Prof. Aurico Sousa Fonseca Cátedra de Microbiología e Inmunología - Departamento de Patología Veterinaria Facultad de Ciencias Ci encias Veterinarias – Universidad Central de Venezuela
UBICACIÓN TAXONÓMICA Dominio: Bacteria Filo: Proteobacteria Clase: Gammaproteobacteria Orden: Pasteurellales Familia Pasteurellaceae
Pasteurella
1887- Trevisan. 1985 , subespec subespecies ies
de la especie tipo
Mannheimia
1999.
Actinobacillus Haemophilus
Hibridación DNA-DNA y secuenciación RNAr
Lonepinella
CARACTERÍSTICAS COMUNES DE LOS GENEROS
Pasteurella y Mannheimia HÁBITAT 1. Dist Distri ribu buci ción ón mun mundi dial al 2. Gr Gran an es espe pect ctro ro de hué huésp sped edes es 3. Com Comensa ensall en la la mucos mucosaa del del TR y TGI TGI en en mamífe mamíferos ros y aves 4. Mannheimia se localiza en tonsilas como comensal en hospedadores.
Gram (-)
CARACTERÍSTICAS IMPORTANTES DE LOS GENEROS Pasteurella y Mannheimia •
Son bacilos Gram negativos pequeños.
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Poseen un óptimo crecimiento en medio enriquecidos enriquecidos..
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Inmóviles, oxidasa positivos y anaerobios facultativos.
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Especies, en su mayoría, son catalasa positivas. positivas .
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Algunas especies crecen en Agar Mac Conkey.
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Presentan coloración bi bipolar polar con con tinción de Giemsa Giemsa..
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Comensales del tracto respiratorio superior. Patógenos respiratorios.
Agar Mac Conkey
Agar Sangre Catalasa (+) Oxidasa (+)
Tinción bipolar en Giemsa
MORFOLOGÍA
Frotis por aposición: Impronta hepática
Tinción bipolar Técnica de Giemsa
a. Bacilos o cocobacilos Gram negativos b. Pequeños: 0,3 - 1 x 1,0 – 2,0 m c. Inmóviles d. No esporulados e. Aparecen aislados, en pares o pequeñas cadenas f. Tinción bipolar con la Técnica de Giemsa g. Anaerobios facultativos con metabolismo respiratorio y fermentativo
Especies de interés veterinario
Pasteurella multocida VARIABILIDAD ANTIGÉNICA 1. Seroti Serotipos pos caps capsula ulares res:: A al F. F. 2. Ag. somát somático ico (L (LPS PS): ): ser serov ovar aried iedad ades es 1 a la 16
FACTORES DE VIRULENCIA 1. Endotoxin ina a 2. Ne Neur uroa oami mini nida dasa sa 3. Cá Cáps psul ula a ant antif ifag agoc ocit itic ica a y otras otras proteínas asociadas 4. Ex Exot otox oxin ina a en cep cepas as ser seroti otipo po D en cerdos conocidas como com o AR+
Especies poco patógenas o apatógenas
MORFOLOGÍA Bacilos o cocobacilos Gram negativos Pequeños: 0,3 - 1 x 1,0 – 2,0 m Inmóviles No esporulados Aparecen aislados, en pares o pequeñas cadenas Anaerobios facultativos con metabolismo respiratorio y fermentativo, con excepción de trehalosa y manosa. No producen gas Fermentan glucosa.
TREHALOSA (-)
MANOSA (-)
GLUCOSA (+)
Especies de interés veterinario
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA Serovariedades somáticas “O”: 17
Biotipos A y T: positivos y negativos asociados a enfermedad . Serotipificación no es practica; mejor caracterización fenotípica y genética.
FACTORES DE VIRULENCIA
FACTORES DE VIRULENCIA Inflamación alveolar, Agente tensioactivo Cápsula
Adhesión
Proteína de Envoltura no capsular
Hemolisina
Fimbrias
M. haemolytica
Neuroaminidasa Proteína que liga transferrina Proteasa neutra
Secuestro de Fe + Endotoxina
Altera viscosidad Del Moco
Leucotoxina
Hidroliza sialoglicoconjugados
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO LABORATORIO ESPÉCIMEN 1. Depe Depend ndee de de la es espe peci ciee ani anima mall y el síndrome que sufre 2. TR TR:: as aspirado tr traqueobronquial, hisopados nasales o pulmón con la lesión 3. Se Sept ptic icem emia ias: s: Sa Sang ngre re,, híg hígad ado, o, bazo, riñón y linfo-nódulo 4. Animales vi vivos: pus, exudados o leche mastítica
Diagnóstico de laboratorio
EVALUACIÓN MICROSCÓPICA DE LA MUESTRA 1. Gram po poco re recomendado 2. Giemsa o Wright: 3. Ba Baci cilo lo Gra Gramn mneg egat ativ ivo o peq peque ueño ño de dif difíc ícil il visualización, presenta la coloración bipolar Frotis por aposición: Impronta hepática
Tinción bipolar Técnica de Giemsa
AISLAMIENTO PRIMARIO A. sangre (bovino u ovino) y A. MacConkey B- hemolisis (M) Lactosa + (M) Selectivo: AS + neomicina, bacitracina o actidione Incubación: 24 - 48 h a 37ºC •
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CRITERIOS DE IDENTIFICA IDENTIFICACIÓN CIÓN Características de colonias Crecimiento en agar sangre y/o agar MacConkey Prueba de la oxidasa Perfil bioquímico Apariencia Apa riencia microscópica: bacilo o cocobacilo pequeño •
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MORFOLOGÍA MORFOLOG ÍA DE COLONIAS •
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Semejan “gotas de rocío”
M. haemolytica y P. trehalosi :
Colonias hemolíticas, sin olor crecen en agar MacConkey (lactosa +) •
P. multocida : redondas,
grises, brillantes y mucosas (cepas con cápsula); no hemolítica con olor dulce, no desarrolla en agar MacConkey
IDENTIFICACIÓN Pruebas bioquímicas •
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Catalasa + (P y M) Oxidasa + (P y M) Glucosa + (P y M) Sacarosa v (P y M) Lactosa - (P) Manitol + (P) Indol + (P) Ureasa - (P y M) Ornitina descarboxilasa + (P)
Serología
IDENTIFICACIÓN IDENTIFICA CIÓN BIOQUÍMICA
M
Pasteurellaceae Pasteurella
Neumonía en rumiantes. Septicemia en ovejas jóvenes
Mannheimia haemolytica ha emolytica, biotipo A) (P. haemolytica,
P. multocida P. multocida ssp. multocida: La mayoría de las cepas patógenas para animales domésticos
P. trehalosi h aemolytica biotipo T) (P. haemolytica
P. multocida ssp. septica: Recuperada de varias especies. Infestaciones por gusanos en hombre perro y gato
P. multocida ssp.gallicida: Recuperada de especies de aves.
Septicemia en ovejas jóvenes
ENFERMEDADES EN ANIMALES •
Procesos neumónicos en bovinos, ovinos, cerdos, caprinos (Fiebre de Embarque)
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Catarro de los conejos
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Rinitis atrófica del cerdo.
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Mastitis severas en rumiantes.
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Agente primario primario del Cólera aviar Infecciones en seres humanos –
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Infecciones sistemática Meningitis Infecciones pulmonares Infección de heridas producidas por mordedura de gatos.
Tratamiento
Antibióticoterapia
Penicilina Tetraciclina Cefalosporina Cloxacilina Tetraciclina