LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM FISIOLOGI HEWAN AIR PERHITUNGAN SEL DARAH MERAH DAN SEL DARAH PUTIH IKAN LELE ( Clarias sp.)
Disusun sebagai salah satu syarat untuk memenuhi tugas laporan akhir prakti kum Fisiologi Hewan Air
Disusun oleh: Maghfira Zahra Dirgantara Haifa Chairunnisa Dela Nur'aini Kuswanda
230110160077 230110160077 230110160098 230110160098 230110160144 230110160144
Kelompok 5 / Perikanan B
UNIVERSITAS PADJADJARAN PADJADJARAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN PROGRAM STUDI PERIKANAN JATINANGOR 2017
KATA PENGANTAR
Puji syukur penyusun ucapkan kehadirat Tuhan YME yang telah memberikan rahmat dan hidayah sehingga penyusun dapat menyelesaikan laporan akhir praktikum kuliah Biologi Perikanan ini dengan judul “Perhitungan Sel Darah Merah dan Sel Darah Putih Ikan Lele (Clarias ( Clarias sp.)” sp.)”. Laporan praktikum ini dikerjakan guna untuk memenuhi tugas mata kuliah Fisiologi Hewan Air, FPIK Universitas Padjadjaran. Terwujudnya laporan akhir praktikum ini tentunya tidak lepas dari dorongan dan bantuan berbagai pihak yang telah mendorong dan membimbing tim penulis, baik tenaga, ide-ide, maupun pemikiran. Oleh karena itu it u dalam kesempatan ini tim penulis ingin mengucapkan terimakasih kepada Asisten Laboratorium Mata Kuliah Fisiologi Hewan Air yang telah membimbing kami menyusun Laporan Praktikum ini. Tidak lupa temanteman dan semua pihak yang ikut berpartisipasi dalam menyelesaikan tugas makalah ini. Dalam penulisan makalah ini mungkin masih terdapat banyak kesalahan, oleh karena itu kritik dan saran sangat diperlukanuntuk memperbaiki kesalahan agar dapat lebih baik lagi kedepannya. Kami berharap semoga makalah ini dapat berguna bagi semua civitas akademika yang membutuhkannya. membutuhkannya.
Jatinangor, Oktober 2017
i
DAFTAR ISI BAB
I
Halaman
.......................................................... ............. KATA PENGANTAR .............................................
i
DAFTAR GAMBAR ........................................... ............................................................ .................
ii
PENDAHULUAN
II
1.1 Latar Belakang .......................................... ................................................................ ........................ ..
1
1.2 Tujuan .......................................... ................................................................. .................................... .............
2
1.3 Manfaat ......................................... ............................................................... .................................... ..............
2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Ikan lele ............................................ .................................................................. ................................ ..........
3
2.2 Sistem Peredaran Darah Ikan.......................................... Ikan............................................ ..
4
2.3 Komposisi Darah ......................................... .............................................................. .....................
5
2.4 Perhitungan Sel Darah ............................................ ...................................................... ..........
8
2.5 Larutan Hayem ............................................ .................................................................. ......................
9
2.6 Larutan Turks............................................ Turks.................................................................. ......................... ...
9
III METODOLOGI
3.1 Tempat dan Waktu .......................................... ........................................................... .................
17
3.2 Alat dan Bahan ........................................ .............................................................. ........................ ..
17
3.3 Prosedur ........................................... ................................................................. ................................ ..........
18
IV HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN
V
4.1 Data Hasil Kelompok ................................. ...................................................... .....................
19
4.2 Data Hasil Kelas .......................................... ............................................................... .....................
22
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan .......................................... ................................................................ ............................ ......
24
5.2 Saran ............................................ ................................................................... .................................... .............
24
........................................................... ................. DAFTAR PUSTAKA ..........................................
26
LAMPIRAN .......................................... ................................................................ ................................ ..........
28
ii
DAFTAR TABEL
Nomor
J udul udul
Halaman
1
Alat yang digunakan dalam praktikum ....................................... .......................................
17
2
Bahan yang digunakan dalam praktikum.................................... ....................................
18
iii
DAFTAR GAMBAR
Nomor
J udul udul
Halaman
1
Ikan Lele ............................................ .................................................................. ......................................... ...................
4
2
Sistem Peredaran vena pada Ikan Teleostei ................................ ................................
11
3
Bagian-bagian Haemocytometer ......................................... ................................................. ........
15
4
Haemocytometer Improved Neubour ......................................... .........................................
16
5
Counting Chamber ............................................ ................................................................... .......................... ...
16
iv
DAFTAR LAMPIRAN
Nomor
J udul udul
Halaman
1
Lampiran 1. Alat ........................................... ................................................................. .............................. ........
28
2
Lampiran 2. Bahan ............................................ ................................................................... .......................... ...
29
3
Lampiran 3. Kegiatan ........................................... ................................................................. ......................
30
4
Lampiran 4. Data Kelompok ........................................... ...................................................... ...........
31
5
Lampiran 5. Data Kelas ........................................... .............................................................. ...................
