Preparacion de Montaje

PREPARACION PREPARACION DE MONT MO NTAJE: AJE: PRESERVACIÓN DE MATERIAL VEGETAL: La preservación permite conservar las estr estrc ct tra rass e!te e!tern rnas as e inte intern rnas as"" Lo Loss m# m#to to$o $oss m% m%ss co com& m&nm nmen ente te tili'a$os son: la preservación en (ielo) la preservación $e las mestras enveltas en papel (&me$o * coloca$as en +olsas pl%sticas) * el seca$o" De esta manera se pe$en transportar las mestras (asta el la+oratorio" Por seca$o se pe$en mantener: ma$eras) semillas) ,rtos secos) material para (er+ario) (on-os * al-as macroscópicos"

 TRATAMIENTO DE MATERIAL PARA MICROSCOPIO COMPUESTO: ."/ ."/ 0I1 0I1ACIÓ ACIÓN: N: La 23ac 23ació ión n tien tiene e co como mo o+3e o+3eto to ma mata tarr las las c# c#l lla lass lo m% m%ss r%pi$ r%pi$am ament ente e posi posi+le +le para para pro$ pro$c cir ir el m4nim m4nimo o $e alte altera raci cion ones es en las estrctra" Para la 23ación $el material a 23ar) $epen$ien$o $e s tama5o) $e los est$ios 6e se 6ieran reali'ar * $el 23a$or) se coloca completo o corta$o en ,ra-mentos $entro $el 23a$or) -ar$an$o na relación $e .7:.) 23a$or: material" E!isten $i,erente tipos $e 23a$ores) $e los cales los m%s com&nmente tili'a$os para las plantas speriores son el alco(ol 879 * el 0AA) 6e es na me'cla $e 7 ml $e alco(ol 879) ; ml $e %ci$o ac#tico * ; ml $e ,ormol al <9" Para las al-as se tili'a como 23a$or na me'cla $e a-a $e mar * ,ormol al ; 9= para los (on-os se tili'a na solción acosa $e -licerina al .79 a la 6e se le a5a$en nas -otas $e ,enol" El tiempo $e 23ac 23ació ión n $epe $epen$ n$e e $el $el ma mate teri rial al * $el $el 23a$ 23a$or or)) an6 an6e e)) por por lo -ener -eneral) al) se recomien$a n m4nimo $e >< (oras" El so $e material $e (er+ario para est$ios anatómicos amerita s re(i$ratación) para 6e recpere s ,orma * tr-i$e'" tr-i$e'" La re(i$ratac re(i$ratación ión pe$e lo-rarse lo-rarse calentan$o calentan$o el material material en a-a o tili'an$o na serie $e alco(oles en concentraciones $escen$entes) esto es) $es$e alco(ol .779 (asta a-a" >"/ C?RTES: Los cortes $e material ,resco o 23a$o pe$en ser (ec(os a mano o con la a*$a $e n instrmento especial $enomina$o micrótomo" Si se sa material 23a$o (a* 6e lavarlo previamente para eliminar el 23a$or * pasarlo a alco(ol al ;79 $on$e $e+e ser manteni$o" Si el material 23a$o no tiene s2ciente consistencia) $e+e ser incli$o $entro $e al-&n material a!iliar r4-i$o 6e ,acilite (acer los cortes" Este material a!iliar pe$e ser: anime) para2na o resinas epó!icas) $epen$ien$o $el m#to$o * los o+3etivos $el est$i est$io o rea reali'a li'arr" Las incls inclsione ioness en para2n para2na a o res resina inass re6i re6ier eren en $e procesos la+oriosos" Can$o se necesitan cortes r%pi$os) a mano o con micrótomo) $e materiales 23a$os o sin 23ar) el anime reslta n material $e incl incls sió ión n o sopo soport rte e m* m* &til &til"" De+i De+i$o $o a las las ca carac racte ter4s r4sti tica cass $el $el ma mate teri rial al ve-etal) si se 6iere est$iar solamente los tipos $e te3i$os) se pe$en prepa preparar rar los $enomin $enomina$o a$oss cortes cortes es6el es6el#tic #ticos) os) en los 6e se preser preservan van solamente las estrctras $e las pare$es * se $estr*en los conteni$os cella cellare res" s" Para ell ello) o) na ve' reali' reali'a$o a$oss los cortes cortes)) se trans2 trans2ere eren n a na solción solción $e cloro cloro comercial comercial o le34a $rante .7/.; mintos * posteriorm posteriormente ente se lavan para eliminar el cloro" @"/ @"/ MACE MACER RAD?S AD?S:: Para ara est est$i $iar ar las las c# c#l lla lass co comp mplet letas as se rec recrr rre e a los los m#to$os $e maceración 6e $iselven las l%minas 6e mantiene ni$a$ las c#llas * las $e3an m%s o menos li+res" Para ello se tili'an solciones $e en'imas $e-ra$ativas o %ci$os minerales ,ertes en solción"

