Introducción Esta publicación tiene como objetivo describir los principios básicos del recogido de fluidos corporales encontrados en la escena y sus aplicaciones prácticas, así actualizar el artículo publicado el 3 de diciembre de 2007. Uno de los problemas principales que confrontan las sociedades modernas es el de la criminalidad. A pesar de los esfuerzos realizados por los sistemas de justicia criminal, el crimen y la delincuencia continúan en aumento sin que puedan ser prevenidos y muchas veces esclarecidos. La mayoría de los sistemas legales se basan en el testimonio de los testigos principalmente para lograr convicciones en corte. Pero en muchos casos éstos se niegan a declarar o se les olvida o confunden detalles relevantes a la comisión del delito, lo cual resulta en absoluciones en los tribunales. Esto implica que muchos ofensores se queden sin castigo y que continúen su carrera delictiva. Lo anterior ha obligado a los especialistas en las Ciencias Forenses a enfatizar la búsqueda de los testigos mudos en el lugar de los hechos: la evidencia física que es el resultado de la Teoría de la Transferencia. Teoría de la transferencia Edmond Locard, considerado el padre de la Medicina Forense Moderna, desarrolló la Teoría de la Transferencia o Intercambio en el 1928. (Sosa, 2008, Biografía de Edmond Locard). La misma continúa citándose en importantes textos del Siglo XX y XXI. Uno de ellos, Investigación de delitos de Charles Vanderbosh (2001) explica que siempre que se comete un delito ocurre un intercambio de evidencias entre el sospechoso, la víctima y la escena del crimen, lo que permite al investigador recolectar las pruebas necesarias para la identificación del sospecho y recrear el hecho delictivo. Evidencia puede ser cualquier cosa que pueda identificar al autor de los hechos y lograr su convicción en los tribunales. Dentro de esa amplia gama de pruebas se encuentran los fluidos corporales. Fluidos corporales Se definen como ".las secreciones o líquidos biológicos, fisiológicos o patológicos que se producen en el organismo." (Gobierno de Chile, Ministerio de Salud, 2004, Norma 6, Precauciones Estándar) Permiten a los expertos del laboratorio realizar análisis en busca del ADN para identificar al sospechoso y reconstruir la escena del crimen. Se considera prueba irrefutable que demuestra la veracidad de unos hechos. (Lic. Valentín, 2001, Conociendo el ADN) Debido a su importancia de tienen que recolectar mediante una serie de procedimientos sistemáticos.
Los fluidos corporales contienen ADN. El Acido desoxirribonucleico es una huella genética. Consiste de serie de moléculas que contienen material genético que son el resultado de la herencia. (Paul Recer, s.f., "La huella de mayor exclusividad", El Nuevo Día). Se utiliza en la Investigación Criminal desde 1980 en Inglaterra y en los Estados Unidos desde 1987. (José Alegría Coto, 2001, Biología molecular: Herramienta biotecnológica) La mayoría de los estados (Estados Unidos) han aprobado leyes para crear una base o banco de datos. En Puerto Rico la reglamentación al respecto está contenida la Ley #175 del 24 de julio de 1998. La misma establece el Banco de ADN administrado por el Instituto de Ciencias Forenses. Delitos que requieren la muestra: •
1. Asesinato en todas sus modalidades
• 2. Homicidio en todas sus modalidades •
3. Violación
•
4. Sodomía
•
5. Actos lascivos o impúdicos
•
6. Incesto
•
7. Bestialismo
• 8. Cualquier delito grave tipificado en la Ley Núm. 54 del 15 de agosto de 1989, según enmendada. (Violencia Doméstica)
9. Secuestro en todas sus modalidades 10. Robo en todas sus modalidades 11. Agresión agravada en su modalidad de delito grave 12. Perversión de menores 13. Fabricación y distribución de sustancias controladas 14. Distribución de sustancias controladas a personas menores de 18 años 15. Empresa criminal continua de sustancias controladas
16. Maltrato de menores en todas sus modalidades 17. Mutilación • Secretores y no secretores Para poder utilizar el ADN como medio para identificar sospechosos los científicos han clasificados a las personas entre secretores y no secretores. En la primera categoría tenemos a individuos cuyos fluidos corporales (sangre, semen y saliva, entre otros) pueden ser clasificados. Se puede determinar su grupo sanguíneo. La saliva es la sustancia más ideal para este tipo de análisis. Los no secretores pueden ser clasificados pero no se detectan partículas de sangre en los fluidos. No se puede determinar el tipo de sangre. Del 65 al 80% de la población son secretoras. (Machado Schiaffino, 2006, Pericias) Serología forense De acuerdo al FBI Law