ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA
PRÁCTICA Nº 01 Toma d e Mue stra ASIGNATURA
: Microbiología de los Alimentos I
DOCENTE
: Dra. Graciela Albino Cornejo
ALUMNO
: Rómulo Aycachi Inga
CICLO
: 2007 - II
Lambayeque,
24 de enero de 2008. 1
PRÁCTICA Nº 01
TOMA DE MUESTRA I.
Introducción:
La toma de muestras es el acto de separar de una partida determinada, una muestra representativa, a efectos de determinar mediante análisis organoléptico y/o de laboratorio la aptitud o no del alimento puesto a consideración. En la práctica profesional de la Microbiología de Alimentos antes de tomar las muestras hay que tener un “plan de muestreo” que es el criterio de aceptación del punto de vista microbiólogico para un determinado lote de alimento. Para elegir un plan de muestreo se tiene en cuenta cuatro puntos: 1. La peligrosidad del microorganismo. 2. La cantidad de microorganismos presentes en el alimento. 3. Las condiciones que será sometido el alimento antes de consumir. 4. La población que va a consumir ese alimento. Luego de esto se procede al envasado de las muestras y su transporte, los cuales tienen cada uno sus peculiaridades, para luego pasar al Análisis sanitario que es la determinación bromatológica para establecer la calidad de aptitud o no del alimento, tendiente a preservar la salud pública o individual del consumidor, realizado de acuerdo a los métodos y las técnicas analíticas legales nacionales o supletorias internacionales reconocidas. En la Microbiología de Alimentos nos encontramos con una nueva terminología que nos seran de uso común de aquí en adelante, como por ejemplo: Alimento de mayor riesgo en salud pública : Alimento que, en razón a sus características de composición, especialmente en sus contenidos de nutrientes, Aw actividad acuosa y pH, favorece el crecimiento microbiano y por consiguiente, cualquier deficiencia en su proceso, manipulación, conservación, transporte, distribución y comercialización, puede ocasionar trastornos a la salud del consumidor. Alimento perecedero: Alimento que, en razón de su composición, características fisicoquímicas y biológicas puede experimentar alteración de diversa naturaleza en un tiempo determinado y que por lo tanto exige condiciones especiales de proceso, conservación, almacenamiento, transporte y expendio. Lote: Cantidad determinada de unidades de características similares fabricadas bajo condiciones presumiblemente uniformes que se identifican por tener el mismo código o clave de producción. Muestra: Es definida como la fracción de un material sobre la que se estudian ciertas características que posteriormente se generalizan a todo el conjunto.
2
Contramuestra: Es una porción adicional de la muestra tan parecida a la srcinal como sea posible, debe tomarse al mismo tiempo y en la misma forma y cantidad que la muestra original para asegurar que las condiciones sean idénticas. Existen además diferentes tipos muestras, entre ellas, las mas comunes a encontrar en alimentos tenemos: -
Muestras sólidas: como por ejemplo cereales, pan, galletas, frutas, verduras.
-
Muestras líquidas: como por ejemplo los lácteos (leche, yogurt), productos azucarados (gaseosas, refrescos, jugos). - Muestras semisólidas: Por ejemplo las mantequillas. Cada uno de los tipos de muestras tiene su manera particular de ser recogidos, pero en lo posible antes de la toma deben ser homogenizados. II.
Requisitos generales para la toma de muestras :
La toma de muestras de alimentos para su control, se basa en el peligro que representa el alimento para el consumidor por la presencia de microorganismos patógenos o de microorganismos capaces de alterar el alimento o de contaminación química y en general de cualquier problema que se detecte y que pueda causar riesgo a la salud del consumidor final. -
-
-
La toma de muestras deberá ser realizada por personal técnico adecuadamente entrenado, capacitado y autorizado para estalabor. El funcionario encargado de la toma de muestras debe diri girse al dueño o responsable del cargamento, identificarse con el carnet que lo acredita como autoridad de salud pública y explicar los motivos de su actuación. El trato hacia los interesados debe ser siempre cortes y respetuoso. Al realizar la toma de muestras los alimentos debe encontrarse dentro de su vida útil y es recomendable que se tomen muestras en las cuales la fecha de vencimiento proporcione un margen de tiempo adecuado para la realización de los análisis, es decir que lo productos estos no estén próximos a vencerse. La toma de muestras debe hacerse evitando su contaminación y se deben tomar todas las precauciones de asepsia, conservando en todo momento las condiciones adecuadas de temperatura y humedad. Las muestras deben etiquetarse adecuadamente recién tomadas y la etiqueta debe contener la máxima información asegurando que no se deben desprenda durante manipulación y transporte de laposible, muestra, estas etiquetas incluir comola mínimo: Sitio de toma de muestra. Número de lote. Fecha de vencimiento del producto Persona responsable del muestreo. Día, hora y lugar en que se ha realizado la toma de muestras. Información sobre el Nº del contenedor y las condiciones de conservación del producto por ejemplo: temperatura y humedad.
