Identifikasi dan Determinasi Bakteri

LAPORAN PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI

IDENTIFIKASI IDENTIFIKASI DAN DETERMINASI BAKTERI : PENGECATAN GRAM DAN UJI BIOKIMIAWI Disusun Oleh : Agaha Nensi!a "ena#$

%&'%%&()%

A*hla+ul Ka#i,ah W-S-.W-S-.-

%&'%%&()/

E#i0a Kusu,a Raha$u S-

%&'%%&()1

Dian Pe#i2i

%&'%%&()&

Kel3,43* P#a*i*u,5Kelas : C%-%  Nilai La43#an

Tanggal Tanggal !an Pa#a6 Asisen Asisen

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI FAKULTAS FARMASI UNI"ERSITAS SANATA D.ARMA 7OG7AKARTA /(%8

ACARA I" IDENTIFIKASI DAN DETERMINASI BAKTERI : PENGECATAN PENGECATAN GRAM DAN UJI BIOKIMIAWI B IOKIMIAWI A- TUJUAN %- Penge0 Penge0aan aan g#a, g#a, : ,eliha ,eliha 9enu* 9enu* sel #ang* #ang*aia aian n sel si6a si6a g#a, ;g#a, ;g#a, negai6 negai6 !an g#a, g#a,  43sii6si >si6a 6a  9i3*i,ia2in$a B- TINJ TINJAU AUAN AN PUST PUSTA AKA Ba*e#i ,e,ili*i !in!ing sel $ang e9al !an *a*u $ang ,engau# *e*e#asan sel !an ,e,9e!a*an *a#a*e# 9enu*n$a- Pen$usun ua,a !in!ing sel $ang ,engau# *e*a*uann$a a!alah se9uah su9sansi uni* $ang !ise9u 4e4i!3gli*an ;,u#ein<- Ini ,e#u4a*an 43li,e# $ang ,e,ili*i ,assa ,3le*ul $ang 9esa# $ang e#susun !a#i iga 9agian $a*ni N>aseilglu*3sa,in asa, N>aseil,u#a,a !an #anai 4e4i!a 4en!e* ;.3gg /((8
Asa, ei*3a =uga ,enga,9il 9agian !ala, 4e#u,9uhan sel ,en0egah *e#usa*an !in!ing sel !an *e,ung*inan 4e0ahn$a sel ;T3#3#a Fun*e an! Case /(%(negai6 e#!i#i !a#i li4343lisa*a#i!a ;LPS< li434#3ein !an 63s63li4i!- Muaan negai6 $ang *ua ,e#u4a*an 6a*3#   4ening !ala, ,enghin!a#i 6ag3si3sis !an in!a*an *3,4le,en ;,elisis*an sel !an ,en!3#3ng 6ag3si3sis< !ua *3,43nen 4e#ahanan inang- Me,9#an lua# =uga ,enghalangi ani9i3i* e#enu ;,isaln$a 4enisilin< en@i, 4en0e#naan se4e#i lis3s3, !ee#=en l3ga,  9e#a ga#a, e,4e!u !an 4e2a#na e#enu- Me,9#an lua# i!a* ,enghalangi se,ua @a *a#ena nu#isi ha#us !a4a ,ene,9us ,e,9#an lua# unu* ,e,4e#ahan*an ,ea93lis,e sel- Bagian !a#i 4e#,ea9ilias !a#i ,e,9#an lua# *a#ena 4#3ein !ala, ,e,9#an !ise9u 43#in 9e#9enu*  se4e#i salu#an- P3#in ,engi@in*an ,asu*n$a ,3le*ul se4e#i nu*le3i!a !isa*a#i!a 4e4i!a asa, a,in3 ?ia,in B%/ !an @a 9esi ;T3#3#a Fun*e an! Case /(%(sel 9a*e#i g#a, 43sii6 !an g#a, negai6 =uga 9e#9e!a e#ha!a4  9ahan *i,ia se4e#i ani9i3i* ;sel>sel g#a, 43sii6 le9ih #enan e#ha!a4 4enisilin sel g#a, negai6 e#ha!a4 e#asi*lin<- Selain iu sel>sel g#a, negai6 ,e,ili*i !in!ing sel $ang le9ih *3,4le*s- Ba*e#i g#a, 43sii6 !an s4esies 9a*e#i g#a, negai6 !a4a ,enghasil*an =enis #a0un $ang 9e#9e!a ;P3,,e#?ille /(%%*el3,43* e#enu- Tes $ang u,u, a!alah: 6e#,enasi *a#93hi!#a 4enggunaan su9s#a e#enu !an 4#3!u*si 4#3!u*  e#enu aau 4#3!u*>4#3!u* li,9ah- Sa,a se4e#i *a#a*e#isi* 6isi* 9e9e#a4a es 9i3*i,ia se#ing*ali !i4e#lu*an unu* ,e,9e!a*an ana# s4esies ;P3,,e#?ille /(%%
1. Hidrolisis Gelatin Meskipun kandungan nutrisi gelatin masih dipertanyakan (gelatin merupakan protein yang tidak lengkap, tidak punya asam amino

esensial triptofan), gelatin penting dalam identikasi spesies bakteri. Di bawah termperatur !o", gelatin umumnya berbentuk padat# pada temperatur di atas !o", gelatin men$air. %en$airan dipengaruhi oleh beberapa bakteri

yang mampu

memproduksi proteolitik en&im ekstraseluler yang disebut gelatinase, yang berfungsi untuk menghidrolisis protein men'adi asam amino. etika degradasi ini ter'adi, meski gelatin dalam temperatur o" tidak akan mengembalikan karakter gelnya. . *ermentasi arbohidrat O#ganis,e ,engguna*an *a#93hi!#a se0a#a 9e#9e!a e#ganung 4a!a en@i, *3,4le,enn$a- Be9e#a4a 3#ganis,e ,a,4u ,e,6e#,enasi gula se4e#i glu*3sa se0a#a anae#39 *ei*a $ang lainn$a ,engguna*an =alu# ae#39- Se!ang $ang lain 6a*ulai6  anae#39 se0a#a en@i,ai* !a4a ,engguna*an =alu# ae#39 !an anae#39 se!ang $ang lainn$a i!a* ,a,4u ,eng3*si!asi glu*3sa se0a#a *e!uan$aDala, 6e#,enasi su9s#a se4e#i *a#93hi!#a !an al*3h3l ,engala,i !isi,ilasi anae#39 !an ,enghasil*an asa, 3#gani* ;03n3hn$a la*a 63#,ia aau asa, asea< !an ,ung*in =uga !ihasil*an gas se4e#i . / !an CO /-

+. est H- dan *ermentasi GulaGula Tes 6e#,enasi gula> gula ;TSI< !i#an0ang unu* ,e,9e!aan *el3,43* genus !a#i Ene#39a0e#ia0eae !i,ana se,ua 9a*e#i g#a, negai6 ,a,4u ,ela*u*an 6e#,enasi glu*3sa !engan ,e,4#3!u*si asa, !an unu* ,e,9e!a*an g#a, negai6 genus Ene#39a0e#ia0eae !a#i 9a*e#i inesinal- Aga# TSI e#!i#i !a#i la*3sa su*#3sa !ala, % *3nsen#asi !an glu*3sa !ala, *3nsen#asi (% $ang han$a 9e#,an6aa unu*  ,en!ee*si su9s#a- In!i*a3# asa, 9asa  phenol red  =uga !a4a !iguna*an ,en!ee*si 6e#,enasi *a#93hi!#a !iliha !engan 0a#a 4e#u9ahan 2a#na ,e!iu, !a#i =ingga>,e#ah ,en=a!i *uning !i*a#ena*an a!an$a 9asaSeelah ,elalui in*u9asi *ia !a4a ,en!ee*si a*i?ias 6e#,enasi !a#i 3#ganis,e $ang !a4a !i!is*#i4si*an !i9a2ah ini : a- Basa slan ;,e#ah< !an asa, 9u ;*uning< !engan aau an4a ,e,4#3!u*si gasMa*a !engan hal ini han$a 6e#,enasi glu*3sa $ang e#=a!i 9- Asa, slan ;*uning< !an asa, 9u ;*uning< !engan aau an4a 4#3!u*si gas.al ini ,enan!a*an han$a 6e#,enasi la*3sa !an glu*3sa $ang e#=a!i0- Basa slan ;,e#ah< !an 9asa 9u ;,e#ah< aau 9u i!a* 9e#u9ah ;=ingga>9u< .al ini ,enan!a*an i!a* a!an$a 6e#,enasi *a#93hi!#a $ang e#=a!iMe!ia TSIA =uga ,engan!ung na#iu, i3sul6a se9uah su9s#a unu*  ,e,4#3!u*si H- !an 6e##3 sul6a unu* !ee*si 2a#na 4#3!u* a*hi#- In*u9asi le9ih lan=u han$a 3#ganis,e *ulu# $ang ,a,4u ,e,4#3!u*si H- yang menun'ukkan

