Gp-1.2-Reacciones Colorimetricas de Las Proteinas

REACCIONES COLORIMÉTRICAS DE LAS PROTEÍNAS OBJETIVO: Reconocer las proteínas mediante sus propiedades e identificar el tipo de aminoácidos presentes en una proteína.

INTRODUCIÓN: Para cada enzima existe un óptimo del pH a que crean las condiciones más favorables para el mantenimiento de la conformación funcionalmente activa de la molécula. Los grupos amino y carboxilo de los restos de aminoácidos ionizados a una magnitud de pH determinada, participan en el mantenimiento de la conformación de la molécula proteínica necesaria para la formación de los centros catalíticos de enzima y favorecen también a su ligación con el sustrato. A una magnitud de pH distinta se altera la ionización de los grupos correspondientes, y como resultado se rompen los enlaces que aseguran la formación de los centro catalíticos, y la enzima se inactiva. A los valores de pH muy altos o muy bajos las enzimas se desnaturalizan.

MATERIAL DE VIDRIO: o o o o o

2 Balón de aforo de 50ml 2 Balón de aforo de 25ml 2 Pipeta de 5ml 3 tubos de ensayos Vaso de precipitación de 250 y 500 ml

EQUIPOS DE LABORATORIO: o o o o o o o

1 pinza de madera 2 Gradilla 1 Gotero 1 Baño maria 1 Termómetro 1 Pizeta 1 Pera

SUSTANCIAS: Muestras: leche, clara de huevo, jugo de espinacas, o vegetales (de preferencia usar muestras líquidas) o  Hielo o

o o o o

HNO3 concentrado NaOH al 40% y 20 % Sulfato cúprico 1% Acetato de plomo al 5%

PROCEDIMIENTO: Esta práctica consta de 3 partes: Reacción Xantoproteíca (Para identificar aminoácidos con que tienen a) un núcleo bencénico) 1. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de muestra 2. Añadir 1ml de HNO 3 concentrado 3. Calentar a baño maría 4. Enfriar con agua fría 5. Añadir gota a gota NaOH al 40% 6. Observar los resultados, un colorar anaranjado oscuro nos indica un positivo.

b)

Reacción de Biuret (Para identificar uniones peptídicas) 1. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de muestra 2. Añadir 2ml de NaOH al 20% 3. Añadir 4-5 gotas de sulfato cúprico 1% 4. Observar los resultados, un colorar violeta rosácea nos indica un positivo.

c)

Reacción de aminoácidos azufrados 1. Colocar en un tubo de ensayo 2-3ml de muestra 2. Añadir 2ml de NaOH al 20% 3. Añadir 10 gotas de acetato de plomo al 5% 4. Calentar el tubo hasta ebullición 5. Observar los resultados precipitado negro nos indica un positivo

RESULTADOS DE LAS PRUEBAS EFECTUADAS: Según estos resultados que muestras tienen un núcleo bencénico presente, uniones peptídicas y azufre, justifique y discuta. 

CUESTIONARIO: 1. ¿Qué son los aminoácidos? 2. Dibuje la estructura básica de un aminoácido?

3. 4. 5. 6.

Dibuje el enlace peptídico entre dos aminoácidos? ¿Qué son las proteinas? ¿Cómo influyen los aminoácidos en la dieta? Ponga el fundamento y un ejemplo de las reacciones de Xantoproteíca, de Biuret y de aminoácidos azufrados? 7. Dibuje los aminoácidos que tienen anillos aromáticos y azufre. 8. ¿Qué tipos de patologías se asocian con una disminución de aminoácidos y proteinas en la dieta?

BIBLIOGRAFÍA BIOQUIMICA.  

H.R. HORTON HISPANOAMERICANA, S.A. 1993.

et

al.

DE

PRENTICE

HALL

BIOQUIMICA.   J. DAVID RAWN. AD. INTERAMERICANA Mc. GRAW  –  HILL,

1989.

BIOQUIMICA.   LUBERT

STRYER.

AD.

REVERTE,

S.A.

3ª.

Edición.

ESPAÑOL1993 BIOQUIMICA DE HARPER.   ROBERT K MURRAY. AD. MANUAL MODERNO,

S.A. DE C.V. 1994 BIOQUIMICA: LAS BASES MOLECULARES DE LA ESTRUCTURA Y FUNCION CELULAR.   ALBERT LEHNINGER. EDICIONES OMEGA, S.A. 7ma.

REIMPRESION 1983 PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY.  ALBERT LEHNINGER. AD. WORTH

PUBLISHERS, INC. 1980.