32
v
BAB I PENDAHULUAN
1.1
Latar Belakang
Organisme
memerlukan
makanan
dan
oksigen
untuk
melakukan
metabolisme di seluruh tubuhnya. Berbagai proses metabolisme menghasilkan sisa (sampah) yang harus dikeluarkan oleh tubuh. Dalam proses kehidupannya, organisme senantiasa berusaha mempertahankan kelangsungan hidupnya tak terkecuali pada ikan. Salah satu mekanisme dalam menjaga kelangsungan hidup adalah dengan melakukan proses metabolism yang didapat dari asupan makanan. Peredaran materi, baik berupa bahan-bahan yang diperlukan oleh tubuh seperti oksigen maupun hasil metabolism dan sisa-sisanya dilakukan oleh system peredaran darah. Darah merupakan cairan terpenting dalam tubuh makhluk hidup. Darah mengangkut oksigen, hormone, nutrien, dan hasil buangan. Darah merupakan salah satu parameter yang dapat digunakan untuk melihat kelainan yang terjadi pada ikan, baik yang terjadi karena penyakit ataupun karena keadaan lingkungan. Sehingga dengan mengetahui kondisi gambaran darah kita dapat mengetahui kondisi kesehatan suatu organisme (Delmann and Brown, 1989). Pada ikan yang terserang penyakit terjadi perubahan pada nilai hematokrit, kadar hemoglobin, jumlah sel darah merah dan jumlah sel darah putih. Pemeriksaan darah (hematologis) dapat digunakan sebagai indikator tingkat keparahan suatu penyakit (Bastiawan, dkk., 2001). Studi hematologis merupakan kriteria penting untuk diagnosis dan penentuan kesehatan ikan (Lestari, 2001). Oleh karena itu, penting bagi kita melakukan pengujian terhadap kualitas darah dari suatu jenis ikan atau organisme akuatik lainnya untuk mengetahui dan menyimpulkan kondisi dari organisme tersebut. Pengujian tersebut dapat dilakukan dengan menghitung jumlah sel darah merah dan sel darah putih dari suatu sampel ikan.
1
2
1.2
Tujuan Praktikum
Tujuan dari praktikum ini adalah menghitung jumlah sel darah merah dan sel darah putih pada ikan lele (Clarias ( Clarias sp.).
1.3
Manfaat Praktikum
Manfaat dari praktikum yang kami lakukan adalah praktikan dapat menghitung dan mengetahui jumlah sel darah merah dan sel darah putih pada ikan lele (Clarias (Clarias sp). Praktikan juga dapat mengetahui dan menyimpulkan kondisi ikan dari hasil perhitungan jumlah sel darah merah dan sel darah putih ini.
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1
Ikan Lele (Clarias sp.)
2.1.1
Klasifikasi Ikan Lele (Clarias sp.)
Menurut Saanin (1984), klasifikasi dari Ikan Lele (Clarias ( Clarias sp.) adalah sebagai berikut : Kingdom Filum Kelas Ordo Famili Genus Spesies
: Animalia : Chordata : Pisces : Ostariophysi : Clariidae : Clarias : Clarias sp.
(Clarias sp.) Gambar 1. Ikan Lele (Clarias (Sumber : http://fredikurniawan.com) 2.1.2
Morfologi Ikan Lele (Clarias sp.)
Ikan lele (Clarias (Clarias sp.) mempunyai ciri – ciri yang bisa digunakan untuk membedakan dengan jenis ikan lainnya, yaitu memiliki memi liki bentuk memanjang, bagian badan bulat dan memipih ke arah ekor, tidak bersisik serta mengeluarkan mukus. Ikan lele memiliki kepala berbentuk pipih dan simetris, memiliki patil, mulut lebar, tidak bergigi, dan mulut memiliki sepasang sungut mandibular dan sepasang sungut maksilar yang lebih panjang dan tegar, daerah kepala sampai punggung berwarna coklat kehitaman. Ikan lele memiliki sifat tenang dan lebih jinak (Suyanto 2007). Badan lele berbentuk memanjang dengan kepala pipih ke bawah (depressed) . Mulut berada di ujung (terminal) dengan sepasang sungut, nasal, rahang atas, rahang bawah, dan mental. Sirip ekor membundar tidak bergabung dengan sirip anal. Sirip perut juga membundar. Mempunyai Mempunyai alat pernafasan yang terdapat dalam rongga
3
4
insang, bentuknya merupakan membran berlipat-lipat yang penuh dengan kapiler darah dan berada dalam ruang udara sebelah atas insang. Ikan lele memiliki patil yang digunakan untuk melompat dari kolam atau berjalan di atas tanah. Oleh karena itu, lele mempunyai predikat tambahan sebagai walking catfish (Suyanto, 2007). Alat pernafasan tambahan terletak di bagian kepala di dalam rongga yang dibentuk oleh dua pelat tulang kepala. Alat pernafasan iniberwarna kemerahan dan berbentuk seperti tajuk pohon rimbun yang penuh kapiler-kapiler darah. Alat pernafasan tambahan tersebut sering disebut dengan nama labyrinth yang memungkinkan lele mengambil oksigen langsung dari udara untuk pernafasan (Hernowo, 2008). Mulutnya terdapat di bagian ujung moncong dan dihiasi oleh empat pasang sungut, yaitu satu pasang sungut hidung, satu pasang sungut maksilar dan dua pasang sungut mandibula. Fungsi sungut tersebut adalah sebagai alat peraba ketika berenang dan sebagai sensor ketika mencari makan. Sebagaimana halnya ikan dari jenis lele, lele memiliki kulit tubuh yang licin, berlendir, dan tidak bersisik. Jika terkena sinar matahari, warna tubuh lele berubah menjadi pucat dan jika terkejut warna tubuhnya otomatis menjadi loreng seperti mozaik hitam-putih. Mulut lele relatif lebar, yaitu sekitar ¼ dari panjang total tubuhnya. Tanda spesifik dari lele dumbo adalah adanya kumis di sekitar mulut sebanyak 8 buah yang berfungsi sebagai alat peraba saat bergerak atau mencari makan (Khairuman dan Amri, 2002). Siripnya terdiri dari lima jenis, yaitu sirip dada, sirip punggung, sirip perut, sirip dubur, dan sirip ekor. Sirip dadanya berbentuk bulat agak memanjang dengan ujung runcing, dan dilengkapi dengan sepasang duri yang biasa disebut patil. Patil pada lele lel e sangkuriang dan lele dumbo tidak begitu kuat dan tidak begitu beracun dibanding jenis lele lainnya (Najiyati, 2003). 2.2
Sistem Peredaran Darah
Seperti pada golongan vertebrata lainnya, ikan mempunyai sistem peredara n darah tertutup, artinya darah tidak pernah keluar dari pembulunya, jadi tidak ada hubungan langsung dengan sel tubuh sekitarnya. Darah memberi bahan materi dengan perantara difusi melalui dinding yang tipis dari kapiler darah, dan kembali
5
ke jantung melalui pembulu yang ke dua. Seri pertama dinamakan sistem arteri dan seri ke dua disebut sistem vena. Sistem peredaran darah, organ utamanya adalah jantung yang bertindak sebagai pompa tekan merangkap pompa hisap. Darah ditekan mengalir keluar dari jantung melalui pembuluh arteri ke seluruh tubuh sampai ke kapiler darah, kemudian dihisap melalui pembuluh vena dan kembali ke jantung. Sistem per edaran darah ini disebut sistem peredaran darah tunggal. Peredaran darah mempunyai peranan penting terutama dalam pengangkutan oksige hasil respirasi, pengangkutan nutrien hasil proses pencernaan, dan pengangkutan sisa metabolisme yang selanjutnya dibuang melalui insang, kulit dan ginjal. Oleh karena itu sistem sirkulasi erat kaitannya dengan proses pernapasan, sekresi, pencernaan dan osmoregulasi.