endapan hitam pada butt karena penurunan kelarutan ferro sulfat. . est /ndol

T#i436an ,e#u4a*an asa, a,in3 esensial $ang !a4a ,engala,i 3*si!asi *a#ena a*i?ias en@i, 9e9e#a4a 9a*e#i- Pe#u9ahan #i436an ,en=a!i 4#3!u* ,ea93lis,e !i4e#ana#ai !engan en@i, #i436anase- Ke,a,4uan unu* ,enghi!#3lisis #i436an !engan ,e,9enu* in!3l 9u*an ,e#u4a*an *a#a*e# selu#uh ,i*#33#ganis,e !an *a#enan$a !iguna*an se9agai 4enan!a 9i3*i,ia!. Tes MR  Pa!a es 4. in!i*a3# ,eh$l #e! ,en!ee*si a!an$a asa, !ala, *3nsen#asi  9esa# se9agai 4#3!u* a*hi#- Ban$a* ,i*#33#ganis,e ene#i* ;$ang 9e#a!a !ala, salu#an 0e#na< ,e,6e#,enasi glu*3sa !engan ,e,4#3!u*si asa, 3#gani* es ini 9e#guna !ala,  4e,isahan E. coli !an E. aerogenes0. Tes "P Tes "3ges P#3s*aue# ,e,9e!a*an *e,a,4uan 9e9e#a4a ,i*#33#ganis,e unu*  ,e,4#3!u*si 4#3!u* a*hi# $ang 9e#si6a i!a* asa, 5 ne#al se4e#i aseil,eil>*a#9in3l !a#i asa, 3#gani* $ang !ihasil*an !a#i ,ea93lis,e glu*3sa. Tes Penggunaan Si#a Be9e#a4a ,i*#33#ganis,e ,a,4u ,engguna*an si#a se9agai su,9e# *a#93n unu* ene#gi- Si#a !i4e0ah !engan en@i, si#ase ,en=a!i asa, 3*sal3asea !an asea2. Tes U#ease U#ease $ang !i4#3!u*si 3leh 9e9e#a4a ,i*#33#ganis,e se9uah en@i, $ang *husun$a ,e,9anu i!eni6i*asi  Proteus vulgaris- U#ease ,e#u4a*an en@i, hi!#3lii*  $ang ,en$e#ang i*aan ana#a ni#3gen !an *a#93n 4a!a a,i!a se4e#i u#ea !an ,e,9enu* 4#3!u* a*hi# 9e#si6a 9asa ;a,,3nia<3. Tes Kaalase Sela,a #es4i#asi ae#39 ,i*#33#ganis,e ,e,4#3!u*si hi!#3gen 4e#3*si!a !an !ala, 9e9e#a4a *asus suau su4e#3*si!a $ang ,e#u4a*an @a 3*si* 9e#9aha$a- A*u,ulasi !a#i su9sansi ini a*an ,en$e9a9*an *e,aian !a#i 3#ganis,e *e0uali =i*a su9sansi ini !a4a !i!eg#a!asi se0a#a en@i,ais- Su9sansi ini !i4#3!u*si *ei*a !iguna*an =alan #es4i#asi ae#39 !i,ana 3*sigen ,en=a!i a*se43# ele*#3n e#a*hi# sela,a !eg#a!asi *a#93hi!#a unu* 4#3!u*si ene#gi- O#ganis,e $ang ,a,4u ,e,4#3!u*si *aalase se0a#a 0e4a ,en!eg#a!asi hi!#3gen 4e#3*si!a-

C- LANDASAN TEORI Ba*e#i ,e,ili*i !in!ing sel $ang e9al !an *a*u $ang e#!i#i !a#i 4e4i!3gli*an $a*ni se9uah su9sansi $ang e#!i#i !a#i  N>aseilglu*3sa,in asa, N>aseil,u#a,a !an #anai  4e4i!a 4en!e*Penge0aan g#a, e#,asu* !ala, 4enge0aan !i66e#ensial $a*ni 4enge0aan unu*  ,e,9e!a*an =enis 9a*e#i- Be#!asa#*an 4a!a hasil 4enge0aan g#a, se0a#a u,u, 9a*e#i !i9e!a*an ,en=a!i / =enis $a*ni 9a*e#i g#a, 43sii6 !an 9a*e#i g#a, negai6- Ba*e#i g#a,  43sii6 a*an ,e,9e#i*an 2a#na ungu se!ang 9a*e#i g#a, negai6 ,e,9e#i*an 2a#na 4in*  seelah ,enge0aan g#a,- Pe#9e!aan ini !ise9a9*an *a#ena a!an$a 4e#9e!aan s#u*u# !in!ing selBa*e#i g#a, 43sii6 ,e,ili*i s#u*u# !in!ing sel $ang e9al !engan a!an$a 9an$a*  la4isan 4e4i!3gli*an- Ba*e#i ini =uga ,e,ili*i asa, ei*3a $ang 9an$a* ,engan!ung al*3h3l !an 63s6a- Ka#ena a!an$a gugus 63s6a ini asa, ei*3a !a4a ,engi*a !an ,engau#  *elua# ,asu*n$a *ai3n se#a ,en0egah a!an$a *e#usa*an 4a!a !in!ing sel !an *e,ung*inan lisisn$a selBa*e#i g#a, negai6 ,e,ili*i s#u*u# !in!ing sel $ang e#!i#i !a#i se!i*i  4e4i!3gli*an !an ,e,9#an lua# !i,ana 4e4i!3gli*an e#i*a 4a!a li434#3ein- Ka#ena se!i*in$a *an!ungan 4e4i!3gli*an $ang a!a 4a!a !in!ing sel 9a*e#i g#a, negai6 ,a*a !in!ing sel a*an le9ih ,u!ah ,engala,i *e#usa*an ,e*ani*- Selain iu 4a!a ,e,9#an lua#  $ang e#!i#i !a#i 4i4343lisa*a#i!a li434#3ein !an 63s63li4i! e#!a4a 43#in se9agai salu#an $ang 9e#6ungsi ,engau# *elua# ,asu*n$a ,3le*ul se4e#i nu*le3i!a !isa*a#i!a 4e4i!a asa, a,in3 ?ia,in B%/ !an @a 9esiU=i 9i3*i,ia !iguna*an unu* ,e,aha,i 6isi3l3gi !an 9e9e#a4a es !ila*u*an unu*  ,e,9e!a*an ana# s4esies 9a*e#i *a#ena a!an$a si6a ,ea93li* $ang han$a !i,ili*i 3leh s4esies e#enu- Be9e#a4a u=i 9i3*i,ia2i $ang !ila*u*an !iana#an$a : es hi!#3lisis gelain es 6e#,enasi *a#93hi!#a es ./S !an 6e#,enasi gula>gula es in!3l es MR>"P es  4enggunaan si#a es u#ease !an es *aalase-

D- SKEMA KERJA I- Penge0aan G#a, Ala !an Bahan : Mi*#3s*34 0aha$a • C#$sal ?i3le ;G#a, A< • La#uan i3!ine ;G#a, B< • Al*3h3l ) ;G#a, C< • Sa6#anin ;G#a, D< • Min$a* i,,e#si • Is3la ,u#ni 9a*e#i anah ;hasil 4e#039aan A0a#a III< • Gelas 9en!a • Ja#u, 3se • S*e,a Ke#=a : Pulasan 9a*e#i !i9ua !i aas 39=e* gelas !i*e#ing*an !an !i6i*sasi !engan a4i-

Ca 0#$sal ?i3le ;G#a, A< !iees*an !an !i!ia,*an 1(>( !ei*-

Sisa 0a !i9uang !an sisan$a !i0u0i !engan ai# ,engali#-

La#uan i3!ine ;G#a, B< !iees*an !an !i!ia,*an sela,a %>/ ,eni-

Di0u0i !engan ai# ,engali# *e,u!ian !i!e*3l3#isasi ;!i9e#i la#uan 4elunu#< !engan al*3h3l ;G#a, C< ;*i#a>*i#a /( !ei* hai>hai =angan sa,4ai 9e#le9ihan $ang ,enga*i9a*an *esalahan hasil<-

