SODIUM-d
SODIO-d Enzimático. Colorimétrico Determinación c uantitat uantitativa iva de S odio
IVD Conservar a 2-8ºC USO PREVISTO Para determinación cuantitativa in vitro de vitro de Sodio en suero y plasma. PRINCIPIO DEL METODO (1) El Sodio se determina enzimáticamente a través de la actividad de -galactosidasa, usando como sustrato ONPG. La absorbancia del producto o-nitrofenil a 405 nm es porporcional a la concentración de sodio.
2. Ajustar el espectrofotómetro espectrofotómetro a cero frente a agua destilada. 3. Pipetear en la cubeta: Estándar Muestra R1 720 μL 720 μL R2 290 μL 290 μL Estándar ---30 μL Muestra ---30 μL 4. Mezclar y leer la absorbancia después de 60 s (A1) y 120 s (A2). 5. Calcular: A= A2 – A1. CALCULOS
( Na+ ONPG
(
o-nitrofenol + galactosa -galactosidasa
ONPG = o-nitrofe o-nitrofenil nil - -D-galactopira -D-galactopiranosa nosa SIGNIFICADO CLINICO Este test se utiliza en el diagnóstico y tratamiento de hiperaldosteronismo, diabetes insípida, hiper-tensión suprarrenal, enfermedad de Addison, deshidratación, secreción inadecuada de hormona antidiurética, o de otras enfermedades de desequilibrio electrolítico REACTIVOS R1 Tampón / Enzimas R2 Diluyente/ Sustrato
TampónTris, pH 9.0 Cryptand -galactosidasa
450 mmol/l 5.4 mmol/l 0.8 U/ml
TampónTris O-nitrofenil galactosida
10.0 mmol/l 5.5 mmol/l
A) Muestra Muestra
x Conc Calibrador = mmol/L sodio en la mu estra
A) Calibrador
CONTROL DE CALIDAD Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico Patológico (Ref. 1002120 1002120 and 1002210). Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y l a técnica. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias. VALORES DE REFERENCIA (2) 136 - 146 mmol/l (313 - 336 mg/dl) Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
R2. Diluyente/ Sustrato Transferir el contenido de 1 vial de D iluyente R2a a un vial de Sustrato R2b agitando ligeramente, asegurándose que t odo el contenido se disuelve completamente. Transferir el contenido total al tampón R2a, lavando el vial R 2b varias veces. Evitar la formación de espuma.
CARACTERISTICAS DEL METODO Linealidad: El método es lineal entre concentraciones de sodio de 37.3 y 187.8 mmol/L Sensibilidad: La mínima concentración de sodio detectable c on un nivel de precisión aceptable se determinó a 37.3 mmol/l. Precisión: Intraserie (n=20) Interserie(n=20) Media (mmol/L) 47.4 124.9 179.8 62.9 125.2 159.6 1.08 1.94 SD 0.76 1.54 4.99 2.51 0.60 1.21 CV (%) 1.60 1.23 7.94 2.01 Exactitud: Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x). Los resultados obtenidos con 40 muestras entre 119 y 226 fueron los siguientes: Coeficiente de regresión (r): 0.98 Ecuación de la recta de regresión: y= 1.12x – 13 Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
CONSERVACION Y ESTABILIDAD R1 es estable 2 semanas a 2-8ºC o 5 días a 15-25ºC. R2 es estable 4 semanas a 2-8ºC o 2 semanas a 15-25ºC. No usar los reactivos una vez pasada la fecha de caducidad.
NOTAS 1. A fin de evitar evitar contaminaciones contaminaciones se recomienda utilizar material de plástico de un solo uso. 2. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este reactivo en distintos analizadores.
MATERIAL ADICIONAL analizador para para lecturas lecturas a 405 405 nm. nm. - Espectrofotómetro o analizador - Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. - Equipamiento habitual de laboratorio (Nota 1) .
BIBLIOGRAFIA 1. Berry, M. N. et al., al., (1988) Clin. Chem. 34,2295. 2. Tietz, N. W. (1983) Clinical guide to Laboratory Tests, p.384, W.B. Saunders Co., Philadelphia.
PREPARACION R1. Tampón / Enzimas Transferir el contenido de 1 vial de Tampón R1a a un vial de Enzima R1b agitando ligeramente, asegurándose que todo el contenido se disuelve completamente. Transferir el contenido total al tampón R1a, lavando el vial R1b varias veces. Evitar la formación de espuma.
MUESTRAS Suero, plasma tratado con heparinato de litio. PROCEDIMIENTO 1. Condiciones del ensayo: Longitud de onda: onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . 405 nm Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .1 cm paso de luz Temperatura constante . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37ºC / 15-25ºC BSIS83-E
04/01/12
PRESENTACION Ref: 1001385
Cont.
R1a: 3 x 20 mL, R1b: 3 (Li o.) R2a R2a: 3 x 9 mL, mL, R2b: R2b: 3 (Li (Lio o.)
20 mL 9 mL mL
SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Colom a, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN Tel. +34 972 69 08 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail:
[email protected]