Gambar 2. Sistem Peredaran Vena pada Ikan Teleostei
(Sumber : https://jen-samaku.blogspot.co.id) : https://jen-samaku.blogspot.co.id) 2.3
Komposisi Darah
Darah ikan terdiri dari atas komponen cairan (plasma) dan komponen seluler (sel-sel darah). Sel-sel darah terdiri dari eritrosit (sel darah merah), leukosit (sel darah putih) dan trombosit (keping darah), yang diedarkan ke seluruh tubuh melalui sistem sirkulasi tertutup (Wedemeyer et al., 1990). Sel dan plasma darah mempunyai peranan fisiologis yang sangat penting. Plasma darah adalah suatu cairan jernih yang mengandung mineral terlarut, hasil absorpsi dari pencernaan makanan, buangan hasil metabolisme, serta gas terl arut (Lagler et al., 1977). 2.3.1
Sel Darah Merah (Eritrosit)
Eritrosit pada ikan merupakan jenis sel darah yang paling banyak jumlahnya
6
Bentuk eritrosit pada semua jenis ikan hampir sama. Eritrosit pada ikan memiliki inti, seperti pada bangsa burung dan reptil. Jumlah eritrosit pada ikan teleostei berkisar antara (1,05 - 3,0) x 106 sel/mm3 (Irianto 2005). Eritrosit berwarna kekuningan, berbentuk lonjong, kecil, dengan ukuran berkisar antara 7 36 μm (Lagler et al. 1977). Eritrosit yang sudah matang berbentuk oval sampai bundar, inti berukuran kecil k ecil dengan sitoplasma besar. Ukuran eritrosit ikan lele (Clarias ssp) berkisar antara (10 x 11 μm) – (12 – (12 x 13 μm), dengan diameter inti berkisar antara berkisar antara 4 – 5 – 5 μm. Jumlah eritrosit ikan lele (Clarias ( Clarias ssp) adalah 3,18 x 10 6 sel/ml (Angka et al., 1985). Jika diwarnai dengan pewarnaan Giemsa, inti sel akan berwarna ungu dan dikelilingi oleh plasma berwarna biru muda (Chinabut et al. 1991). Rendahnya eritrosit merupakan indikator terjadinya anemia, sedangkan tingginya jumlah eritrosit menandakan ikan dalam keadaan stres (Wedemeyer dan Yasutake 1977).
Gambar 3. Sel Darah Merah (Eritrosit)
(Sumber: www.ilmupengetahuan.org) (Sumber: www.ilmupengetahuan.org) 2.3.2
Sel Darah Putih (Leukosit)
Leukosit merupakan jenis sel yang aktif di dalam sistem pertahanan tubuh. Setelah dihasilkan di organ timus dan ginjal, leukosit kemudian diangkut dalam darah menuju ke seluruh tubuh (Irianto 2005). Leukosit akan ditanspor secara khusus ke daerah yang mengalami peradangan yang serius (Guyton 1997). Leukosit tidak berwarna dan jumlah leukosit total ikan teleostei berkisar antara 20.000150.000 butir tiap mm 3 . Leukosit berbentuk lonjong sampai bulat (Moyle dan Chech 1988). Pada ikan lele, mas, dan nila, leukosit jenis eosinofil dan basofil jarang ditemukan, kecuali bila ada reaksi kekebalan dengan perantaraan sel (Nabib dan pasaribu 1989).