Di0u0i !engan ai# ,engali# !ia,9ah*an la#uan sa6#anin ;G#a, D< sela,a %(>/( !ei*-

Di0u0i *e,9ali !engan ai# ,engali# !iangin>angin*an !an !ia,ai !i 9a2ah ,i*#3s*34 !engan 4e#9esa#an *ua ;%(((< ,engguna*an ,in$a* i,,e#si-

.asil>hasil 4enge0aan 9a*e#i !iga,9a# !engan !i9e#i *ee#angan ,engenai 2a#na sel  9a*e#i $ang ,enun=u**an si6a g#a, !an 9enu* sel-

II- U=i Bi3*i,ia Ala !an Bahan :

•

Is3la ,u#ni 9a*e#i anah ;hasil 4e#039aan A0a#a III< !ala, NA ,i#ing !an NB ;nu#ien

•

0ai#< Reagen unu* es 3*si!ase : e#a,eh$l>4a#a4hen$l!ia,ine Reagen unu* es *aalase : %( aau 1( . /O/ Bahan unu* es O>F : ,e!ia O>F $ang ,engan!ung (8>% *a#93hi!#a 4a#a66in 0ai#  Bahan unu* es si#a : Si,,3ns Ci#ae Aga# $ang ,engan!ung in!i*a3# B#3,

•

Th$,3l Blue>BTB Bahan unu* es !e*a#93*silase l$sin : ,e!ia L$sin I#3n Aga# ;LIA< $ang ,engan!ung

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

L$sin !an in!i*a3# B#3, C#es3l Pu#4le>BCP Me!ia Nu#ien Aga# ;NA< Gelain Me!ia TSIA ;T#i4le Suga# I#3n Aga#< Bahan unu* es 4e,9enu*an in!3l : ,e!ia T#$43ne Wae# #eagen K3?a0s Bahan unu* es MR>"P : ,e!ia MR>"P la#uan &( KO. la#uan 8 al4ha>na4h3l Bahan unu* es u#ease : ,e!ia U#ea B#3h in!i*a3# Phen3l Re! Bu*u Pan!uan Dee#,inasi Ba*e#i :  Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology ;.3l et al - /(((< Ja#3, 3se Pi4e ?3lu,e se#il

S*e,a Ke#=a : %- Tes O*si!ase />1 ees la#uan e#a,eh$l>4a#a4hen$l!ia,ine !ilea**an 4a!a *e#as sa#ing-

Sus4ensi is3la ,u#ni !ala, nu#ien 0ai# !ia,9il !an !iin3*ulasi*an 4a!a *e#as sa#ing $ang elah !ieesi #eagen-

 Dia,ai !an hasil 4engu=ian !ila43#*an/- Tes Kaalase %>/ ees %( aau 1( . /O/ !ilea**an 4a!a gelas 9en!a-

Dia,9ah*an % 3se aau />1 ees sus4ensi is3la ,u#ni 9a*e#i-

Dia,ai !an !i9an!ing*an !engan *3n#3l1- Tes O>F ;O*si!asi>Fe#,enasi< Is3la ,u#ni 9a*e#i !iin3*ulasi*an se0a#a hai>hai *e !ala, & a9ung 9e#isi ,e!ia O>F $ang ,engan!ung (8>% *a#93hi!#a ;glu*3sa la*3sa ,ani3l ,al3sa aau su*#3sa< se0a#a usu*an-

Ta9ung I !iuu4 !engan 4a#a66in luna* a9ung II i!a* !iuu4 4a#a66in a9ung III !an I" se9agai *3n#3l ;!iuu4 4a#a66in !an i!a* !iuu4 4a#a66in an4a in3*ulasi 9a*e#i<-

Dia,ai seelah /& =a, !ala, suhu *a,a#-

Pe#la*uan !i9an!ing*an !engan *3n#3l-

&- Tes Penggunaan Si#a Is3la ,u#ni 9a*e#i !iin3*ulasi*an se0a#a g3#esan @ig>@ag ,engguna*an 3se !an !engan usu*an ,engguna*an =a#u, in3*ulasi 4a!a ,e!ia Ci,,3ns Si#a Aga# ,i#ing-

Diin*u9asi*an 4a!a suhu *a,a# sela,a /& =a,-

Pe#u9ahan 2a#na !i4e#hai*an !engan ,eliha 4e#u9ahan 2a#na !a#i hi=au ,en=a!i 9i#u-

Di9an!ing*an !engan *3n#3l8- Tes De*a#93*silase L$sin Pa!a ,e!iu, $ang ,engan!ung l$sin !an *3n#3l ;,e!ia an4a l$sin< !iin3*ulasi se0a#a usu*an !engan is3la ,u#ni 9a*e#i-

Diin*u9asi*an 4a!a suhu *a,a# sela,a /& =a,-

Di9an!ing*an !engan *3n#3l ;43sii6 =i*a 9e#u9ah 2a#na !a#i ungu ,en=a!i *uning lalu ,en=a!i ungu lagi<- Tes .i!#3lisis Gelain Dengan 0a#a usu*an is3la ,u#ni 9a*e#i !iin3*ulasi*an 4a!a ,e!ia $ang ,engan!ung gelain se!ala,  9agian !a#i la4isan 4e#,u*aan-

Diin*u9asi*an 4a!a suhu *a,a# sela,a /& =a,-

Pa!a saa 4enga,aan a9ung 4e#la*uan !an *3n#3l ;,e!ia an4a in3*ulasi 9a*e#i< !i,asu**an !ala, le,a#i es sela,a 1( ,eni ;43sii6 9e#a#i e#=a!i 4en0ai#an<-

- Tes ./S !an Fe#,enasi Gula>Gula Dengan ,engguna*an ,e!ia TSIA is3la ,u#ni 9a*e#i !iin3*ulasi*an se0a#a g3#esan !engan =a#u, 3se !an se0a#a usu*an !engan =a#u, in3*ulasi-

Diin*u9asi*an sela,a /& =a,-

Di9an!ing*an !engan *3n#3l'- Tes In!3l % a9ung ,e!ia T#$43ne Wae# !iin3*ulasi !engan/ ees is3la ,u#ni 9a*e#i !an % a9ung ,e!ia unu* *3n#3l-

Diin*u9asi*an 4a!a suhu *a,a# sela,a /& =a,-

Seelah !iin*u9asi ia4 a9ung !ia,9ah %( ees #eagen *3?a0s-

Di9an!ing*an !engan *3n#3l)- Tes MR ;Meh$l Re!< Is3la ,u#ni 9a*e#i !iin3*ulasi*an 4a!a ,e!ia MR>"P ;Meh$l Re!>"3ge# P#3s*aue#<-

Diin*u9asi*an 4a!a suhu *a,a# sela,a /& =a,-

Dia,9ah*an 8 ees #eagen Meh$l Re! *e !ala, a9ung 9e#isi ,e!ia MR>"P-

Di*303* hai>hai !an !i9an!ing*an !engan *3n#3l%(- Tes "P ;"3ges P#3s*aue#< Is3la ,u#ni 9a*e#i !iin3*ulasi*an 4a!a ,e!ia MR>"P-

Diin*u9asi*an 4a!a suhu *a,a# sela,a /& =a,-

Dia,9ah*an ( ,L la#uan al4ha>na4h3l 8 !ilan=u*an (/ ,L KO. &(-

Di*303* hai>hai !il3ngga#*an uu4n$a !i*303* *e,9ali !iulang seia4 8 ,eni !i9a0a 4e#u9ahan 2a#nan$a seelah 1( ,eni-

Di9an!ing*an !engan *3n#3l-

%%- Tes U#ease Me!ia U#ea B#3h $ang ,engan!ung in!i*a3# 6en3l ,e#ah !iin3*ulasi*an !engan % ees *ulu# ,u#ni 9a*e#i-