Enforcement Bulletin (2005) los investigadores criminales o forenses no necesitan tener conocimientos sobre la Genética ni conocer de complicadas fórmulas trigonométricas o de cálculo. Su adiestramiento está dirigido hacia el reconocimiento del valor de las manchas producidas por los fluidos corporales. No determinan ADN. Su labor consiste en encontrarlas, tomar medidas, levantarlas, embalarlas e identificarlas para enviarlas al laboratorio forense (Secured.com). Serología Forense es el término que se utiliza para identificar a la disciplina científica que estudia e identifica los fluidos del cuerpo (Lic. Olga Resumil, Criminología general 2000). En Puerto Rico el Instituto de Ciencias Forenses cuenta con una División de Laboratorio Forense de DNA / Serología, el cual ".fue inaugurado el 18 de marzo de 1998. Tiene como objetivo analizar diferentes tipos de evidencia biológica recuperada de las escenas de crímenes violentos tales como asesinatos, homicidios, violaciones, atropello y fuga, robos, escalamientos, entre otros, para contribuir a esclarecer unos hechos delictivos.Este Laboratorio cuenta con tres unidades: Serología, ADN y Banco de Data de ADN". (Instituto de Ciencias Forenses de Puerto Rico, 2009, http://www.icf.gobierno.pr/criminalistica/index.php) Ventajas del ADN
• 1. Se puede encontrar en la sangre, orina, excreta, saliva, pelo, semen y en las células de la piel. • 2. Ayuda a identificar cuerpos que han estado enterrados por mucho tiempo como las momias. •
3. Indica relaciones de parentesco.
•
4. No se puede combinar; en una escena se puede encontrar sangre de la víctima y del sospechoso mezcladas, pero se puede identificar la huella genética de cada uno de ellos. (Genge. 2004, The Forensic Casebook )
El Forensic Casebook recomienda la evidencia que debe ser recolectada. Las pruebas pueden ser cualquier cosa, pero gracias a la experiencia obtenida en la búsqueda de fluidos corporales, estos objetos tienen que ser analizados: •
1. uñas,
•
2. pañuelos,
•
3. papel toalla, servilletas, toallas,
• 4. la bolsa de basura del zafacón, •
5. palillos para limpiar oídos o dientes,
•
6. colillas de cigarrillos,
•
7. sorbetes,
•
8. celulares,
•
9. todo lo que aparente haber tenido contacto con la boca,
•
10. sábanas, almohadas, frisas,
•
11. ropa sucia,
•
12. gorras,
•
13. espejuelos,
•
14. sobre y sellos usados,
•
15. tape,
•
16. cordones,
•
17. sogas,
•
18. condones usados
Medidas preventivas
Cuando se va a manejar la evidencia de fluidos corporales el investigador tiene que evitar la contaminación: la mezcla accidental de los fluidos encontrados en la escena con otras sustancias biológicas. (Secured.com, 2006). Genge también presenta unas guías para el investigador: •
1. Utilizar guantes desechables y cambiárselos continuamente.
•
2. El equipo debe ser desechable para evitar la transferencia del ADN de un objeto a otro.
•
3. Evitar tocarse la cara o el pelo.
•
4. No tocar las superficies.
•
5. Utilizar mascarilla y trajes desechables.
•
6. Todos los fluidos corporales deben considerarse como potencialmente infecciosos.
•
7. Se deben lavar las manos antes y después de manejar la evidencia, aunque utilicen los guantes;
•
8. no fumar, beber o comer en la escena
En Segured.com (2006) también se recomienda: •
Verificar el equipo antes de tomar las muestras.
• Seguir el procedimiento establecido. •
Manipular la prueba una sola vez.
•
Si se le cae la evidencia o entra en contacto con otro equipo, se debe sustituir el mismo y comenzar la recolección de nuevo.
•
Acercar el envase y no embalar los indicios juntos.
•
El tamaño del contenedor debe ser adecuado.
• Almacenar a la temperatura adecuada. • Recoger las envolturas, los guantes y depositarlos en los envases destinados para estos fines: bolsas porosas y de papel, envases de cartón o de plástico si el objeto esta húmedo. Muestras de fluidos
Los resultados de las pruebas para análisis de ADN dependen de la pureza de la muestra, el tiempo transcurrido entre la obtención de la misma y su llegada al laboratorio. La habilidad del Criminalista depende de los cuidados que se tuvieron durante el recogido de las muestras. (Schiaffino, 1995, Pericias) Procedimientos generales: •
1. El primer oficial que llegue a la escena protege la misma en su totalidad.
•
2. Se incluyen los fluidos para protegerlos de toda contaminación, posible pérdida o destrucción.
•
3. Si están expuestos a las inclemencias del tiempo se deben cubrir con una caja o recipiente de metal.
•
4. Se deben buscar en lugares no obvios. Si el sospechoso se lavó las manos, el caño de curva debajo de desagüe se debe dejar secar y enviar al laboratorio.