7
Limfosit, dengan pewarnaan Giemsa, berbentuk bundar dengan sejumlah kecil sitoplasma non granula berwarna biru cerah atau ungu pucat (Chinabut et al. 1991). Limfosit bersifat aktif dan mempunyai kemampuan berubah bentuk dan ukuran. Limfosit mampu menerobos jaringan atau organ tubuh yang lunak untuk pertahanan tubuh (Dellman dan Brown 1992). Ukuran rata – rata rata limfosit berkisar antara 4,5 - 12 μm (Moyle dan Chech 1988). Persentase normal limfosit pada ikan teleostei berkisar antara 71,12 – 71,12 – 82,88% 82,88% (Affandi dan Tang 2002). Jumlah limfosit di dalam darah ikan lebih banyak dibandingkan dengan limfosit pada mamalia. Kepadatan limfosit pada ikan sebesar 48 x 10 3 sel/mm3 sedangkan pada mamalia sekitar 2 x 10 3 sel/mm3 (Roberts 1978). Monosit berbentuk oval atau bundar, dengan d iameter berkisar antara 6 15 mikron, memiliki inti berbentuk oval. Inti terletak berdekatan dengan tepi sel dan mengisi sebagian isi sel. Persentase monosit pada ikan teleostei sekitar 0,1% dari seluruh populasi leukosit yang bersirkulasi. Monosit pada ikan memiliki morfologi yang hampir sama dengan monosit pada mamalia (Roberts 1978). Nabib dan Pasaribu
(1989)
melaporkan
bahwa
monosit
bersama
makrofag
akan
memfagositosis sisa – sisa – sisa sisa jaringan dan agen penyebab penyakit. Heterofil berbentuk bulat dan berukuran besar, diameter berkisar antara 9-13 mikron, memiliki sitoplasma dalam jumlah besar dan bergranul. Sitoplasma berwarna biru cerah atau ungu ungu pucat, sedangkan inti berwarna biru gelap (Chinabut et al. 1991). Jumlah heterofil di dalam darah akan meningkat apabila terdapat infeksi oleh bakteri (Dellman dan Brown 1992). Roberts (1978) melaporkan bahwa persentase heterofil pada ikan berkisar antara 6 - 8%.
Gambar 4. Sel Darah Putih (Leukosit) (Sumber: www.blog-guru-tik.blog www.blog-guru-tik.blogspot.com) spot.com)
8
2.3.3
Trombosit
Trombosit merupakan platelet darah yang sangat kecil ukurannya (kira-kira berdiameter sepertiga diameter sel darah merah), tidak memiliki inti dan bentuknya bentuknya bulat. Trombosit Trombosit melekat pada dinding pembuluh pembuluh darah yang terluka dan kemudian menutup daerah yang rusak di dinding vaskuler. Ketika trombosit pecah, pengkoagulasi membentuk tromboplastin yang membantu membentuk jarring jaring sel sebagai upaya pertama dalam proses penyembuhan penyembuhan ( Winarni, 1997 : 25).
Gambar 5. Keping Darah (Trombosit) (Sumber: www.donordarah.info) (Sumber: www.donordarah.info) 2.4
Perhitungan Sel Darah
2.4.1
Perhitungan Sel Darah Merah
Penghitungan jumlah eritrosit yaitu darah sampel s ampel dihisap dengan pipet yang berisi bulir pengaduk pengaduk warna merah sampai skala 0,5, selanjutnya ditambah Larutan Larutan Hayem (Lampiran 3) sampai skala 101. Darah dalam pipet diaduk dengan cara menggoyangkan pipet membentuk angka angka delapan selama 3-5 3 -5 menit sehingga darah tercampur rata. Dua tetes pertama larutan darah dalam pipet tersebut dibuang, selanjutnya larutan darah tersebut diteteskan di atas haemocytometer yang telah diletakkan gelas penutup di atasnya. Jumlah sel darah merah dapat dihitung dengan bantuan mikroskop dengan pembesaran 400x. Perhitungan Perhitungan dilakukan pada 5 kotak besar haemocytometer dan jumlahnya jumlahnya dihitung dengan rumus (Nabib dan Pasaribu, 1989). Σ Sel Darah Merah per ml darah = Jumlah rata-rata rata -rata SDM x Faktor Pengali
*Faktor Pengali = Pengenceran x Ketebalan x Jumah kotak = 200 x 10 x 25
9
2.4.2
Perhitungan Sel Darah Putih
Perhitungan jumlah leukosit yaitu darah sampel dihisap dengan pipet yang berisi bulir pengaduk warna warna putih sampai skala 0,5 0,5 kemudian ditambahkan Larutan Turk’s (Lampiran 3) sampai skala 11. Darah dalam pipet diaduk dengan cara menggoyangkan pipet membentuk angka delapan selama 3-5 menit sehingga darah tercampur rata. Dua tetes pertama larutan darah dalam pipet tersebut dibuang, selanjutnya larutan darah tersebut diteteskan di atas haemocytometer yang telah diletakkan gelas penutup di atasnya. Jumlah sel darah putih dapat dihitung dengan bantuan mikroskop dengan pembesaran 400x. Perhitungan Perhitungan dilakukan pada 5 kotak besar haemocytometer dan jumlahnya jumlahnya dihitung dengan rumus (Nabib dan Pasaribu, 1989). Σ Sel Darah Putih per ml darah = Jumlah rata-rata SDM x Faktor Pengali
*Faktor Pengali = Pengenceran x Ketebalan x Jumah kotak = 20 x 16 x 10 = 3200 2.5
Larutan Hayem
Larutan hayem merupakan larutan yang digunakan untuk mencegah penggumpalan darah saat akan dihitung jumlah eritrositnya. Selain itu, larutan hayem juga berfungsi sebagai pewarna agar eritrosit dapat terlihat jelas bentuknya. Komposisi larutan hayem menurut Anonim (2007) terdiri atas 5 gram Na2SO4, 1 gram NaCl, 0.5 gram HgCl2, dan 200 ml akuades atau larutan hayem’s terdiri dari HgCl 25 gram, NaCl 5 gram, Na2SO4 2,5 gram dan Akuades 1000 ml.
2.6
Larutan Turks
Sampel darah diencerkan dengan larutan Turks untuk menghancurkan sel darah merah agar jumlah sel darah putih dapat dihitung. Komposisi larutan turks menurut Anonim (2007) terdiri atas Acetil Acid Glacial 2 ml, Gentian Violet 1 ml, dan Akuades 100 ml.