3
-
Observaciones: Consignar cualquier información que considere pueda orientar el tipo de análisis a realizar, información sobre metodología de muestreo o situaciones presentadas durante la toma de muestras que puedan incidir en los resultados analíticos y en general toda observación que consideré relevante.
El envío al laboratorio debe realizarse de manera inmediata o en el menor tiempo posible, en contenedores, neveras o recipientes adecuados los cuales se deben lavar y desinfectar con anterioridad, con el fin de evitar contaminaciones.
-
Se deben trasladar las muestras al laboratorio en unas condiciones bacteriológicas idénticas a las que se tenía en el momento del muestreo, para este propósito se tomarán todas las medidas necesarias para prevenir hasta donde sea posible cualquier contaminación, crecimiento o muerte bacteriana de las muestras durante su transporte al laboratorio y su posterior almacenamiento y manipulación. - En todo momento la muestra debe conservarse de tal forma que se reduzcan al mínimo los riesgos de alteraciones que esta pueda experimentar antes del análisis. - Se debe evitar la exposición de la muestra con el aire, la luz y la manipulación. III.
Instrumentos y equipos necesarios para la toma de muestra :
EQUIPOS NECESARIOS: EQUIPOS
IMPLEMENTOS Tapabocas, gorros y guantes desechables, Ropas botas de plástico (opcional). Bolsas de plástico (descartables o tipo Whirl-pak), frascos de boca ancha (de capacidad adecuada) con tapas de rosca botellas para muestra de agua (las botellas de Envases para muestras esterilizadas agua clorada deben contener suficiente tiosulfato de sodio para asegurar una concentración de 100 mg de ese compuesto por cada litro de muestra), papel de aluminio o de envolver grueso (envuelto). Implementos esterilizados y envueltos para Cucharas, cucharones, cuchillos, pinzas, recolección de muestras. espátulas, tijeras, hisopos. Equipos para recolección de muestras. Nevera. Dispositivos de registro de temperatura Equipo de Apoyo Agentes esterilizadores. Refrigerantes
Termómetro con rango -20ºC de a 100ºC, con intervalos de no demenos 2ºC termócupla. Marcador indeleble, rollo de cinta adhesiva, etiquetas, linterna. Alcohol etílico (95%), mechero Hielo envasado, refrigerante en bolsas de plástico, bolsas o recipientes de plástico que pueden llenarsede agua y congelarse.
4
IV.
Métodos de recolección y conservación para los diferentes tipos de muestras: TIPO DE MUESTRA
Alimentos sólidos.
Alimentos líquidos o bebidas
Alimentos congelados
MÉTODOS DE RECOLECCIÓN Y CONSERVACIÓN Cortar o separar porciones de alimentos con cuchillo esterilizado u otro implemento, si es necesario. Recoger asépticamente lo menosesterilizado 200 g dey muestra con unpor implemento transferir a una bolsa de plástico o a un frasco de vidrio de boca ancha esterilizados. Tomar diferentes muestras de arriba al centro y de otros lugares según se considere necesario. Refrigerar, congelar o mantener a temperatura ambiente según sea el caso. Revolver o agitar. Tomar la muestra en una de las siguientes formas: 1. Transferir con un implemento esterilizado de 100 a 500 ml en un envase esterilizado, refrigerar o mantener a temperatura ambiente la muestra según sea el caso. 2. Colocar un tubo largo esterilizado en el líquido y cubrir la abertura superior con el dedo o la palma. Transferir el líquido a un jarro o a una bolsa esterilizada. Refrigerar o mantener a temperatura ambiente según sea el caso. Usar uno de los siguientes procedimientos: 1. Enviar o llevar pequeños volúmenes congelados al laboratorio, sin descongelar ni abrir. 2. Perforar con taladro esterilizado de diámetro grande desde la aparte superior del envase diagonalmente por el centro hasta la parte inferior del lado opuesto. Repetir al otro lado hasta recoger por lo menos 200 g. Mantener congelado. 3. Picar el material congelado con martillo y cincel esterilizado y recoger las astillas con un implemento esterilizado, transferir por lo menos 200 g a un envase estéril. Mantener congelado. Usar hielo seco si es 5
Alimentos Deshidratados
necesario. Tomar o enviar envase aislado Insertar una sonda esterilizada desde la parte superior de una lado del envase diagonalmente por el centro hasta la parte inferior del lado opuesto. Sostener la parte superior y transferir a envase esterilizado. Repetir del lado opuesto hasta recoger por lo menos 200g. Un método alternativo consiste en recoger material con una cuchara, una similar, espátula,siempre un baja esterilizado. lengua o un implemento Transferir el material a un envase estéril.