<"/ C?L?RACIÓN: Para la +ena o+servación $el material se re6iere te5irlo o colorearlo" Los colorantes tili'a$os son m* varia$os * pe$en ser prepara$os en solción acosa o alco(ólica) * emplea$os como colorantes simples o como me'clas $e colorantes" La coloración o+teni$a pe$e ser monocrom%tica) can$o se ti5e to$o $e n solo color) o metacrom%tica) can$o emplea$o n solo colorante) los te3i$os se ti5en $e $i,erentes colores) $epen$ien$o $e la reacción $e ca$a te3i$o con el colorante" Los colorantes pe$en ser: -enerales) can$o ti5en to$os los te3i$os sin $istinción) o espec42cos) can$o ti5en n $etermina$o te3i$o $epen$ien$o $e la reacción 64mica 6e ocrre entre el colorante * el te3i$o" ;"/ M?NTA1E: na ve' te5i$o el material se $e+e colocar en na l%mina portao+3etos * prote-erlo con n c+reo+3etos) para po$er ser o+serva$o con el microscopio" El monta3e pe$e ser permanente) o+teni#n$ose l%minas 6e tienen na $ración in$e2ni$a o) semipermanente) can$o se preparan l%minas $e corta $ración" na l%mina termina$a $e+e ser $e+i$amente i$enti2ca$a) para ello se coloca na eti6eta en la cal se in$ica: el nom+re $e la planta) el ór-ano) el tipo $e corte) la coloración emplea$a) el nom+re $e 6ien la reali'ó * la ,ec(a"

TÉCNICA PARA CORTAR A MANO SECCIONES TRANSVERSALES (C.T.)  Y LONGITUDINALES (C.L.) DE MATERIAL FRESCO Y FIJADO: ." Prepare na (o3illa $e a,eitar) parti#n$ola por la mita$ * limpi%n$ole to$a la -rasa" Tome na c%psla $e petri con n poco $e a-a" Ten-a a mano ss pin'as o a-3as $e $isección * las l%minas Bportao+3etos * c+reo+3etos 6e va a necesitar" >" Seleccione el material a cortar) sep%relo * mant#n-alo (&me$o" @" Si se trata $e (o3as o material laminar) pe$e ser $o+la$o para $arle consistencia" Si se trata $e tallos pe$e ser corta$o completo o en secciones" <" Si el material es +lan$o o sin consistencia) proce$a $e la si-iente manera: a" corte $os tiras B.!@ cm $e na l%mina $e anime $e apro!ima$amente @ mm $e espesor" +" colo6e el material a cortar orienta$o a$eca$amente entre los $os pe$a'os $e anime * (me$#'calo con a-a" c" a-arre 2rmemente el material con na mano * entre los $e$os 4n$ice * pl-ar) * con la otra mano tome la (o3illa Bss manos ,ncionar%n como n micrótomo" Realice los cortes $esli'an$o la (o3illa so+re el material en ,orma (ori'ontal"  $" colo6e los cortes en n recipiente con a-a) * con la a*$a $e n pincel) pin'a o palitos $e +am+& o $e naran3a) elimine los pe$a'os $e anime" Si los cortes no son tili'a$os $e inme$iato trans2#ralos a n ,rasco con alco(ol $e 879"