Dia,ai 4e#u9ahan 2a#na ,en=a!i ,e#ah ;4hen3l #e!< seelah /& =a, 4a!a suhu *a,a#-

Di9an!ing*an !engan *3n#3l-

III- Dee#,inasi .asil 4engu=ian !i,asu**an !ala, !a6a# 4enga,aan-

Masing>,asing !iga,9a# !an !ia9ulasi*an-

Di0303**an !engan 9u*u 4an!uan !ee#,inasi 9a*e#i ; Bergey’s Manual <-

E- .ASIL PENGAMATAN Ta9el I- .asil Penga,aan M3#63l3gi Sel Is3la Mu#ni Ba*e#i Tanah : U=i M3#63l3gi Sel

.asil Penga,aan

Ba*e#i

Kesi,4ulan

P#a*i*an i!a* 

Menu#u e3#i

,en!a4a*an hasil Penge0aan G#a,

Ga,9a# Te3#iis

 9a*e#i Es0he#i0hia

!a#i 4enge0aan

03li e#,asu* 

g#a, $ang

 9a*e#i g#a, negai6-

!ila*u*an-

Ta9el II- .asil Penga,aan U=i Bi3*i,ia2i Is3la Mu#ni Ba*e#i Tanah : .asil Penga,aan

U=i Bi3*i,ia2i

Ga,9a# 

!an

Ba*e#i Tes O*si!ase Da#i

Kesi,4ulan ;Ti!a* !ila*u*an< hasil 4e#a*uan E>03li

K3n#3l

Pe#la*uan

>

>

!engan ./O/ !ie,u*an 9uih>  9uih Tes Kaalase

O/

 4a!a

4#e4a#a

se!ang*an 4a!a *3n#3l han$a  9e#u4a 0ai#an =e#nihKesi,4ulan : Ba*e#i ,a,4u ,e,e0ah*an ./O/ ,en=a!i ./O

Tes O>F

!an O/ ;.asiln$a 43sii6< Da#i hasil 4e#la*uan ,e!ia OF

;O*si!asi>

an4a 4a#a6in ,e!ia 9e#u9ah

Fe#,enasi<

!a#i 2a#na hi=au ,en=a!i 2a#na

Ke: %- La#uan . /O/ /Ke :%- La#uan . /O/

Buih> 9uih-

*uning =inggaKesi,4ulan : .asiln$a 43sii6   9a*e#i ,a,4u ,eng3*si!asi *a#93hi!#aKe : %-Me!ia OF-

Ke : %-Me!ia OF-

Da#i hasil 4e#la*uan ,e!ia OF ,engguna*an  9e#u9ah

!a#i

4a#a6in

,e!ia

2a#na

hi=au

,en=a!i *uningKesi,4ulan : .asiln$a 43sii6   9a*e#i ,a,4u ,eng3*si!asi !ala, *ea!aan an4a u!a#aDa#i *e!ua hasil ,enun=u**an  9a*e#i

9e#si6a

6a*ulai6  Ke :%-Me!ia OF

anae#39Ti!a*

!ie,u*an

Ke: %- Me!ia OF

/-Pa#a6in-

/-Pa#a6in-

Ke : %-Me!ia

Ke : %- Ba*e#i E>03li /-

Sina,3ns si#a-

Me!ia Sina,3ns si#a

4e#9e!aan

ana#a hasil ,e!ia sina,3ns si#a *3n#3l !engan 4e#la*uan Tes Penggunaan Si#a

*e!uan$a 9e#2a#na hi=auKesi,4ulan : .asiln$a negai6  a#in$a

9a*e#i

,engguna*an

i!a*  

si#a

se9agai

su,9e# ene#gi-

.asil

Tes De*a#93*silase Lisin

!a#i

4e#la*uan

,e!ia

 9e#u9ah

2a#na

a2aln$a

 9e#2a#na

ungu

*e,u!ian

*uning !an 9e#u9ah *e,9ali ,en=a!i unguKesi,4ulan : .asiln$a 43sii6   9a*e#i

E>03li

,en!e*a#93*silasi lisin-

,a,4u Ke : %- Ba*e#i E>03li /Ke : %- Me!ia Lisin-

Me!ia Lisin-

.asil

4a!a

!engan Tes .i!#3lisis Gelain

4e#la*uan *3n#3l

sa,a ,e!ia

2a#nan$a *uning !an ,e!ian$a ,asih 4a!aKesi,4ulan : .asiln$a negai6   9a*e#i

i!a*

,enghasil*an

en@i, gelaine.asil

!a#i

 9e#u9ah

4e#la*uan

!a#i

2a#na

Ke : %- Me!ia Gelain-

Ke : %- Me!ia Gelain

Ke : %- Me!ia TSIA

Ke : %- Ba*e#i E>03li

,e!ia ,e#ah

,en=a!i 2a#na *uning- Wa#na *uning e#!a4a 4a!a 9agian slan !an 9u- Ti!a* !ie,u*an Tes ./O !an Fe#,enasi Gula> Gula

a!an$a en!a4an hia, ./SKesi,4ulan

:

.asil

6e#,enasin$a 43sii6 sehinnga  9a*e#i

!a4a

,e,6e#,enasi

glu*3sa su*#3sa la*3sa- .asil es ./S n$a negai6 *a#ena

!an Me!ia TSIA /- Gas-

asa, a,in3 sisein i!a* !a4a ,ensul6u#asi.asil !a#i 4e#la*uan e#9enu*  0in0in

9e#2a#na

,e#ah

se!ang*an 0in0in 4a!a *3n#3l  9e#2a#na =inggaTes In!3l

Kee#angan : .asiln$a 43sii6  sehingga

9a*e#i

,e,4#3!u*si !engan ,e#ah-

9isa

gugus

In!3l

e#9enu*n$a

0in0in

Ke : %- Cin0in =ingga /- Me!ia T#i43ne Wae#

Ke : %- Cin0in ,e#ah /Me!ia T#i43ne Wae# 

.asil 4e#la*uan sa,a !engan ,e!ia

*3n#3l

*e!uan$a

 9e#2a#na *uning- Na,un 4a!a Tes MR ;Meh$l Re!<

e3#i seha#usn$a 4a!a 4e#la*uan ,e!ia 9e#2a#na ,e#ahKesi,4ulan

:

Seha#usn$a

hasiln$a 43sii6 sehingga 9a*e#i E>03li ,a,4u ,e,6e#,enasi

Ke : %- Me!ia

Ke : %- Me!ia

Ke : %- Me!ia

Ke : %-Me!ia

Ke : %- Me!ia U#ea

Ke : %- Me!ia U#ea

B#3h

B#3h

asa, ;Bua!i3l<.asil ,e!ia 4e#la*uan 9e#2a#na le9ih 4u!a# *uningn$a !a#i 4a!a Tes "P ;"3ges P#3s*aue#<

,e!ia *3n#3lKesi,4ulan : .asiln$a negai6  sehingga 9a*e#i E>03li i!a*  ,a,4u ,e,6e#,enasi aseil ,eil *a#9in3l-

.asil ,e!ia 4e#la*uan !engan *3n#3l sa,a> sa,a 9e#2a#na unguTes U#ease

Kesi,4ulan : .asiln$a negai6  sehingga 9a*e#i E>03li i!a*  !a4a ,engu9ah U#ea ,en=a!i  N.1-

