein dengan etode kjedahl, praktikum Analitik instrumen.polban
Penerapan jumlah protein secara empiris yang umum dilakukan adalah dengan menentukan jumlah nitrogen (N) yang dikandung oleh suatu bahan. Cara penentuan ini dikembangkan oleh Kjeldahl, seora…Full description
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Ventajas, desventajas, evolución, reacciones del metodo Kjeldal.Full description
Funcinamiento del metodo kjeldhal para determinación de proteinas en alimentosDescripción completa
Descripción: análisis por medio del método microkjeldahl
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Metode KjeldahlFull description
Carrera de Bioquímica Departamento de Ciencias Químicas y Recursos Naturales Facultad de Ingeniería, Ciencias y Administración Prof. Felipe Gallardo Arriagada Universidad de La Frontera
Método KJELDAHL
Nombre: Leonardo E. Altamirano Esparza
Objetivos
Dar a conocer una pequeña reseña de “cuadro histórico” del desarrollo del método de Kjeldahl, y responder a las incógnitas: ¿Quién fue Kjeldahl? ¿A qué se debe la obtención de la técnica?
Conocer el método de Kjeldahl y su importancia en la actualidad.
Estudiar el fundamento tras el método.
Ser capaz de comprender el método y aplicación de este.
Entregar con claridad pasos y fórmulas que implican el método, además de datos importantes para el desarrollo de casos/problemas.
Demostración del método a través de un ejemplo.
Introducción
Método Kjeldahl
Destilación
Digestión
Método Kjeldahl Desventajas
Ventajas
Versatilidad para varios tipos de productos
Alta fiabilidad
Método de referencia.
Uso de catalizadores tóxicos y caros Interfieren compuestos nitrogenados no proteicos (en la industria alimentaria) Elección del factor de conversión
Digestión
Destilación
Valoración
Cálculos
Donde: V: volumen, N: normalidad, f: factor de corrección, PeqN: Peso equivalente, f P: factor de conversión de nitrogeno a proteinas,
Técnica operatoria Reactivos
Sulfato de cobre (II) pentahidratado PA Sulfato de potasio anhidro PA Hidróxido de sodio PA Ácido sulfúrico PA (96% m-m; 1.84 Kg/L) Ácido clorhídrico PA (30-37% m-m; 1.19 Kg/L) Etanol 96% V-V Solución de hidróxido de sodio 40% m-V Solución alcohólica de ácido bórico 4% m-V Solución estandarizada de ácido clorhídrico 0.02 N. Solución de Hidróxido de sodio, 40% m-V Solución indicadora de rojo de metilo y azul de bromocresol verde.
Materiales
Balanza analítica con capacidad máxima de 200 g y valor de división 0.1 mg. Aparatos de digestión o mecheros de gas Aparato de destilación con trampa Kjeldahl Buretas Pipetas Balanza técnica con capacidad máxima de 200 g y valor de división de 0.1 g Cilindro graduado Frasco lavador Erlenmeyer de 100 mL Balón Kjeldahl de 100 o 500 mL Equipo de destilación provisto de una trampa Kjeldahl Matraz aforado de 200 o 250 mL
Técnica operatoria
Técnica operatoria
(figs: digestor y destilador Kjeldahl que se encuentran en los laboratorios del dept. de agroindustrias de la universidad de la frontera)
Ejemplo El contenido en proteína de una muestra de pescado se determinó pesando 1.210 g. Tras la digestión la disolución resultante se alcalinizó con un exceso de NaOH, se destiló con vapor de agua y el NH3 liberado se recogió sobre 50 mL de H3BO3 y posteriormente fue valorado con H2SO4 0.3N, gastándose 17.7 mL del mismo. Calcular el % de proteína en la muestra de pescado. • Equivalentes de N = Equivalentes de H2SO4:
17.7x10-3 L H2SO4 x 0.3 N H2SO4= 5.31 x10-3 • g N= (5.31 x10-3 equiv N x 14 g/equiv)= 0.07434 g • g N/100 g = (0.07434 g N/ 1.21 g muestra) x 100 = 6.143 g N/100 g muestra
Para pasar a contenido de proteínas corregir por el factor adecuado según la naturaleza de la muestra (para el pescado = 6.25, tabla 1). g proteínas/100 g = 6.143 g N/100 g x 6.25= 38.39 g proteínas/100 g muestra (E. García y I. Fernández, 2012)
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