TÉCNICAS DE TINCION Y MONTAJE SEMIPERMANENTE:

C?L?RANTES: A'l $e toli$ina o a'l $e metileno al .9 en solción acosa" MEDI? DE M?NTA1E: Glicerina al @79 en solción acosa" M#to$o: ." En n vi$rio $e relo3) na pie$ra $e to6e o $irectamente so+re la l%mina portao+3etos) colo6e na -ota $e colorante" >" Con la a*$a $e n pincel o n palito colo6e los cortes en el colorante * $#3elos $rante n minto" @" Lave los cortes para eliminar el e!ceso $e colorante"  <" En la l%mina limpia) colo6e na -ota $e -licerina ,enola$a * encima los cortes ci$an$o 6e no se $o+len" ;" C+ra con na l%mina c+reo+3etos) tenien$o ci$a$o 6e no entre aire" " Elimine con la a*$a $e n papel secante el e!ceso $e -licerina" 8" Selle los +or$es con pintra $e 5as transparente"  " I$enti26e la l%mina"

COLORACIÓN Y MONTAJE PERMANENTE: (punto n!o"#$t%o) C?L?RANTES: A'l $e toli$ina * a'l $e metileno al .9 en solción alco(ólica al 879" MEDI?S DE M?NTA1E: F%lsamo $e Cana$%) Permont) Merco-lass o cal6iera $e las resinas 6e se tili'an para este 2n" Estas resinas no son misci+les con el a-a) ni con el alco(ol) sólo en solventes como el !ilol" M#to$o: Para reali'ar monta3es permanentes los cortes $e+en estar completamente $es(i$rata$os tili'an$o para ello na serie o +ater4a $e alco(ol ascen$ente) posteriormente ser clari2ca$os en !ilol" ." na ve' reali'a$os los cortes * limpios $e los restos $el material $e soporte) trans2#ralos a na solción $e alco(ol 879" >" En na pie$ra $e to6e o vi$rio $e relo3) pon-a nas -otas $e colorante" @" Colo6e los cortes en el colorante $rante nos $os mintos" <" Des(i$rate los cortes) pas%n$olos scesivamente por alco(ol $e 7) 7) ; * .779) reali'an$o @ cam+io para el alco(ol $e .779" ;" Trans2era le-o los cortes a na me'cla $e alco(ol/!ilol) .:.) * se-i$amente realice tres cam+ios con !ilol pro" " So+re n portao+3etos limpio * seco colo6e na -ota $e !ilol) * pon-a los cortes en ella" 8" Pon-a na -ota $el me$io $el monta3e so+re el corte" No permita en nin-&n momento 6e el corte se se6e" " Colo6e la laminilla c+reo+3etos so+re la preparación sin 6e entre aire"

" Presione la laminilla * $e3e secar la preparación" .7" Limpie la preparación tili'an$o !ilol e i$enti,46ela"

C&'u'$ Vt$' na c#lla ve-etal es n tipo $e c#lla ecariota $e la 6e se componen mc(os te3i$os $e los ve-etales" A men$o) es $escrita con los ras-os $e na c#lla $el par#n6ima asimila$or $e na planta vasclar" Pero ss caracter4sticas no pe$en -enerali'arse al resto $e las c#llas $e na planta) meristem%ticas o a$ltas) * menos a&n a las $e los m* $iversos or-anismos imprecisamente llama$os ve-etales" Las c#llas a$ltas $e las plantas terrestres presentan ras-os comnes) conver-entes con las $e otros or-anismos s#siles) 23os al sstrato) o pasivos) propios $el plancton) $e alimentación osmótro,a) por a+sorción) como es el caso $e los (on-os) pse$o(on-os * $e mc(as al-as" Esos ras-os comnes se (an $esarrolla$o in$epen$ientemente a partir $e protistas nicellares ,a-ótro,os $esn$os Bsin pare$ cellar" To$os los ecariontes osmótro,os tien$en a +asar s soli$e') so+re to$o can$o alcan'an la plricellari$a$) en la tr-encia) 6e lo-ran -racias al $esarrollo $e pare$es cellares resistentes a la tensión) en com+inación con la presión osmótica $el protoplasma) la c#lla viva" As4) las pare$es cellares son comnes a los (on-os * protistas $e mo$o $e vi$a e6ivalente) 6e se alimentan por a+sorción osmótica $e sstancias or-%nicas) * a las plantas * al-as) 6e toman $iseltas sales minerales $el me$io * reali'an la ,otos4ntesis" H tam+i#n ca+e a-re-ar 6e no tienen centriolos en s interior"