F-

PEMBA.ASAN PENGECATAN GRAM Tu=uan 4enge0aan g#a, a!alah unu* ,eliha 9enu* sel  #ang*aian sel  !an si6a g#a, ;g#a, 43sii6 !an g#a, negai6<- Dengan ,e3!e 4e2a#naan G#a, 9a*e#i !a4a !i*el3,43**an ,en=a!i !ua $aiu 9a*e#i G#a, 43sii6 !an G#a, negai6 9e#!asa#*an #ea*si aau si6a 9a*e#i e#ha!a4 0a e#se9u- Rea*si aau si6a 9a*e#ie#se9u !ienu*an 3leh *3,43sisi !in!ing seln$a- Oleh *a#ena iu 4enge0aan G#a, i!a* 9isa !ila*u*an 4a!a ,i*#33#ganis,e $ang i!a* ,e,4un$ai !in!ing sel se4e#i M$034las,a ; D2i!=3se4u#3 %))&<- Pengenalan 9enu* ,i*#39a ha#us !ila*u*an 4e2a#naan e#le9ih !ahulu aga# !a4a !ia,ai !engan =elas- ;.a!iu3,3  %))(<- Te*ni* 4e2a#naan 2a#na 4a!a 9a*e#i !a4a !i9e!a*an ,en=a!i iga ,a0a, $aiu 4enge0aan se!e#hana 4enge0aan !i6e#ensial !an  4enge0aan s#u*u#al- Pe,9e#ian 2a#na 4a!a 9a*e#i aau =asa!> =asa! #eni* lain !engan ,engguna*an la#uan unggal suau 4e2a#na 4a!a la4isan i4is aau 3lesan $ang su!ah !i6i*sasi !ina,a*an 4e2a#naan se!e#hana- P#3se!u# 4e2a#naan $ang ,ena,4il*an 4e#9e!aan !i ana#a sel>sel ,i0#39a aau 9agian>9agian sel ,i*#39a !an ,engguna*an le9ih !a#i % ,a0a, @a 2a#na !ise9u e*ni* 4e2a#naan !i6e#ensial- Se!ang*an 4enge0aan s#u*u#al han$a ,e2a#nai sau 9agian !a#i sel sehingga !a4a ,e,9e!a*an 9agian>9agian !a#i sel  e#,asu*  !ala, 4enge0aan ini a!alah 4enge0aan en!3s43#a 6lagella !an 4enge0aan *a4sul;Walu$3/(%(< -Dala, 4#a*i*u, ini  4#a*i*an ,engguna*an 4enge0ean !i66e#ensial $aiu ,engguna*an 0a ua,a ;0#$sal ?i3le< !an sa6#anin se9agai 0a la2anDala, 4e2a#naan g#a, !i4e#lu*an e,4a #eagen $aiu : %- G#a, A 5a 2a#na ua,a ;?i3le *#isal< /- G#a, B 5M3#!an ;la#uan I3!in< $aiu sen$a2a $ang !iguna*an unu* ,enginensi6*an 2a#na ua,a1- G#a, C 5Pen0u0i 5 4elunu# @a 2a#na ;al*3h3l 5 ase3n< $aiu s3l?en 3#gani0 $ang !iguna*an unu* ,elunu#*an @a 2a#na ua,a&- G#a, D 5 0a 4enuu4 ;sa6#anin< !iguna*an unu* ,e2a#nai *e,9ali sel>sel $ang elah *ehilangan 0a ua,a seelah 4e#la*uan !enga al*3h3lTe*ni* ase4is !ila*u*an unu* ,enghin!a#i e#=a!in$a *3na,inasi ,i*#39a- Te*ni*  ase4is $ang !ila*u*an 4a!a *egiaan ini 4a!a saa a2al ,e,9e#sih*an *a0a 9en!a !an 4a!a saa ,e,9ua 3lesan 4a!a *a0a 9en!a !a#i 9ia*an 9a*e#iSe9elu, !ila*u*an 4e2a#naan 4#a*i*an ,e,9ua ulasan 9a*e#i !iaas *a0a 39=e0 $ang se#il *e,u!ian !i*e#ing*an- Lalu ulasan ini *e,u!ian !i6i*sasi- Fi*sasi !a4a !ila*u*an !engan 0a#a ,ele2a*an 4#e4a#a !iaas a4i- Tu=uan 6i*sasi ini unu* ,ele*a*an 9a*e#i 4a!a *a0a 39=e* an4a ,engu9ah !an ,e#usa* s#u*u# 9a*e#i se#a 9isa ,ening*a*an !a$a a6inias

 9a*e#i- Seelah !i 6i*sasi !iees*an 0a 0#$sal ?i3le- C#$sal ?i3le a!alah se9agai 0a ua,aLalu !iees*an la#uan i3!ine 6ungsi !a#i la#uan i3!ine ini a!alah unu* ,e,4e#*ua 0a ua,a *e,u!ian !i!e03l3#isasi ,engguna*an al*3h3l sehingga !a4a ,elunu*an 0a ua,a !an !a4a !i2a#nai !engan 0a la2an ;sa6#anin<- Seia4 a*hi# 4e,9e#ian #eagen aau 4e2a#na selalu !ila*u*an 4e,9ilasan e#ha!a4 *a0a 39=e* !engan ,engguna*an ai#- Pe,9ilasan ini  9e#u=uan unu* ,engu#angi *ele9ihan seia4 @a 2a#na $ang se!ang !i9e#i*an- Seia4 a*hi#   4e,9ilasan 4a!a ,asing>,asing #eagen 4e#lu !ila*u*an 4en$e#a4an ai# 9ilasan !a#i ai# !engan ,engguna*an *e#as issu aga# a+ua!es i!a* e#0a,4u# !engan #eagen aau 4e2a#na 9a#u $ang a*an !i9e#i*an- Seelah iu 9a#u !ila*u*an 4enga,aan !i9a2ah ,i*#3s*34 a4a*ah 9a*e#i e#se9u g#a, 43sii6 aau g#a, negai6- Se9elu, !ila*u*an 4enga,aan !i9a2ah ,i*#3s*34 !ia,9ah*an ,in$a* i,,e#se- Min$a* i,,e#se !iguna*an unu* ,e,4e#9esa# in!e*s 9ias ,e,4e#9esa# 63*us !an ,e,isah*an *3l3ni 9a*e#i sehingga ,en!a4a*an sel unggal $ang e#4isahJi*a g#a, 43sii6 ,a*a 2a#nan$a ungu- Din!ing sel 9a*e#i g#a, 43sii6 ,e,ili*i  4e4i!3gli*an $ang e9al !an li4i! $ang i4is sehingga ,e,ili*i a6inias *ua e#ha!a4 0#$sal ?i3le ,a*a !a4a ,engi*a *ua 0#$sal ?i3le- Oleh se9a9 iu *ei*a !ieesi 3leh al*3h3l 2a#nan$a i!a* a*an lunu# *a#na !in!ing sel ,engala,i !ehi!#asi !an 43#i 43#i ,en$e,4i sehingga *3,4le*s *#isal ea4 e#i*a !i!ala, !in!ing sel- Ba*e#i g#a, 43sii6 suli unu*  !i2a#nai 3leh 0a la2an;sa6#anin< *a#na u*u#an 4a#i*el sa6#anin le9ih *e0il !a#i 4a!a *3,4le*s *#isal ?i3le $3!iu,- Sehingga 2a#nan$a a*an ea4 ungu Se!ang*an 9a*e#i g#a, negai6 *a#na !ia ,e,ili*i li4i! $ang e9al sehingga =i*a !ieesi !engan al*3h3l !ia a*an ,ela#u*an 3ue# ,e,9#an !an 4e4i!3gli*an- .al ini ,e,9ua 43#i 43#i ,en=a!i 9esa# !an *3,4le*s *#isal ?i3le $3!iu, !a4a lunu#;e#0u0i< !an  9a*e#i ,en=a!i i!a* 9e#2a#na -Sehingga *ei*a !i9e#i sa6#anin !a4a e#2a#nai !an 9e#u9ah 2a#nan$a ,en=a!i 4in*Dala, 4#a*i*u, 4#a*i*an i!a* ,ene,u*an 9a*e#i 9ai* g#a, 43sii6 aau4un g#a, negai6- .al ini 9isa !ise9a9*an *a#na 6i*sasi $ang i!a* 34i,al sehingga 9a*e#i u=i *u#ang ,ele*a saa ,e,anas*an *e 9unsen e#lalu !e*a ,e,ulas 9a*e#i *e *a0a 39=e* e#lalu se!i*i 4e,9e#ian al*3h3l e#lalu 9an$a* saa !i0u0i e#lalu 9e#sih sehingga 9a*e#in$a i*u e#0u0i- A*i9an$a i!a* !ie,u*ann$a 9a*e#iKele9ihan ,e3!e 4enge0ean : %- Penge0aan G#a, 4ening se9agai 4e!3,an a2al unu* ,e,uus*an e#a4i ani9i3i* se9elu, e#se!ia 9u*i !e6inii6 9a*e#i 4en$e9a9 in6e*si ;*ulu# !an es *e4e*aan 9a*e#i e#ha!a4 ani9i3i*<- .al ini *a#ena 9a*e#i G#a, 43sii6 !an negai6 ,e,4un$ai *e4e*aan $ang 9e#9e!a e#ha!a4 9e#9agai =enis ani9i3i*a-