BAB III METODOLOGI
3.1
Waktu dan Tempat
Praktikum mata kuliah Fisiologi Hewan Air Perhitungan Sel Darah Merah dan Sel Darah Putih pada Ikan Lele ini berlangsung pada tanggal 3 Oktober 2017 bertempat di laboratorium Akuakultur, Gedung 2 Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Padjadjaran.
3.2 Alat dan Bahan
Adapun alat dan bahan yang digunakan dalam praktikum Fisiologi Hewan Air tentang Perhitungan Sel Darah Merah dan Sel Darah pada Ikan Lele Putih adalah sebagai berikut:
Tabel 1. Alat yang dihunakan dalam praktikum No
Nama Alat
1. Mikroskop Mikroskop
Fungsi
Alat untuk mengamati jumlah sel darah putih dan sel darah merah
2. Haemocytometer
Untuk memberikan kotak-kotak yang memudahkan dalam menghitung jumlah sel darah merah dan sel darah putih dengan bantuan mikroskop
3. Pisau bedah
Untuk membedah ikan lele
4. Pipet thomma
Menyimpan sel darah agar tidak beku dan untuk tempat pengenceran sampe darah
5. Talenan
Sebagai alas saat membedah ikan
6. Handcounter
Alat untuk menghitung jumlah sel darah merah dan sel darah putih
10
11
Tabel 2. Bahan yang digunakan dalam praktikum No
Nama Bahan
Fungsi
1.
Ikan Lele
Sebagai sampe yang diambil sampel darahnya
2.
Larutan Hayem
Sebagai pengencer sel darah merah
3.
Larutan Turks
Sebagai pengencer sel darah putih
4.
Alkohol Alkohol
Sebagai larutan yang diteteskan pada ikan lele
3.3 Prosedur Praktikum
Disiapkan mikroskop dengan perbesaran 40x lalu diletakan haemacytometer tipe Improved Improved Neubawer dibawah mikroskop lalu amati sampel kotak-kotak terlihat (untuk sel darah merah dan putih)
Ikan lele ditempatkan dan dilukai pada bagain ekornya dengan pisau bedah
Darah yang keluar dihisap dengan pipet Thomma sampai sklala 0,5, lalu penghisapan dihentikan dan ditambahkan ditambahkan larutan Hayem's untuk sel darah merah dan larutan Turks untuk sel darah putih sampai skala 101 dan 11
Melepaskan karet penghisap agar cairan tidak keluar, lalu digerakan agar
Kamar hitung ditetesi kemudian dilakukan dil akukan perhitungan dengan hand counter
Dilakukan perhitungan rata-rata jumlah sel darah merah dan sel darah putih
BAB IV HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil 4.1.1 Data Hasil Kelompok
Berdasarkan pengamatan pada praktikum kali ini yang menggunakan sampel ikan lele (Clarias (Clarias sp.) sp.) dengan bobot sebesar 131 gram didapatkan data hasil perhitungan sel darah merah dan sel darah putih yang yang dilakukan oleh kelompok 5.
Jumlah Sel Darah Merah 35 30
h a r e 25 m h a r 20 a d l e 15 s h a l 10 m u J
5 0
A1
A2
A3
A4
A5
Letak sel darah merah
Gambar 5. Grafik jumlah sel darah merah
Berdasarkan grafik tersebut didapat rata-rata jumlah sel darah merah adalah: − =
A1 + A2 A2 + A3 + A4 + A5 5
=
29 + 17 + 31 + 26 + 21 5
= 24,8
Sehingga jumlah Sel Darah Merah pada Ikan Lele hasil pengamatan kelompok kami adalah: Rata-rata SDM x Faktor Pengenceran = 24,8 x 50.000 = 1.240.000 sel/mm 3
12
13
Pada sel darah merah, faktor pengali yang digunakan adalah:
Pengenceran dengan Larutan Hayem : 200 kali
Luas kotak hitung : 10 kali
Ketebalan Haemacytometer : 25 kali
Faktor Pengenceran: 200 x 10 x 25 = 50.000
Pada sel darah putih, faktor pengali yang digunakan adalah:
Pengenceran dengan Larutan Turks : 20 kali
Luas kotak hitung : 16 kali
Ketebalan Haemacytometer : 10 kali Faktor Pengenceran: 20 x 16 x 10 = 3.200
Jumlah Sel Darah Putih 300 250
h i t u p 200 h a r a d 150 l e s h a 100 l m u J
50 0
A1
A2
A3
A4
Letak sel darah putih
Gambar 6. Grafik jumlah sel darah putih
Berdasarkan grafik tersebut didapat rata-rata jumlah sel darah merah adalah: − =
A1 + A2 + A3 + A4 4
=
279 + 283 + 113 + 202 4
= 219,25
14
Sehingga jumlah Sel Darah Putih pada Ikan Lele hasil pengamatan kelompok kami adalah: Rata-rata = SDP x Faktor Pengenceran = 219,25 x 3.200 = 701.600 sel/mm3 Jumlah eritrosit pada ikan teleostei umumnya berkisar berkisar antara 1.050.000 – 3.000.000 tiap mm 3 darah. Hasil pengamatan kelompok, diketahui bahwa sel darah merah yang terkandung dalam sampel sebesar 1.240.000 1.240.000 sel/mm 3. Angka tersebut menunjukkan bahwa jumlah sel darah merah pada ikan lele yang diamati dalam batas normal. Jumlah eritrosit pada ikan lele adalah 3,18 x 10 sel/ml (Angka et al ,.1985). ,.1985). Jumlah eritrosit pada ikan teleostei berkisar antara 1,05 – 3,0 3,0 x 10 sel/mm3(Irianto 2005). Eritrosit berwarna kekuningan, kekuningan, berbentuk lonjong, kecil, dengan ukuran berkisar antara 7-36 7-36 μm (Lagler et al. 1977). Eritrosit yang sudah matang berbentuk oval sampai bundar, inti berukuran kecil dengan sitoplasma besar. Ukuran eritrosit ikan lele (Clarias (Clarias spp.) berkisar antara (10x11 μm)–(12x13μm), dengan d engan diameter