UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA –FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENT AMBIENTAL AL
ACCIÓN BACTERI BACTERIOST OSTÁ ÁTICA SELECTI SELECTIV VA DEL CRISTAL VIOLETA-ACCIÓN OLIGODINÁMICA DE METALES PESADOS
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PROFESOR" TELLO CEBREROS. #ORGE GILBERTO
CURSO"MICROBIOLOGIA SANITARIA ( LABORATORIO N/ 0
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Demostrar el efecto de diferentes concentraciones de cristal violeta sobre bacterias Gram positivas y Gram negativas.
También es demostrar como las concentraciones en que se diferencia cada crisol varia el crecimiento de microorganismos.
ACCION OLIGODINAMICA DE LOS METALES PESADOS
Demostrar la acción oligodinámica de algunos metales Determinar el por qué no presenciamos crecimiento cerca de la moneda pero si lo hubo alrededor, mientras más lejano a la moneda más crecimiento se notara.
&2 FUNDAMENTO TEORICO ACCION BACTERIOSTATICA DEL CRISTAL VIOLETA os colorantes derivados del trifenilmetano tiene una acción bacteriostática selectiva sobre los organismos Gram positivos en diluciones que no tienen ning!n efecto apreciable sobre el crecimiento delas bacterias Gram negativas.. "n general, la acción bacteriostática selectiva es semejante a la reacción de Gram, aunque unas cuantas e#cepciones resaltantes. "sto quiere decir que los organismos Gram positivos son más susceptibles a la acción de estos colorantes que las bacterias Gram negativas. "l cristal violeta es un colorante derivado del trifenilmetano que posee un e#celente efecto bacteriostático, en dilución del $%$&&,&&& inhibe el crecimiento tanto del escherichia coli' (Gram') como del bacillus subtilis (Gram*) en dilución del $%$&&,&&& no crece. "n dilución del $%$&&&,&&& no tiene ning!n efecto sobre ninguno de los dos organismos y el crecimiento se lleva a cabo como si no hubiera colorante en el medio agar.
ACCION OLIGODINAMICA DE LOS METALES PESADOS +lgunos metales en diluciones muy altas son capaces de ejercer una acción to#ica sobre las bacterias. i se coloca una laminilla de plata o de cobre debidamente preparada dentro de una placa de -etri y se cubre con agar fundido, previamente inoculado con un organismo, se puede observar con claridad varias onas diferentes de desarrollo, después de un periodo de /0 horas de incubación. 1nmediatamente alrededor de la laminilla se verá una ona despejada en la cual no aparecen colonias. "sta es conoce como el nombre de ona olegodinámica. 2as al e#terior de esta ona habrá otra ona más angosta en la que se presenta un crecimiento abundante. "sta se denominada ona de estimulación. 3antidades diminutas de iones tó#icos estimula el crecimiento. "n todo el resto del agar ocurre un crecimiento normal.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA –FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL "ste ejercicio se demuestra el efecto del metal plata o cobre sobre el crecimiento del escherichia coli.
*2 PROCEDIMIENTO ACCION BACTERIOSTATICA DEL CRISTAL VIOLETA $. 2antener 0 tubos con agar nutritivo fundido en el ba4o maria a 0563. /. Transferir $ml de la solución acuosa de crista violeta de $%$&&& auno de los tubos con 7ml de agua. "sto da una dilución de $%$&,&&&. 8. 9sando la misma pipeta, transferir $ml de la solución $%$&,&&& a una placa -etri y $ml al segundo tubo con 7ml de agua. "sto da una dilución de $%$&&,&&&. 0. transferir $ml de la solución $%$&&,&&& a una placa -etri y $ml al segundo tubo con 7ml de agua. "sto da una dilución de $%$&&&,&&&. 5. transferir $ml de la solución $%$&&&,&&& a una placa -etri. :. ;erter el agar fundido en las tres placas de -etri y meclar bien con el colorante con el agar rotando suavemente la placa, para obtener una distribución uniforme de colorante. <. ;erter el contenido del ultimo tubo de agar en la placa de -etri sin colorante para que sirva de control. =. 3uando se ha solidificado el agar, invertir las placas y dividir cada una en dos partes iguales con lápi de cera. 7. 2arcar cada mitad con el nombre del organismo con el que se va a sembrar por el método de estr>as. $&. ?ayar en estr>as la mitad de una placa de -etri con una gota, tomasa con el asa de inoculador, del cultivo de @.subtillis y la otra mitad igualmete con una gotita del cultivo de ".coli. $$. -roceder en igual forma con los demás placas -etri. $/. 1nvertir las placas e incubarlas a 8<63 por 0= horas. $8. +notar los resultados.
ACCION OLIGODINAMICA DE LOS METALES PESADOS $. /. 8. 0. 5. :. <.
impiar la laminilla sumergiéndola dentro de una solución $&A de ácido n>trico. avar bien las laminillas con agua para quitarle todo el ácido. 3olocar la laminilla en el centro de una placa -etri Tomar un tubo con agar con una gotita del cultivo de escherichia coli. ;erter el agar inoculado dentro de la placa de -etri que contiene la laminilla. Dejar que solidifique el agar. 1nvertir la placa e incubarla a 8<63 por 0= horas.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA –FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL =. -resentar un informe e#plicando qué se debe esta acción y qué aplicación práctica puede tener.
)2 RESULTADOS
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ACCION OLIGODINAMICA DE LOS METALES PESADO
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02 DISCUSIONES ACCION BACTERIOSTATICA DEL CRISTAL VIOLETA
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32 CONCLUSIONES ACCION BACTERIOSTATICA DEL CRISTAL VIOLETA
9na de nuestras conclusiones a la que pod>amos llegar es como varia la cantidad de microorganismos en las diluciones utiliadas También llegamos a la conclusión de algo que ya sab>amos por medio de la teor>a, por ejemplo que en $B$&&&& no >bamos a notar ninguna de las dos bacteria ("scherichia 3oli y @acillus ubtilis), en cambio que en $B$&&&&& >bamos a notar solo el crecimiento de la "scherichia 3oli y que en $B$&&&&&& iba haber crecimiento de ambos.
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ACCION OLIGODINAMICA DE LOS METALES PESADO
la acción oligodinámica de los metales pesados, es afectado por la presencia de metales pesados. por lo que se logra diferenciar tres onas% la ona oligodinámica, ona de estimulación y de crecimiento normal. e diferencian tres onas% la ona oligodinámica (que es una ona despejada donde no aparecen colonias), ona de estimulación (ona angosta donde se presenta un crecimiento abundante) y la ona de crecimiento normal (se presenta en todo el resto del agar).debido a eso las cantidades diminutas de iones metálicos estimulan el crecimiento mientras que concentraciones mayores producen inhibición.
+2 RECOMENDACIONES
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e debe esteriliar correctamente el inoculador antes de usarlo para e#traer el cultivo. Tener cuidado cuando se utilia el acido n>trico en la limpiea de la moneda, evitar el contacto directo con este, haciendo uso de instrumentos adecuados como guantes, mascarillas para no respirara el gas del acido , ya que este puede causar quemaduras o irritaciones en los ojos,etc.
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3uando se desinfecta la moneda se hio falta la seguridad de que en el momento de que nosotros pongamos en las placas petri siga estando estéril ya que en el trayecto estuvo e#puesto al aire. Ctro también fue lavar las manos, las cuales no estaban desinfectadas y as> cogimos la moneda, es por eso que notamos un leve crecimiento de microorganismos.
42 BIBLIOGRAFÍA