/- Ka!ang>*a!ang ,3#63l3gi 9a*e#i $ang elah !i0a G#a, ,e,4un$ai ,a*na !iagn3si*Misaln$a 4a!a 4e,e#i*saan G#a, !ie,u*an G#a, negai6 !i4l30300i in#aselule# !a#i s4esi,en 4us ;nana< u#e#al ,a*a ,e,9e#i*an  presumptive diagnosis unu* 4en$a*i in6e*si g3n3#eKe*u#angan ,e3!e 4enge0ean : %- Penge0aan G#a, ,e,e#lu*an ,i*#33#ganis,e !ala, =u,lah 9an$a* $a*ni le9ih !a#i %( &  4e# ,l-

Sa,4el $ang 0ai# !engan =u,lah *e0il ,i*#33#ganis,e ,isaln$a 0ai#an

se#e9#3s4inal

,e,e#lu*an

,i*#33#ganis,e

e#se9u-

4#3se!u#

sen#i6uge

!ulu

unu*

,eng*3nsen#asi*an

Pelle ;en!a4an hasil sen#i6uge< *e,u!ian !ila*u*an

 4enge0aan unu* !i4e#i*sa se0a#a ,i*#3s*34is/- Ti!a* 9isa ,e,9e!a*an se0a#a s4esi6i* ,ana 9a*e#i $ang 43sii6 aau negai6

PEMBA.ASAN UJI BIOKIMIAWI : Tu=uan u=i 9i3*i,ia2i

a!alah unu* ,engi!eni6i*asi !an ,en!ee#,inasi 9a*e#i

 9e#!asa#*an si6a si6a 9i3*i,ia2in$a- A!a 9e9e#a4a es $ang !ila*u*anTest oksidase

Tu=uan !a#i es 3*si!ase ini a!alah unu* ,engeahui a4a*ah

9a*e#i u=i !a4a

,enghasil*an en@i, 3*si!ase si3*3#, aau i!a* - Dala, 4#a*i*u, *ali ini es 3*si!ase i!a*  !ila*u*an !i*a#ena*an i!a* a!an$a #eagen $ang e#se!ia !i la93#a3#iu, $aiu e#a,eh$l  4a#a4hen$l!ia,ine- En@i, 3*si!ase si3*3#, ini !iguna*an 9a*e#i unu* #es4i#asi sehingga !a4a ,engeahui si6a 9a*e#i e#se9u anae#39 aau ae#39- .asil 43sii6 !iun=u*an a4a9ila i,9ul 2a#na ungu *ehia,an seelah !i!ia,*an 9e9e#a4a saaRea*si $ang e#=a!i .1C

N

C1 .

. 1C

N

C1.

O*si!asi si3*#3,

.1C

N

C.1

 .1C

N

C.1

Test katalase

Tu=uan !a#i es *aalase ini a!alah unu* ,engeahui *e,a,4uan ,i*#39a $ang !a4a ,enghasil*an en@i, *aalase - Me!ia $ang !iguna*an a!alah . /O/- Kaalase ,e#u4a*an en@i, $ang ,a,4u ,engu#ai*an . /O/  ,en=a!i ./O  O/ - ./O/ 9e#si6a 3*si* sehingga 4e#lu !iu#ai*an aga# i!a* 9e#9aha$a- .asil 43sii6 !iun=u*an a4a9ila i,9ul 9uih seelah 9a*e#i u=i

!iees*an 4a!a *a0a 39=e* $ang 9e#sisi eesan . /O/ - Buih ini 9e#asal !a#i O / hasil 4e#u#aian Dala, 4#a*i*u,  hasil $ang !i!a4a a!alah 43sii6 $aiu e#9enu*n$a 9uih 9uih a#in$a  9a*e#i !a4a ,enghasil*an en@i, *aalaseRea*si $ang e#=a!i

/ O/>H  /.

./O/

 ./O/  O/;g<

./O   O/ ;g<

./O/  sen$a2a 3#gani*

sen$a2a 3#gani* e#3*si!asi  ./O

Test Indol

Tu=uann$a a!alah unu* ,engeahui a4a*ah 9a*e#i ,engahasil*an gugus in!3l aau i!a*- Me!ia $ang !iguna*an a!alah #$43ne 2ae# $ang ,engan!ung asa, a,in3 #$436anReagen $ang !iguna*an a!alah #eagen *3?a0s $ang ,engan!ung 4a#a!i,eil a,in3  9en@al!ehi!- Reagen ini 9e#ea*si !engan in!3l !an ,enghasil*an sen$a2a i!a* la#u ai#- U=i In!3l !i*aa*an 43sii6 !ian!ai !engan e#9enu*n$a 0in0in ,e#ah 4a!a 4e#,u*aan ,e!ia $ang ,enun=u**an 9a*e#i ,e,ili*i en@i, #i43nase $ang !a4a ,enghi!#3lisis asa, a,in3  =enis #i436an $ang ,e,ili*i gugus sa,4ing in!3l sehingga in!3l a*an 9e#ea*si !engan #eagen u=i !an ,e,9enu* in!3l ;0in0in 9e#2a#na ,e#ah<- Dala, 4#a*i*u,  hasil $ang !i!a4a a!alah 43sii6  9e#a#i 9a*e#i !a4a ,enghasil*an gugus in!3lRea*si $ang e#=a!i :

Asa, a,in3

O CH2 CH C NH2

O

triptofanase

OH

+

H2 O

N

N

H

H  

triptofan

H3C

+

C C

NH3

O

amoniak

HO asam piruvat

indol

H3C C N

+

+

H N(CH3)2 indol

p-dimetil amino benzaldehida (reagen kova)

N

N

H

H

H2O

N(CH3)2

rosindol (ber!arna merah)

Ga,9a# )- .i!#3lisis #i436an !an u=i in!3l ;La$ %))&< Test Hidrolisis Gelatin

Tu=uann$a a!alah unu* ,engeahui *e,a,4uan 9a*e#i a4a*ah !a4a ,enghasil*an gelainase 4#3e3lii* aau i!a*- Tes hi!#3lisis gelain ,engguna*an ,e!ia se,i 4a!a $aiu gelain- U=i gelain !i la93#a3#iu, !iguna*an !engan 0a#a ,enusu**an ,i*#33#ganis,e $ang !iu=i *e !ala, ,e!ia se,i 4a!a $ang ,engan!ung *al!u nu#ien !an gelain- Me!ia ini !iin*u9asi sela,a /& =a, !an !iin*u9asi*an 4a!a le,a#i es sela,a 1( ,eni- In!i*a3#   4enga,aan #ea*si 43sii6 =i*a ,e!iu, ea4 ,en=a!i 0ai# seelah !i*elua#*an !a#i *ul*as !an negai6 a4a9ila ,e!iu, 9e#u9ah ,en=a!i 4a!a- .i!#3lisis gelain e#=a!i *a#ena 9a*e#i ,enghasil*an gelainase unu* ,enghi!#3lisis 43li,e# 4#3ein gelain asa, a,in3- P#insi4 u=i Gelain $aiu unu* ,eliha *e4e,ili*ian en@i, 4#3e3lii* 4a!a 9a*e#i unu* ,engu#ai*an gelain- Gelain $ang elah e#u#ai*an 3leh 9a*e#i i!a* a*an ,e,9e*u 4a!a suhu !inginSe9ali*n$a gelain $ang i!a* e#u#ai*an 3leh 9a*e#i a*an ,e,9e*u 4a!a suhu !ingin- Ja!i u=i  43sii6 !ian!ai !engan gelain $ang 0ai# 4a!a suhu !ingin ;Lehninge# %)'/<- Be#!asa#*an hasil 4e#039aan 9a*e#i u=i ea4 0ai# ,es*i4un 4a!a suhu !ingin sehingga ,enghasil*an hasil  43sii6 4a!a u=i gelain- Sehingga 9a*e#i !a4a ,enghasil*an en@i, gelainase 4#3e3li*Rea*si $ang e#=a!i : Gelain

en@i, 4#3e3lii* Gelainase

Test Dekarboksilasi Lisin

P3li4e4i!a

4e4i!ase

Tu=uan !a#i 4e#039aan ini a!alah unu* ,engeahui a4a*ah 9a*e#i u=i !a4a ,en!e*a#93*silasi lisin aau i!a*- Lisin ,e#u4a*an 4#3ein =enis asa, a,in3- De*a#93*silase a!alah 4#3ses 4engu#aian gugus gugus *a#93nil aau gugus gugus asa, !a#i asa, a,in3 sehingga ,en=a!i 4#3!u* a,in3n$a - Me!ia $ang !iguna*an a!alah Lisin l#3n Aga# $ang ,engan!ung lisin !an in!i*a3# 9#3, 0#es3l 4u#4le  BCP !an ,e!ia an4a lisin- BCP  9e#in!a* se9agai in!i*a3# 4.- Dala, suasana asa, BCP 9e#2a#na *uning se!ang*an suasana  9asa 9e#2a#na ungu - Pa!a ,ulan$a e#=a!i 6e#,enasi gula ,en=a!i al*3h3l sehingga 4. u#un a*i9an$a suasanan$a asa, !iun=u*an !engan 2a#na *uning - Ji*a 9a*e#i !a4a ,en!e*a#93*silasi lisin $ang ,enghasil*an a,ina ,a*a a*an e#=a!i 4e#u9ahan 2a#na !a#i *uning ,en=a!i ungu *e,9ali- Da#i hasil 4e#039aan ,enun=u*an hasil 43sii6 a#in$a 9a*e#i !a4a ,en!e*a#93*silasi lisinRea*si $ang e#=a!i

De*a#93*silasi lisin

 N./>;C./<&>COO.

