Universidad de Chile Facultad de Ciencias Licenciatura en Ciencias c/m en Química
Informe de Laboratorio de Biología: Extracción de ADN con Tecnología de Trinchera Fecha: jueves 13 de mayo ma yo Integrantes: Marcela Cams !atherine Morales
"#jetivos $l o#jetivo esecí%ico de este la#oratorio es o#tener &'( a artir de tejido vegetal) esecí%icamente de una %rutilla) con un simle m*todo de e+tracci,n de &'(&sí mismo) el o#jetivo general de este r.ctico es lograr conocer los asos ara conseguir &'( &'( con imlementos comunes de todas las casas) tales como sal de cocina) ui+) alcohol-
Introducci,n $l 0cido 'eso+irri#onucleico) m.s conocido como &'() es la #ase gen*tica de todas las c*lulas y se encuentra resente en todas ellas- u rol %undamental es tener y trasasar tal in%ormaci,n gen*tica de generaci,n en generaci,n de c*lulas mediante sus cualidades uímicas$l &'() como arendimos en unidades anteriores) est. %ormado or su# unidades) llamadas nucle,tid nucle,tidos) os) los cuales est.n est.n comuestos comuestos or una 2ase (itrogenad (itrogenada) a) ue ueden ser urinas 4&denina y 5uanina6 o irimidinas 4Citocina y 7imina6) una 'eso+irri#osa 4a89car6 y un 5ruo Fos%ato- $sta mol*cula tiene una estructura muy característica) la cual consta de dos cadenas de &'() las ue de#ido a los enlace or uente de idr,geno) roduce un leve enrollamiento de *sta so#re sí misma- La estructura %ue descu#ierta or ;atson y Cric< en 1=>3) los ue la denominaron: Doble Hélice.
$ste oli nucle,tido) ue odemos llamarlo así or ser muchas su# unidades de nucle,tidos juntas) se encuentra dentro del n9cleo de cada c*lula) or lo ue ara este tra#ajo r.ctico) necesitamos e+traerlo desde ahí- C,mo y con u* materiales se reali8, esta e+tracci,n se e+lica en este in%orme-
rocedimiento $+erimental & continuaci,n se descri#e c,mo se reali8, la $+tracci,n de &'( de una %rutilla y los materiales utili8ados ara elloa6 Materiales: ? 1 Fru Fruti till llaa 4de 4de ahí ahí o#t o#ten enem emos os el &'( '(66 ? Mortero ? @A cc de &gu guaa 'es 'esti tila lada da 43/B 43/B de un tu# tu#o6 o6
? ? ? ? ? ?
Media cucharada de t* de al de Mesa Media cucharada de detergente 4Qui+6 @ 7u#os de $nsayo 1 7u#o Falc,n @ alitos de Madera) es.tula &lcohol Frío
#6 M*todo: Lo rimero ue reali8amos %ue la trituraci,n de la %rutilla en el mortero) lo ue se reali8a ara searar las c*lulas) uedando ahora m.s e+uestas al detergente ue se utili8ar. m.s adelante- ara la maceraci,n se utili8aron @A cc de agua destilada con una i8ca de sal- $n esta me8cla de sal y agua se roducen iones salinos) los ue son atraídos or las cargas negativas del &'() disolvi*ndolo en el agua ara ue la e+tracci,n resulte m.s %.cilCuando la maceraci,n est* #ien hecha) se agrega la media cucharada de detergente Qui+- $sto se incorora a la maceraci,n ara romer la mem#rana celular y nuclear) lo ue gatilla la li#eraci,n de &'( del interior de la c*lula hacia el medio- Una clara e+licaci,n de or u* sucede esto) es el mismo acto de lavarse las manos) o lavar los latos: $l ja#,n se une con la grasa reaccionando- $n la c*lula asa algo similar- Como sa#emos) la mem#rana est. %ormada or una #icaa liídica y son estos mismos líidos los ue reaccionan con el Qui+) ermitiendo la li#eraci,n de todo lo contenido en la c*lula- Luego sucede lo mismo con la mem#rana del n9cleo) li#er.ndose &'( el cual ueda disuelto en el agua7rasvasijamos aro+imadamente 1A ml de la muestra 4roja tur#ia hasta ese momento6 a un tu#o %alc,n) ara desu*s llevarla a la centri%uga y luego de > minutos a mediana?#aja lograr o#tener dos %ases: Sobre nadante (líquido) y Pellet (sólido). & continuaci,n) con mucha recauci,n vertimos el so#re nadante 4roja) ero ya sin material en susensi,n6 a un tu#o de ensayo limioLuego) agregamos al tu#o alcohol %río de tal manera ue escurra or las aredes de *ste lentamente y sin roducir tur#ulencias- 'e#e uedar en la misma cantidad ue el agua- $l alcohol ueda encima del agua) de#ido a ue su densidad es menor) y ahí es cuando justo en el límite entre estos dos líuidos aarece el &'( en %orma de reciitado y desenrollado 4mota #lanca6Finalmente el &'( se divide en tres esacios del tu#o) lo ue se de#e a los distintos esos de *ste: &lgunos eda8os su#en a la suer%icie del alcohol) otros se uedan al medio y otros uedan justo en la inter%ase de alcohol y agua-
esultados La mota #lanca o#tenida no de#ería ser &'( uro) ya ue *ste est. acomaDado de &( en el n9cleo) or lo ue se o#serva son estos dos comonentes vitales de las c*lulas- ara eliminar este &( unido al &'( se reuiere la utili8aci,n de alguna en8ima ue %ragmente *ste &(ara veri%icar ue la mota #lanca o#tenida es &'( se reuiere de un rocedimiento medianamente eligroso- e reali8a agregando un comuesto uímico llamado 2romuro de $tidio) el cual es un marcador de .cidos nucleicos- Cuando esto se one ante lu8 ultra?violeta) emite una lu8 %luorescente) ue al estar unido a cadenas de &'( se intensi%ica unas @A veces-
Conclusiones y 'iscusiones Luego de ha#er e+traído &'( de una %rutilla logramos darnos cuenta de distintas cosas) tales como ue muchas de las cosas ue nos rodean contienen &'( y ui8. no lo sa#íamos- Con simles t*cnicas y materiales caseros logramos e+traer algo tan comlejo como lo es el &'() el cual es la #ase de la vida de todas las c*lulas de todos los tios-
e%erencias y 2i#liogra%ía ?
htt://learn-genetics-utah-edu/es/units/activities/e+traction/inde+-html
? http://learn.genetics.utah.edu/es/units/activities/extraction/detergent.ht ml
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htt://EEE-correodelmaestro-com/anteriores/@AA>/noviem#re/@nosotros11B-htm
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htt://EEE-tiete-com/userost/videos?online?gratis/e+traccion?casera?de?adn?e+erimento
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htt://EEE-jimentel-com/cienciase+erimentales/agEe#ciencias/agEe#/lacienciaat ualcanceII/uimica/$+erienciasuimicae+tracciondeadn-htm
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htt://es-Ei