inti berkisar antara 4 –5μm. Pengujian ini menunjukkan bahwa jumlah sel darah merah pada ikan lele yang diuji berada pada kisaran normal. Perhitungan sel darah merah pada ikan lele dil akukan pengenceran darah menggunakan larutan Hayem’s. Larutan ini digunakan untuk mencegah penggumpalan darah saat akan dilakukannya perhitungan p erhitungan jumlah eritrosit. Selain itu, larutan hayem’s juga berfungsi sebagai pewarna agar eritrosit dapat terlihat jelas bentuknya. Sel darah putih yang terkandung dalam sampel yang diambil dengan melakukan pengenceran menggunakan larutan turks agar sel darah merah hancur dan sel darah putih dapat dihitung adalah sebesar 701.600 sel/mm3. Jumlah leukosit total ikan teleostei berkisar antara 20.000 - 150.000 sel tiap mm 3. Leukosit berbentuk lonjong sampai bulat (Moyledan Chech 1988). Bentuk sel darah putih pada ikan lele, mas, dan nila, leukosit jenis eosinofil dan basofil jarang ditemukan, kecuali bila ada reaksi kekebalan dengan perantaraan s el (Nabib dan pasaribu 1989)
15
Ukuran rata – rata rata limfosit berkisar antara 4,5-12μm 4,5-12μm (Moyle dan Chech 1988). Persentase normal limfosit pada ikan teleostei berkisar antara 71,12 – 82,88% 82,88% (Affandi dan Tang 2002). Jumlah limfosit dalam darah ikan lebih banyak dibandingkan dengan limfosit pada mamalia. Kepadatan limfosit pada ikan s ebesar 48 x 10 sel/mm3 sedangkan pada mamalia berkisar antara 2x10 sel/mm3 (Roberts 1978). Jumlah sel darah putih pada sampel yang diuji berada dalam kondisi tidak normal jika dibandingkan dengan sumber literatur yang diperoleh. Hal ini dikarenakan dalam pengambilan darah pada sampel yang terlalu lama sehingga meningkatkan sel darah putih pada sampel. Hal ini sesuai dengan pernyataan Kimball (1988) yang menyatakan jumlah leukosit akan meningkat ketika ikan sedang terkena infeksi karena merupakan unit yang aktif dalam sistem pertahanan tubuh, dan leukosit berperan dalam melawan penyakit infeksi.
4.1.2
Data Hasil Kelas
Jumlah eritrosit pada ikan teleostei umumnya berkisar berkisar antara 1.050.000 – 3.000.000 tiap mm 3 darah. Jumlah sel darah merah yang didapat kelompok 5 tersebut menunjukkan bahwa jumlah sel darah merah pada ikan lele yang diamati normal. Begitupun dengan kelompok-kelompok lainnya yang ada di kelas perikanan B. Namun pada beberapa kelompok yaitu kelompok 16, 17, 18, 19, 20, 21, dan 22 jumlah sel darah merahnya sangat tinggi sebesar 7.000.000 dan 14.550.000 sel/mm 3 dan melebihi kisaran jumlah dari literatur. Perbedaan ini ini dikarenakan faktor faktor yang terlibat dalam perhitungan sel darah merah. Berikut grafik perhitungan sel darah merah kelas B :
16
2,000,000 1,800,000 3
1,600,000
m1,400,000 m / l 1,200,000 e s 1,000,000 h 800,000 a l m 600,000 u J 400,000 200,000 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 11 12 12 13 13 14 14 15 15 16 16 17 17 18 18 19 19 20 20 21 21 22 22
Kelompok
Gambar 7. Grafik sel darah merah kelas B Perikanan 2016
Jumlah sel darah merah pada tiap ikan berbeda-beda, hal ini dipengaruhi beberapa faktor. Menurut Soetrisno (1987), perbedaan jumlah eritrosit dipengaruhi oleh : 1. Jenis kelamin, pada ikan jantan jumlah eritrositnya lebih banyak daripada betina 2. Umur, semakin tua umur ikan, maka jumlah eritrositnya semakin sedikit 3. Kondisi badan, pada kondisi sehat jumlah eritrosit akan lebih banyak 4. Aktivitas harian, jumlah eritrosit akan meningkat pada waktu bergerak aktif 5. Stress, jika stress akan menurunkan jumlah eritrosit pada ikan. 1,200,000 3
1,000,000 m m 800,000 / l e s 600,000 h a 400,000 l m u J 200,000 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
Kelompok
Gambar 8. Grafik sel darah putih kelas B Perikanan 2017
Leukosit pada ikan tidak berwarna, berjumlah antara 150.000 – 150.000 – 300.000 300.000 sel dalam tiap mm3 darah. Jumlah sel darah putih yang didapatkan kelompok 5 menunjukkan bahwa jumlah sel darah putih pada ikan lele yang diamati tidak dalam keadaan normal. Begitupun dengan kelompok-kelompok lainnya yang ada di kelas
18