N./>;C./<8>N./  CO/

Lisin

La!a?e#in

Test O-F (Oksidasi-Fermentasi)

Mengguna*an ,e!ia O>F 4e#la*uan !ila*u*an !i ,e!ia $ang !i9e#i 4a#a6in !an i!a*  !i9e#i 4a#a6in-U=i ini 9e#u=uan unu* ,engu=i *e,a,4uan 9a*e#i !ala, ,ela*u*an ,ea93lis,e *a#93hi!#a se0a#a 3*si!ai6 aau 6e#,enasi- Ba*e#i ,e,a*ai *a#93hi!#a se9agai nu#isi !an a*an e#9enu* 4#3!u* a*hi# 9e#u4a gas !an asa,- Ba*e#i ,e,ea93lis,e *a#93hi!#a ;glu*3sa5la*3sa< !an ,enghasil*an su9s#a- .asil 43sii6 4a!a u=i ini ,enghasil*an 2a#na *uning.asil 4e#039aan : 43sii6 ;9e#2a#na *uning< 4a!a a9ung 4e#la*uan $ang !i9e#i 4a#a6in !an i!a*- Ba*e#i 9e#si6a 9a*e#i 6a*ulai6 $aiu 9a*e#i 9e#si6a ae#39 ;9uuh 3*sigen< !an anae#39 ;i!a* 9uuh 3*sigen
asa, glu*3na

Fe#,enasi : Glu*3sa

glu*3sa   > 4h3s4ha#

asa, 4i#u?a

Asa,    4h3s43glu*3ni* 

Pen3sa Shun

e#ne# !u3!#a6 4a#h2a$

e,9!en  ,e$e#h3  4a#h2a$

asa, 4i#u?a

Test Metil Red dan Voges Proskauer

a- Meil Re! U=i ini 9e#u=uan unu* ,en!ee*si 9a*e#i $ang ,engguna*an =alu# asa, 0a,4u# !engan ,e!ia MR>"P- .asil es =i*a e#=a!i 4e,9enu*an 2a#na ,e#ah !ala, 2a*u 1( ,eni !an 2a#na *uning =i*a negai6.asil 4e#039aan : *uning ;negai6< 9a*e#i i!a* ,e,6e#,enasi asa,Rea*si $ang e#=a!i : Glu*3sa

Pi#u?a

La*a Aseil *3 A F3#,a 3*sal3asea

 9- "3ges P#3s*aue#  Dengan ,e!ia MR>"P u=i ini 9e#u=uan unu* ,en!ee*si 9a*e#i $ang ,engguna*an =alu#  6e#,enasi 9uilena gli*3l- .asil 43sii6 4a!a u=i ini a*an ,enghasil*an 2a#na ,e#ah !an 2a#na 03*la =i*a hasil negai6.asil 4e#039aan : 03*la ;negai6< 9a*e#i i!a* ,e,6e#,enasi aseil ,eil *a#9in3lRea*si $ag e#=a!i : C.%/O Glu*3sa

6e#,enasi

C&.%(O/  C&.'O/

O/

Buana!i3l aseil,eil*a#9in3l C&.O/



C1.O/ Aseil ,eil *a#9in3l

C1.'O/ N

KO .

C&.3/ !iaseil*a#9in3l *3,4le*s 9e#2a#na ,e#ah 9aa

Test Penggunaan itrat

Tu=uan !a#i u=i ini a!alah ,engu=i *e,a,4uan 9a*e#i ,e,6e#,enasi*an si#a se9agai su,9e# ene#gi 4a!a ,e!ia Si,,3n Ci#a- Pengis3lasian 9a*e#i !ila*u*an !engan 0a#a usu*an !an @ig@ag ;g3#esan< u=uann$a 4e,an6aaan ,e!ia- .asil 43sii6 !a#i u=i ini a!alah ,e!ia

,enghasil*an 2a#na 9i#u !an i!a* e#=a!i 4e#u9ahan 2a#na a4a9ila hasil negai6 ;,e!ia  9e#2a#na hi=au<.asil 4e#039aan : hi=au ;negai6< 9a*e#i i!a* ,e,6e#,enasi*an si#a se9agai su,9e#  ene#giRea*si $ang e#=a!i : C1.&O. ;COONa<1 - ./O

Na/CO1

S3!iu, ni#a

na#iu, 9i*a#93na

Test !rease

Fungsi u=i ini a!alah ,en!ee*si 9a*e#i $ang !a4a ,en!eg#a!asi !egan 0e4a- U=i ini ,engguna*an ,e!ia U#ea B#3h $ang ,engan!ung in!i*a3# 6en3l ,e#ah- A4a9ila 6en3l ,e#ah ,enghasil*an 2a#na *uning ,a*a ling*ungan a!alah asa,- A4a9ila 9e#u9ah ,en=a!i 6u0hsia ,a*a ling*ungan 9e#a#i 9asa- .asil 43sii6 4a!a u=i u#ease a!alah ,e#ah.asil 4e#039aan : ,e#ah ;43sii6< 9a*e#i !a4a ,en!eg#a!asi !engan 0e4au#ease

CO;N./
CO/  /N.1

u#ea

a,3nia

Test H" dan Fermentasi Gula-Gula

U=i ini ,engguna*an ,e!ia TSIA !an 4engis3lasian 9a*e#i !ila*u*an !engan 0a#a usu*an !an g3#esan unu* ,e,an6aa*an ,e!ia- Pa!a ,e!ia TSIA e#!a4a / 9agian $aiu slun !an 9u- A4a9ila slun 9e#2a#na ,e#ah !an 9u 9e#2a#na *uning ,a*a e#=a!i 6e#,enasi glu*3sa- A4a9ila slun !an 9u 9e#2a#na *uning ,a*a e#=a!i 6e#,enasi su*#3sa !an la*3saJi*a slun !an 9u 9e#2a#na ,e#ah ,a*a i!a* e#=a!i 4#3ses 6e#,enasi 1 gula ;glu*3sa su*#3sa la*3sa< .asil 43sii6 a!alah 4e#u9ahan 2a#na !a#i ,e#ah ,en=a!i *uning.asil 4e#039aan ./S : negai6 *a#ena i!a* a!a en!a4an- Asa, a,in3 sisein i!a* !a4a ,ensul6u#asi 9a*e#i sehingga i!a* e#9enu* en!a4an . /S.asil 4e#039aan 6e#,enasi gula : 43sii6 ;9u !an slun 9e#2a#na *uning< 9a*e#i ,a,4u ,e,6e#,enasi gula su*#3sa !an la*3saRea*si $ang e#=a!i :

