Resumen:
En la correspondiente correspondiente práctica se realizó la obtención de la caseína de la leche , está se obtiene por acidulación de la leche que se encuentra en forma de caseinógeno caseinógeno .Mediante este proceso de extracción extracción se transforma en caseína , después se mide el punto isoeléctrico de la caseína obtenida y es comparada comparada con la caseína dada en el laboratorio , midiendo su grado de opacidad de las muestras disueltas a diferentes tipos de pH .
Detalle experimental: o
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Materiales: rejilla, 6 tubos de ensayo y un grande , cocinilla, vaso de 50 y 200 mL , probeta, papel filtro , bagueta , mortero , luna de reloj , pipetas de 1y 2 mL , matraz de 200 mL Reactivos: ácido acético glacial ,carbonato de sodio al 0.1 % , alcohol , éter , etanol , cloroformo , ácido acético 0.2 M , acetato de sodio 0.2 M. Material: leche , leche desnatada , solución 0.1 % de caseína .
Obtención de la caseína de la leche Leche diluida y calentada Se tomó 30 mL de leche y se lleva a calentar por un periodo de tiempo , la capa formada en la superficie es retirada con una bagueta .
Se agitó constantemente y se agregó gotas de ácido acético glacial hasta que ya no se forme precipitado de caseína . Después se filtró y se lavó con volúmenes pequeños de agua .
El precipitado se disolvió en 0.1 % de carbonato de sodio , para poder eliminar las grasas y otras sustancias . La mezcla es filtrada , quedando la grasa en el filtro . Al filtrado que contiene sal sódica de caseína se precipita nuevamente con gotas de ácido acético glacial . Se filtró nuevamente y se lleva a sequedad .
Caseína obtenida
Leche sin diluir y sin calentar. Se vierte 30 mL de leche en un vaso y se agita constantemente agregando gotas de ácido acético glacial hasta que ya no se forme precipitado de caseína . Después se filtró y se lavó con volúmenes pequeños de agua .
El precipitado es disuelto en 0.1 % de carbonato de sodio , para poder eliminar las grasas y otras sustancias
La caseína se disuelve completamente mientras la grasa queda en estado suspendido .
La mezcla es filtrada , quedando la grasa en el filtro . Al filtrado que contiene sal sódica de caseína se precipita nuevamente con gotas de ácido acético glacial .
Se filtró nuevamente y se lleva a sequedad .
Se llevó a un motero y se añade 15 mL de alcohol para deshidratarlo .
Luego es llevado a un tubo de ensayo grande , donde se añade éter y 20 mL de la mezcla de etanol y cloroformo ( 1 :1)
, se agita hasta separar la grasa de la caseína .
La grasa presente en el tubo de ensayo es extraida hasta dejar la caseina . La caseína que se obtiene
después de ser
secada al aire , es un polvo blanco .
La caseína obtenida
Determinación del punto isoeléctrico de la caseína En 6 tubos de ensayo se preparó la mezcla
amortiguadora con diferentes valores de pH . Se
agita el contenido de los tubos y se añade 0. 5 mL de solucion de caseína . Después se agita la mezcla en los tubos y se observa la turbidez de la solución en cada uno de ellos . Se agregó a cada tubo 2 mL de etanol y valorar el grado
de opacidad de las muestras .
Preparación de los sistemas amortiguadores para la determinación del punto isoeléctrico de la caseína
N° de tubo 1 2 3 4 5 6
Composición de la Mezcla amortiguadora 0.2 M CH3COOH 0.2 M CH3COONa 1.9 0.1 1.8 0.2 1.4 0.6 1.0 1.0 0.6 1.4 0.2 1.8
pH
de la Mezcla 3.4 3.8 4.4 4.7 5.1 5.7
Leche sin diluir y sin calentar. De la caseína obtenida , se preparó en una solución al 0.1 % . Se
disuelve la caseína en
acetato de sodio al 0.1 N y se lleva a 200 mL . Luego se realiza el mismo procedimiento anterior para ver el grado de opacidad de las muestras .