•
5. El sospechoso pudo limpiarse las manos en lugares poco visibles como debajo de un mueble, alfombra u objetos oscuros. (Schiaffino, 1995, Pericias)
•
6. Se deben buscar debajo de las patas de los muebles
•
7. Se debe buscar en las rajaduras o hendiduras del piso, en especial entre las losetas.
Sangre La evidencia de sangre es común en los delitos violentos como el asesinato, homicidio, mutilación y agresión, entre otros. (Resumil, Olga. 2000 Criminología General) Generalmente se encuentra en las armas utilizadas, objetos e instrumentos, cristales rotos, ropa de la víctima y el sospechoso, superficies lisas o porosas, etc. (Schiaffino, 1995, Pericias) •
1. La muestra debe tomarse líquida o sólida o en forma de manchas secas o unidas a otras partículas.
• 2. Su color puede variar dependiendo del lugar en donde ha estado expuesta. •
3. Se debe tomar en consideración que también se descompone.
Al buscar evidencia de sangre se debe tener en mente las siguientes interrogantes: (Colacci Arrascue Nellkhand, s.f., Huellas y manchasen la escena del delito) •
1. ¿Es sangre?
•
2. ¿Es humana o animal?
•
3. ¿A cuál clasificación pertenece?
•
4. ¿Cuál es la edad de la mancha?
•
5. ¿De qué parte del cuerpo es?
En Criminalistica.net se hace referencia a una prueba de campo que ayuda al investigador a identificar si la mancha es de sangre y a conservar intacta la evidencia para entregarla al laboratorio. El producto químico para la identificación se conoce como Hemident. El procedimiento a seguir es el siguiente: •
Utilizar guantes de látex.
• Si la mancha está seca se debe disolver con dos o tres gotas de agua destilada. • Se pasa un palillo de algodón sobre la mancha y se inserta en el tubo de ensayo que contiene el reactivo. •
Se rompen las ampollas que están en el fondo del tubo de ensayo y se agita por 20 0 30 segundos.
•
Si la sangre recogida cambia de a un color azul verdoso la prueba resulta positiva.
También se utiliza un visor nocturno. Es una linterna con un filtro especial de luz azul es que capaz de detectar la presencia de sangre, localizar huellas y restos fisiológicos en la escena de un crimen. (www.segurimagen.com)
Otro producto que utilizan los investigadores forenses para localizar manchas es el Luminol. Es solución química especial, extremadamente sensitiva, que puede detectar sangre que ha sido removida con agua o inclusive con detergentes y clorox. Es un químico fluorescente que cuando se rocía en una sustancia que contiene o puede contener sangre hace que las partículas de hierro se hagan luminosas y fluorescentes. Para efectuar esta prueba los investigadores necesitan completa oscuridad. (Arrascue Nellkhand, Colacci. s.f., Huellas y manchas en la escena del delito)
Para recoger muestras de la sangre del sospechoso, la misma se extrae y se deposita en tubos de ensayo que contienen anticoagulantes. Esto es necesario para compararla con la encontrada en la escena del crimen. Lo anterior es función del técnico del laboratorio. Para procesar las manchas de sangre en el lugar de los hechos, Charles Vanderbosch nos recomienda: •
1. Protegerlas
•
2. Localizarlas (inspección ocular)
•
3. Fotografiarlas cuidadosamente: acercamiento, por secciones, a distancia.
• 4. Grabar en video y ubicar su posición en el croquis. •
5. Levantarla y embalarla cuidadosamente.
•
6. La sangre fresca se recoge con un papel absorbente.
•
7. Objetos pequeños que contengan sangre se llevan al laboratorio.
•
8. Transportarlas al laboratorio inmediatamente.
El investigador forense debe poder identificar los patrones que establecen las manchas. Estos son el resultado de la transferencia de la sangre líquida, cuando ésta entra en contacto con una superficie. El estudio de los patrones incluye:
• Localización de la mancha y descripción de los patrones. •
Cómo se crearon las manchas
•
Dirección en que viajaron las gotas
•
Origen
•
Objeto utilizado durante el ataque
•
Cantidad de heridas
•
Presencia del sospechoso en la escena
•
Posición de la víctima, el sospechoso y los objetos durante la comisión del delito.