ORGANI*ACIÓN ESTRUCTURAL CELULA VEGETAL: Las c#llas a$ltas $e las plantas se $istin-en por al-nos ras-os $e otras c#llas ecariotas) como las c#llas t4picas $e los animales o las $e los (on-os) por lo 6e son $escritas a men$o $e manera espec42ca" Sele $escri+irse con los ras-os $e na c#lla $el par#n6ima asimila$or $e na planta vasclar= pero ss caracter4sticas no pe$en -enerali'arse sin m%s al resto $e las c#llas) meristem%ticas o a$ltas) $e na planta) * menos a&n a las $e los m* $iversos or-anismos llama$os imprecisamente ve-etales" La c#lla ve-etal es a6ella 6e se mestra en las plantas * 6e las a*$a a vivir"

?RGANEL?S DE LA CELLA VEGETAL H S 0NCI?N: La c#lla ve-etal posee .8 tipos $e or-%nlos $i,erentes con ,nciones especiali'a$as: La Mem+rana plasm%tica) la mitocon$ria) el ret4clo en$oplasm%tico r-oso BRER) el ret4clo en$oplasm%tico liso BREL) la envoltra nclear) el ncleolo) el n&cleo) el comple3o $e Gol-i) el citoes6eleto) el -lio!isoma) la pare$ cellar) los plasmo$esmos) la vacola) los tilacoi$es) los -r%nlos $e almi$ón) los ri+osomas * los cloroplastos 0NCI?N DE CADA N? DE L?S ?RGANEL?S: ."Mem+rana plasm%tica: Separa la c#lla $e s entorno= re-la el movimiento $e materiales (acia $entro * ,era $e la c#lla" >"Mitocon$ria: ?!i$a com+sti+le para o!i$ar ATP" @"Ret4clo en$oplasm%tico r-oso BRER: S4ntesis $e prote4nas <"Ret4clo en$oplasm%tico liso BREL: S4ntesis $e l4pi$os= meta+olismo $e ,%rmacos" ;"Envoltra nclear: Se-re-a la cromatina BADN  Prote4na $el citoplasma" "Ncleolo: S4ntesis $e ARN ri+osómico" 8"N&cleo: Contiene los -enes Bla cromatina" "Comple3o $e Gol-i: Procesa) empa6eta * $istri+*e prote4nas a otros or-%nlos para s e!portación" "Pare$ cellar: Con2ere ,orma * ri-i$e'= prote-e a la c#lla $el (inc(amiento osmótico" .7"Citoes6eleto: Soporte estrctral $e las c#llas= ,acilita el movimiento $e los or-%nlos" .."Glio!isoma: Contiene los en'imas $el ciclo $el -lio!ilato" .>"Ri+osomas: S4ntesis $e prote4nas" .@"Plasmo$esmos: Permiten el paso entre $os c#llas ve-etales" .<"Vacola: De-ra$a * recicla macromol#clas * almacena meta+olitos" .;"Tilacoi$es: Sinteti'an el ATP con aprovec(amiento $e la ener-4a lm4nica" ."Gr%nlos $e almi$ón: Almac#n temporal $e -l&ci$os) pro$ctor $e la ,otos4ntesis" .8"Cloroplasto: Almacena la ener-4a solar) pro$ce ATP * -l&ci$os""