perikanan B. Namun pada kelompok 18 ditemukan bahwa jumlah sel darah putih ikan lele dalam keadaan normal yaitu 286.400 sel/mm3 dan sesuai dengan literatur. Perbedaan ini dikarenakan faktor faktor yang terlibat dalam perhitungan sel darah putih. Menurut kami meningkatnya jumlah sel darah putih pada ikan lele dikarenakan ikan lele stress akibat luka pada bagian tubuhnya terlalu lama terbuka sehingga dalam mengatasi agar ikan tidak terinfeksi, ikan lele memproduksi sel darah putih yang meningkat jumlahnya. Jumlah leukosit akan meningkat ketika ikan sedang terkena infeksi karena merupakan unit yang aktif dalam sistem pertahanan tubuh, dan leukosit leukosit berperan dalam melawan penyakit infeksi (Kimball 1988). Beberapa faktor yang mempengaruhi ketidak normalan jumlah leukosit tersebut adalah menurut Moyle dan Chech (1988), leukosit berfungsi sebagai sistem pertahanan tubuh yang akan dikirim secara khusus ke daerah yang terinfeksi dan mengalami peradangan yang serius. Arry (2007) melaporkan bahwa peningkatan jumlah leukosit total terjadi akibat adanya respon dari tubuh ikan terhadap kondisi lingkungan pemeliharaan yang buruk, faktor stres dan infeksi penyakit. Penurunan jumlah leukosit total disebabkan karena adanya gangguan gangguan pada fungsi organ ginjal dan limpa dalam memproduksi leukosit yang disebabkan oleh infeksi penyakit. Menurut Irianto (2005), salah satu contoh penyakit pada ikan yang menyebabkan gangguan gangguan pada ginjal dan limpa antara lain Aeromonas lain Aeromonas hydrophila. hydrophila. Bastiawan (1995) mengemukakan bahwa jumlah leukosit pada ikan dipengaruhi oleh jenis atau spesies ikan, misalnya jumlah leukosit lele dumbo lebih banyak dibandingkan dengan ikan mas. Selain jenis ikan, i kan, jumlah leukosit juga dipengaruhi faktor-faktor fisiologis yaitu umur, aktivitas otot, aksitasi dan masa estras (Coles 1986). Kemudian jumlah leukosit juga dapat menurun bila kondisi tubuh stress (Soetrisno 1987). Faktor- faktor yang mempengaruhi jumlah leukosit yang normal tersebut harus dikendalikan selama pemeliharaan ikan agar ikan tidak terserang penyakit infeksi.
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
5.1
Kesimpulan
Kesimpulan yang dapat diambil setelah melakukan praktikum ini yaitu: Jumlah kisaran ikan dalam keadaan normal adalah untuk sel darah merah adalah 20.000-3.000.000 20.000-3.000.000 sel/ml, sedangkan sel darah putih sekitar 20.000-150.000 sel/ml. Hasil pengamatan kelompok, diketahui bahwa sel darah merah yang terkandung dalam sampel sebesar 1.240.000 sel/mm 3. Angka tersebut menunjukkan bahwa jumlah sel darah merah pada pada ikan lele yang diamati normal. Jumlah eritrosit pada ikan lele adalah 3,18 x 10 sel/ml (Angka et al ,.1985). ,.1985). Jumlah eritrosit pada ikan teleostei berkisar antara 1,05 – 3,0 x 10 sel/mm3 (Irianto 2005). Hasil pengamatan kelompok, kelompok, diketahui bahwa bahwa jumlah sel darah putih pada ikan lele yang diamati tidak dalam keadaan normal yaitu sebesar 701.600 sel/mm3. Alat untuk menghitung jumlah sel darah merah adalah Haemacytometer yang terdiri dari kamar hitung tipe “improved Neubauer”dan pipet Thomma. Larutan yang digunakan untuk penghitungan sel darah merah adalah larutan Hayem’s. Sedangkan Hayem’s. Sedangkan larutan yang digunakan untuk penghitungan sel darah putih adalah larutan Turks. 5.2
Saran
Dalam melakukan praktikum mengenai perhitungan sel darah merah dan sel darah putih hendaknya dilakukan secara cepat dan tepat agar ikan ti dak mengalami stress yang dapat mengubah kondisi ikan yang diamati dan akan men yebabkan hasil pengamatan pun berubah.
19
DAFTAR PUSTAKA
Amrullah. 2004. Penggunaan Imunostimulan Spirulina platensis untuk Meningkatkan Ketahanan Tubuh Ikan Koi (Cyprinus carpio) terhadap Vir us Herpes (Thesis). Bogor: Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Bastiawan. 1995. Pengukuran 1995. Pengukuran Jumlah Leukosit, Eritrosit Eri trosit dan Kadar Hemoglobin. Hemoglobin . Yogyakarta : Universitas Gajah Mada. Blaxhall P.C. 1972. The Haematological assesment of the health of fresh water fish. A Review of Selected Literatur. Journal Fish Biology. 4:593-604. Chinabut, S., C. Limsuwan, dan P. Katsuwan. 1991. Histology of yhe Walking Catfish, Clarias batracus.IDRC. Canada. 96 pp. Coles. 1986. Effect of Cadmium and Nickel Exposure on Haemotological Parameters of Common Carp Cyprinus carpio. Acta Ichthyological . Volume 35. Halaman 29-38. Ddellman,D.H, and Brown, M.E. 1999. Buku Teks histology Veteriner I. Universitas Indonesia. Press. Jakarta.279 hal. Irianto Agus. 2005. Patologi Ikan Teleostei. Gadjah Mada University Press, Yogyakarta. Kimball JW. 1992. Biologi Umum. Jakarta: Erlangga Erlan gga Lagler, K.F., et al. 1977. Ichthyology. Jhon Willey and Sons. Inc, New YorkLondon. p 506 Manik, Nurdin. 2007. Hubungan Panjang-berat dan Faktor Kondisi Ikan Layang (Decapterus russelli) dari Perairan Sekitar Teluk Likupang Sulawesi Utara. Oseanologi dan Limnologi di Indonesia. UPT Loka Konservasi Biota Laut Bitung LIPI Moyle, P.B. & J. J. Cech. (1988). Fishes. An Introduction to Ichthyology. Second Edition. New Jersey: Prentice Hall. Nabib,
R. dan F. H. Pasaribu. 1989. Patologi dan Penyakit Ikan. DepartemenPendidikan dan Kebudayaan, Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi.IPB.Bogor. 158hal.