• La secuencia de los eventos (Wikipedia, 2009, Bloodstain Pattern Analisis) Patrones de sangre Patrón de flujo: Cambio en la figura y dirección de la mancha de sangre debido a la influencia de la gravedad o el movimiento del objeto.
Chorro: es el patrón que resulta del flujo de la sangre que sale del cuerpo a una presión baja, formando un charco de sangre.
Coagulo: masa gelatinosa de tejido sanguíneo formada por factores coagulantes en la sangre. Los coágulos detienen el flujo de sangre de una herida. (http://es.mimi.hu/medicina/coagulo_sanguineo.html)
Patrón de goteo sobre sangre: Es el patrón que resulta del gotereo de sangre en sangre.
Lanzamiento: El patrón de la mancha creada cuando la sangre es sacudida o tirada a una superficie u objeto, en movimiento.
Patrón Arterial o de Chorro: El patrón de la mancha que resulta cuando la sangre sale del cuerpo, bajo una presión ejercida, causada por el rompimiento de una arteria.
Manchas circulares: Las manchas o gotas que se encuentran en superficies horizontales son de forma circular, dependiendo de la altura desde donde caen. A mayor altura, el impacto puede ocasionar que se proyecten en forma de estrellas. (Brian Innes, 2000, Bodies of Evidence)
Formas de caídas de manchas circulares (bloodspatter.com)
Características morfológicas Las formas y figuras pueden variar en tamaño y características morfológicas, debido a la cantidad, calidad, origen, dimensión, profundidad y longitud de la lesión. (Montiel)
Huellas que gotean sobre un plano inclinado, sin que la persona tenga movimiento, se presentan ovaladas y alargadas con escurrimientos largos en la parte inferior. Son manchas estáticas. (Montiel)
Las huellas que caen en un plano horizontal cuando el movimiento es rápido se presentan en forma de lágrimas, con una sola estría o alargamiento, que indica la dirección del movimiento. Se conocen como manchas dinámicas.
Las manchas producidas por un goteo ininterrumpido sobre un plano horizontal presentan un rastro de sangre en forma de franjas desplazándose estrías en los lados, que según su dirección indican movimiento. (bloodspatter.com)
Categorías Se clasifican en tres grupos: pasiva, proyectadas y transferidas. Pasiva: se crea cuando la fuerza que la produce actúa sobre su gravedad. Puede ser un patrón producido por goteo o flujo. (bloodspatter.com)
Proyectadas: la mancha se produce cuando una forma de energía ha sido transferida desde la fuente de origen de la sangre. son creadas cuando sale la sangre expuesta por un objeto en acción o una fuerza mayor que la fuerza de gravedad. El tamaño, la figura y el número que resultan de la mancha van a depender del tipo de fuerza que se utilice para hacer brotar la sangre. (bloodspatter.com)
• 1) Producida por una velocidad de bajo impacto. (bloodspatter.com)
•
2) Velocidad media: la agresión
•
3) Impacto de alta velocidad por una fuerza mayor como las armas de fuego. (bloodspatter.com)
Lo anterior no describe la velocidad de las gotas de sangre cuando viajan por el aire. Solo describe la cantidad de energía necesaria crear las manchas. (Bloodstain Pattern Analisis).
Tranferidas: Se produce cuando un objeto con sangre entra en contacto con la superficie de otro que no tiene sangre. (bloodspatter. com)
En el 2005 el FBI publicó un artículo sobre el Valor de la evidencia en donde recomiendan:
• Medir el largo y ancho de una gota de sangre y describir la dirección en que viajó. Anotar la información en el croquis y tomar fotografías. (bloodspatter.com)
•
•
Las gotas que caen a alta velocidad se producen por una fuerza extrema mayor de 100 pies por segundos. Pueden medir menos de un milímetro. Pueden ser producidas por armas de fuego o explosivos.
•
Se considera velocidad media cuando se necesita una fuerza extrema mayor de 5 pies pero menor de 25. Estas manchas miden de 1 a 3 milímetros. Pueden ser producidas por objetos cortantes.
•
Las manchas creadas por una fuerza menor de 5 pies se catalogan como velocidad menor y se producen debido a la fuerza de gravedad. Pueden medir 3 milímetros o ser más largas. Son el resultado del movimiento de la víctima o el arma.