!esul6ase

C1.O/SN

./S  C/.1O&  N. sisein

Sisein

asa, 4i#u?a

./S ;l<  FeSO& ;l< .i!#3gen  4e##3sul6a

FeS  ./SO& ;l< 4e##3sul6a ;hia,<

Sul6i!a

DETERMINASI Genus Es0he#i0hia Be#9enu* a9ung %-%  %-8 ,  /-(  -( , e#!a4ai single aau 9e#4asanganKa4sul !an ,i*#3*a4sul !i=u,4ai !i 9e#9agai =a#ingan- G#a, negai6- Be#*e,9ang 9ia* !engan 6lagel !an a!a $ang i!a* 9e#*e,9ang 9ia*- Fa*ulai6 anae#39- Ke,33#gan3#34i ,e,ili*i !ua i4e ,ea93lis,e $aiu #es4i#asi !an 6e#,enasi- Te,4e#au# 34i,al a!alah 1(C- D> Glu*3sa !an *a#93hi!#a $ang lain !i*aa93lis,e !egan 4e,9enu*an asa, !an gas- O*si!asi negai6 *aalase 43sii6 ,eh$l #e! 43sii6 "3ges>P#3s*aue# negai6 !an e#*a!ang si#a negai6- ./S u#ease !an li4ase a!alah negai6- S4esies  Escherichia ,e#e!u*si ni#a- Se,ua aau se9agian ,en$a#ing 6e#,en L>a#a9in3se ,al3se D>,anni3l D>,ann3se L>#ha,n3se #ehal3se D>$l3se- O>Ni#36enil>>D>gala*34i#an3si!e 43sii6- Te#=a!i se0a#a n3#,al !i  9agian e#9a2ah 4a!a usus 9esa# he2an 9e#!a#ah 4anas !an 4a!a *asus  E. Blattae,  4a!a *e03a-  E.coli ,en$a#ing *an!ungan ene#33in !an5aau unsu# $ang 9e#9aha$a e#,asu*   4en$e#9uan !an unsu# 03l3nisasi 4en$e9a9 4en$a*i !ia#e-  E.Coli  =uga ,en=a!i 4en$e9a9 ua,a !a#i in6e*si salu#an *en0ing !an in6e*si n3s303,ial e#,asu* se4i0e,ia !an ,eningiisS4esies lain selain  E.lattae,  =a#ang !i=u,4ai 9e#4eluang se9agai 4a3gen se#ing *ali  9e#hu9ungan !engan in6e*si lu*aTi4e s4esies : Escherichia coli

G- KESIMPULAN %- Da#i 4#a*i*u, $ang !ila*u*an 4#a*i*an i!a* !a4a ,ene,u*an 9enu* 9a*e#i  Escherichia coli  !an hasil !a#i 4enge0aan g#a,- Na,un !ala, !aa e3#iis 9enu* sel  Escherichia coli a!alah a9ung !an 9e#u*u#an %-%  %-8 ,  /-(  -( ,- Rang*aian sel !a#i 9a*e#i Escherichia coli e#!a4a 9enu* single aau 9e#4asangan- Ba*e#i Escherichia coli e#,asu* !ala, g#a, negai6/- .asil !a#i u=i 9i3*i,ia2i 9a*e#i Escherichia coli a!alah O*si!asi negai6 *aalase 43sii6 ,eh$l #e! 43sii6 "3ges>P#3s*aue# negai6 !an e#*a!ang si#a negai6- . /S u#ease !an li4ase a!alah negai6-

.- DAFTAR PUSTAKA Ca44u00in3 J-G- an! She#,an Naalie- /(%%  Microiology ! " #aoratory Manual  )h e!- Pea#s3n Ben=a,in Cu,,ings San F#an0is03 44- %8( %88 %% %/ %8>%) %8 %).3gg S- /((8 Essential Microiology Wile$ Englan! 4- 8).3l J-G- K#ieg N-R- Sneah P-.-A- Sale$ J-T- Willia,s S-T- %))1  Bergey’s Manual of   Determinative Bacteriology )h e!- Li44ins03 Willia,s  Wil*ins Phila!el4hia 4%)Ma!igan M-T- Ma#in*3 J-M- Sahl D-A- an! Cla#* D-P- /(%/  Broc$ Biology of   Microorganisms %1h e!- Pea#s3n Ben=a,in Cu,,ings San F#an0is03 4- /P3,,e#?ille Je66#e$ C- /(%%  "lcamo’s %undamentals of Microiology )h  e!- J3nes an! Ba#le Pu9lishe#s LLC- Cana!a 44- '( ''T3#3#a G-J- Fun*e B-R- an! Case C-L- /(%(  Microiology "n &ntroduction %(h  e!- Pea#s3n Ben=a,in Cu,,ings San F#an0is03 44- '8 '-

Pe,9ahasan : D2i!=3se4u#3 D %))& E$ologi Manusia dan Per$emangannya Pene#9i E#langga Ja*a#a.a!iu3,3  %))( Mi$roiologi Dasar  Jili! % Pene#9i E#langga Ja*a#aWalu$3lu! /(%( Bu$u Petun'u$ Pra$ti$um Mi$roiologi (mum, UMM- Malang hal /%-

73g$a*a#a /8 Ma#e /(%8 P#a*i*an I

P#a*i*an II

Agaha Nensi!a "ena#$

A*hla+ul Ka#i,ah W-S-.-

P#a*i*an III

P#a*i*an I"

E#i0a Kusu,a Raha$u S-

Dian Pe#i2i

I- JAWABAN PERTAN7AAN DAN LAMPIRAN %- I!eni6i*asi 9a*e#i 4enge0ean g#a, 4e#lu !ila*u*an *a#ena ,elalui 4enge0ean !a4a ,e,4e#=elas sel 9a*e#i se4e#i 9enu* sel #ang*aian sel se#a !a4a ,engeahui si6a  9a*e#i a4a*ah g#a, 43sii6 aau g#a, negai6- Sehingga !a4a ,e,4e#,u!ah i!eni6i*asi selan=un$a/- Penga,aan $ang 9isa !iguna*an se9agai 4a#a,ee# unu* ,engi!eni6i*asi !an ,en!ee#,inasi 9a*e#i $ang a* !i*enal : Tes 3*si!ase • Tes *aalase • Tes in!3l • Tes O>F • Tes MR>"4 • Tes 4enggunaaan si#a • Tes hi!#3lisis gelain • Tes u#ease • Tes ./S !an 6e#,enasi gula • Penge0ean g#a, • U=i ,3#63l3gi *3l3ni • Penge0ean s43#a • 1- Me*anis,e #ea*si 9i3*i,ia2i $ang !iu=i : Tes !e*a#93*silase lisin • Rea*si $ang e#=a!i  N./>;C./<&>COO. De*a#93*silasi lisin N./>;C./<8>N./  CO/ Lisin La!a?e#in •Tes 4enggunaan si#a Rea*si $ang e#=a!i : C1.&O. ;COONa<1 - ./O Na/CO1 S3!iu, ni#a na#iu, 9i*a#93na •Tes u#ease Rea*si $ang e#=a!i CO;N./
•

C1.O/SN Sisein

!esul6ase

./S ;l<  FeSO& ;l< .i!#3gen  4e##3sul6a sul6i!a •Tes .i!#3lisis gelain Rea*si $ang e#=a!i :

sisein

./S  C/.1O&  N. asa, 4i#u?a FeS  ./SO& ;l< 4e##3sul6a asa, sul6a ;hia,<

Asa, a,in3

en@i, 4#3e3lii*

Gelain

4e4i!ase

P3li4e4i!a

Gelainase •

Tes In!3l O CH2 CH C OH

NH2

O

triptofanase +

H2O

N

N

H

H  

triptofan

H3C

+

C C

NH3

O

amoniak

HO asam piruvat

indol

H3C C N

+

+

H

N(CH3)2

indol

p-dimetil amino

N

H

H N(CH3)2

rosindol

benzaldehida

(ber!arna merah)

(reagen kova) •

N

Tes *aalase Rea*si $ang e#=a!i / O/>H  /. ./O/

./O/  O/;g< ./O   O/ ;g<

./O/  sen$a2a 3#gani* •

sen$a2a 3#gani* e#3*si!asi  ./O

Tes MR  Rea*si $ang e#=a!i : Glu*3sa Pi#u?a

La*a Aseil *3 A F3#,a 3*sal3asea

•

Tes "P Rea*si $ag e#=a!i : C.%/O Glu*3sa

C&.%(O/ 

6e#,enasi

C1.O/ Aseil ,eil *a#9in3l

C&.'O/

O/ KO .

C&.3/

H2O

Buana!i3l aseil,eil*a#9in3l

C&.O/ •



C1.'O/ N

!iaseil*a#9in3l

*3,4le*s 9e#2a#na ,e#ah 9aa

Tes O>F O*si!asi : C.%/O

asa, glu*3na

asa, 4i#u?a

Fe#,enasi : Glu*3sa

glu*3sa   > 4h3s4ha#

Asa,    4h3s43glu*3ni* 

Pen3sa Shun

e#ne# !u3!#a6 4a#h2a$

e,9!en  ,e$e#h3  4a#h2a$

asa, 4i#u?a