Raharjo. 1980. Sistem morfologi dan anatomi ikan. i kan. Bandung. 21 hal.
20
26
21
Siregar, S. 1999. Penuntun Praktikum Ichtyology. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Riau. Pekanbaru. 81 hal (tidak diterbitkan). Sutrisno. 1987. Diktat Fisiologi Ternak . Fakultas Peternakan, UNSOED : Purwokerto. Suyanto, S.R., 2007. Budi Daya Ikan Lele. Edisi Revisi. Penerbit Penebar Swadaya. Jakarta. Svobodova Z, Vyukusova B. 1991. Diagnostik, Prevention and Therapy of Fish Disease and Intoxication. Research Institute of fish Culture and Hydrobiology Vodnany Czechoslovakia. Takashima and T. Hibiya. 1995. An atlas of fish histologi, Normal and Pathological Feature Second Edition. Kodansha Ltd, Tokyo. 195p. Windarti, T. Efrizal, Chaidir Pulungan, Deni Efizon, Yuliati. 2010. Buku Ajar Fisiologi Hewan Air. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Universitas Riau. Pekanbaru. 68 halaman (tidak diterbitkan).
LAMPIRAN
Lampiran 1. Alat yang digunakan saat praktikum
Mikroskop
Handcounter
Pisau
Talenan
Pipet Thomma
22
Lampiran 2. Bahan yang digunakan saat praktikum
Ikan Lele
Larutan Turks
Larutan Hayem
23
Lampiran 3. Kegiatan Praktikum
Sel darah putih
Sel darah merah
Darah ikan disedot sesudah dibedah
24
Lampiran 4. Data Hasil Kelompok Tabel 1. Data Perhitungan Sel Darah Merah Ikan Kelompok 5
Jumlah SDM 1
2
3
4
5
29
17
31
26
21
Total
Rata-rata
Pengenceran (hayem)
Luas kotak hitung
124
24,8
200
25
Jumlah SDM per ml (sel/mm3) 1.240.000
Tabel 2. Data Perhitungan Sel Darah Putih Ikan Kelompok 12
Jumlah SDP 1 279
2 283
3 113
4 202
Total
Rata-rata
Pengenceran (turk)
Luas kotak hitung
877
219,25
20
16
25
Jumlah SDP per ml (sel/mm3) 701.600
Lampiran 5. Data Hasil Kelas Tabel 3. Data Hasil Perhitungan Sel Darah Merah Ikan Lele di Kelas B Kelompok 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
SDM1 25 28 26 17 29 29 25 24 24 20 19 49 23 14 23 280 291 135 215 264 207 207
Perhitungan Sel Darah Merah SDM2 SDM3 SDM4 27 17 23 23 25 27 21 29 22 25 21 23 17 31 26 25 26 28 25 20 15 24 12 18 24 12 18 25 17 28 30 14 20 29 51 13 17 20 24 27 19 13 24 16 12 272 297 179 266 224 217 91 163 152 301 313 251 315 253 340 301 377 247 268 302 256
26
SDM5 26 27 23 23 21 26 25 14 14 16 24 28 21 27 23 252 255 127 278 283 230 305
RataRata 23,6 26 24,2 21,8 24,8 26,8 22 18,4 18,4 21,2 21,4 34 21 20 19,6 256 250,6 133,6 271,6 291 272,4 267,6
Jumlah SDM per ml (sel/mm3) 1.180.000 1.300.000 1.210.000 1.090.000 1.240.000 1.340.000 1.100.000 920.000 920.000 1.060.000 1.070.000 1.700.000 1.050.000 1.000.000 980.000 12.800.000 12.530.000 6.680.000 13.580.000 14.550.000 13.620.000 13.380.000
I kan Lele di Kelas B Tabel 4. Data Hasil Perhitungan Sel Darah Putih Ikan
Kelompok 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
SDP1 305 277 308 367 279 314 367 130 130 113 178 106 103 211 172 101 122 101 141 115 117 208
Perhitungan Sel Darah Putih SDP2 SDP3 370 281 202 279 370 281 308 305 283 113 370 210 370 313 134 145 134 145 237 147 147 230 158 255 88 92 281 287 232 215 152 153 119 151 88 71 152 153 146 179 111 152 156 177
SDP4 283 367 283 277 202 205 202 258 258 150 230 287 110 323 239 198 98 98 144 156 163 198
Rata-Rata 309,75 281,25 310,5 314,25 219,25 274,75 313 166,75 166,75 161,75 196,25 201,5 98,25 275,5 214,5 151 122,5 89,5 147,5 149 135,75 184,75
A1 A2 A3 A4 A5 Gambar 1. Ilustrasi kotak haemocytometer sel darah merah
A1 A2 A3 A4 Gambar 2. Ilustrasi kotak haemocytometer sel darah putih
27
Jumlah SDP per ml (sel/mm3) 991.200 900.000 993.600 1.005.600 701.600 879.200 1.001.600 533.600 533.600 517.600 628.000 644.800 314.400 881.600 686.400 483.200 392.000 286.400 472.000 476.800 434.400 591.200