V.
Clases de toma de muestra :
Toma de muestras selectiva: Se utiliza generalmente toma de muestras selectiva cuando se quiere aumentar la posibilidad de detectar productos defectuosos o que incumplen las normas vigentes, las muestras que se toman para atender reclamos se suelen seleccionar y de esta forma hay una mayor probabilidad de confirmar hechos conocidos por esto se denomina muestra selectiva. Es selectiva por que se orienta a aumentar la probabilidad de tomar productos sospechosos Toma de muestra objetiva: Método de toma de muestras recomendado por la FAO para productos alimenticios importados ya que no se han supervisado las operaciones de fabricación en el país importador y en consecuencia no se dispone de indicios para tomar muestras selectivas. El muestreo objetivo implica que el inspector tiene acceso a todas las unidades que componen el lote para el muestreo y que cada unidad es identificable y tiene las mismas posibilidades de resultar seleccionada. Se lleva a cabo extrayendo al azar pequeñas unidades de varios puntos dentro del lote, combinándolas luego para formar la muestra. La toma de muestras objetiva resulta complicada al ser difícil proceder con objetividad cuando se trata de determinar la calidad de un lote determinado de alimentos no homogéneos, siempre quedará la duda sobre si la muestra recogida fue demasiado pequeña o excesivamente grande y si la selección se hizo realmente al azar. Toma de muestras Mixta (objetiva – selectiva) La mayoría de los muestreos son selectivos u objetivos sin embargo en ocasiones al recoger una muestra objetiva y a causa de alguna observación se puede cambiar a la toma de muestras selectiva. Por ejemplo: Si se detectan latas anormales en un lote de productos enlatados muestreados al azar el responsable de la toma de muestras debe cambiar inmediatamente su proceder y recoger una muestra selectiva basándose en su hallazgo de latas hinchadas, con derrames u algún otro defecto. VI.
Tamaño de la muestra :
Método de muestreo al azar: Cuando no se impartan instrucciones específicas, una regla general que puede seguirse es recoger un número de muestras equivalente a la raíz cuadrada del número de unidades del lote para muestreo. Ejemplo: Para un lote de 36 6
cajas cada una de las cuales contiene 36 paquetes de 500 gramos aplicando el principio de la raíz cuadrada el responsable del muestreo debe recoger 6 muestras de las 36 cajas seleccionando al azar las 6 cajas y asegurándose que estén representadas todas las cajas. Seguidamente de cada una de las cajas se extraerá al azar las unidades necesarias para la conformación de la muestra. Toma de muestras por lotes: Es conveniente tomar muestras por lotes, ya que si se encuentra algo anormal en el producto el seguimiento para determinar la causa y el alcance del problema, es más fácil. Por regla general cada una de las unidades que constituye la muestra debe pertenecer al mismo lote, ya que las muestras pertenecientes al mismoprimas lote han sido procesadas bajo condiciones idénticas (equipos, día, turno y materias entre otros). Si los lotes de los productos importados están entremezclados hasta el extremo que no sea razonable separarlos, se puede considerar que constituyen un solo lote y por lo tanto los defectos hallados en uno de los lotes harán que todo el envió resulte sospechoso o en el mejor de los casos se exigirá al importador separar los lotes para que se pueda realizar una nueva toma de muestras. Toma de muestras en contenedores: Las muestras tomadas de contenedores deben proceder por lo menos de cinco (5) sondeos realizados en diferentes sitios del contenedor: 1. Del centro del contenedor. 2. De 1 a 1.5 m de la parte posterior y hacia uno de los extremo 3. De 1 a 1.5 m de la parte anterior y hacia el extremo opuesto del punto 2 4. El punto 4 y 5 desde los extremos y costados opuestos. Otra metodología recomienda la toma en los cuatro extremos y el centro. En algunas ocasiones no es posible acceder con facilidad a los diferentes puntos del contenedor ó bodega por lo que puede resultar difícil obtener las muestras exactamente de los puntos señalados en el diagrama, por lo tanto el responsable de la toma de muestras deberá utilizar su sentido común, con el objetivo de tomar una muestra objetiva al azar respetando los lineamientos dados. VII.
Referencias:
-
BOTERO A., Patricia y C., TIBADUIZA (2003). Instructivo para toma de muestras y análisis de productos alimenticios y bebidas en puertos. INVIMA. Bogotá, D.F. - Marzocchi ediciones. 2005. Extracción, Toma de muestras para análisis de productos alimenticios (Toxinas). Obtenido el 19 de enero de 2008 en http://riie.com.ar/?a=22355 - Guía de sistemas de vigilancia de enfermedades transmitidas por alimentos (VETA) y la Investigación de brotes. Anexo C. 2001. Obtenido el 19 de enero de 2008 en http://www.inppaz.org.ar
7