• Cuando la sangre se dispersa en varias direcciones desde la herida las gotas tienden a esparcirse. Cuando golpean el suelo son ovaladas. (Bloodstain Pattern Analisis). •
Una línea imaginaria a través de la mancha rastrea el área de dónde provino. Se dibujan líneas a través de los patrones de sangre hasta donde la persona estaba parada. Este punto se conoce como convergencia. (Wikipedia, 2009, Bloodstain Pattern Analysis)
Para Juventino Montiel es importante que el investigador reconozca que la sangre arterial es de color rojo y una vez lesionada una arteria la sangre se proyecta con fuerza, originando huellas dinámicas. La venosa es de color oscuro, casi no tiene potencia y sólo se produce cuando la hemorragia es leve. Otra característica que se debe conocer es que la sangre ante morten se coagula entre 5 a 8 minutos posterior a su salida del cuerpo, lo que nos indica que la víctima no murió inmediatamente. La post morten no se coagula. La forma, dirección y estado de las manchas pueden indicar los movimientos posteriores de la víctima, si existió lucha o forcejeo, si estaba con vida, si fue encontrada o movida de su posición original. También nos indica que las manchas húmedas en ropas y telas se deben dejar secar antes de embalarlas y no exponerlas nunca al sol o calor. Es difícil que permanezcan en superficies como metales, cristales, porcelana, pisos pulidos, encerados o barnizados porque se escurren. Se encuentran en lugares que ofrecen la mejor superficie para su adherencia: piel, ropa o telas, paredes, madera, muebles, cortinas, pisos de cemento, alfombras, en el baño, cocina, lavabo, pasillos, teléfonos y otros lugares que pueden indicar desplazamiento de la víctima o huída del sospechoso. (Juventino Montiel, 2009, Criminalistica Tomo 1) Recolección •
1. El rastreo es importante así como el examen metódico porque pueden estar visibles o invisibles.
• 2. Se deben documentar todas las manchas de sangre durante la investigación preliminar. •
3. Los proyectiles pueden contener restos de tejido y sangre.
•
4. Para recolectar una muestra de la sangre seca, se puede utilizar una navaja de afeitar o bisturí.
•
5. Hay que desinfectarla aunque sea nueva.
•
6. Se coloca un papel limpio, previamente doblado y pegado con cinta adhesiva, debajo de la mancha, de modo que se reciba la costra al ser raspada. Luego se dobla el papel y se guarda en un sobre sellado.
• 7. Si la sangre cayó en tierra y fue absorbida por ésta, se debe recoger una cantidad suficiente para obtener toda la sangre.
• 8. Se coloca en un envase de vidrio o plástico, se sella y se anota la información necesaria. • 9. Esta muestra se tiene que enviar rápidamente al laboratorio para evitar que las bacterias y moho de la tierra destruyan en valor de la prueba. •
10. La ropa de las personas y la de cama, cuando están húmedas, deben ser envueltas de manera que no pasen a las partes limpias de la prenda.
•
11. Para evitar la transferencia se puede colocar un trozo de papel limpio entre cada capa de tela.
•
12. Esta evidencia puede contener también pelo, vello púbico, fibras o manchas de semen. (Schiaffino)
Semen En los delitos sexuales este fluido corporal es elemento de identificación humana. También se utiliza para eliminar sospechosos. La ausencia de espermatozoides no descarta que el fluido sea semen porque éstos se destruyen con facilidad y el sospechoso puede ser oligozooespérmico (poca cantidad de semen) o azooespérmico (ausencia de espermatozoides). Es el químico forense el que determina que la mancha es de semen. (Fernando Cardini, 2001, Técnicas de Investigación Criminal) Para Juventino Montiel las manchas de semen también se pueden encontrar en escenas de delitos no sexuales en donde hubo una masturbación. Recomendaciones: •
1. Semen en tierra se recoge igual que la sangre, la vestimenta y la ropa de cama.
•
2. Se tiene que ocupar la ropa interior de la víctima y el sospechoso.
• 3. Si el delito se comete al aire libre, se debe examinar minuciosamente la vegetación y el suelo. Si están sobre la vegetación, se debe retirar la planta y colocar en un envase rígido, en donde pueda permanecer inmóvil para evitar la fricción durante el traslado. •
4. Pueden encontrarse también en toallas, papel sanitario, pañuelos desechables o de algodón, pisos, asientos de auto o inodoros y en el cuerpo de la víctima.
•
5. Montiel recomienda:
•
a. Buscar manchas visibles e invisibles. Se aprecian por el color blanco semi-transparente y de aspecto grumoso; cuando son frescas el color es ligeramente amarillo y textura endurecida.
•
b. Una mancha fresca o seca que se observe sobre una superficie puede corroborarse con la aplicación de luz ultravioleta, presentando un color blanco azuloso fluorescente: Luz de Wood.
•
c. Cuando la mancha es vieja y ha sido raspada, es posible que se destruyan los espermatozoides. En tal caso se recurre al laboratorio para pruebas químicas.
Recomendaciones para la recogida y envío de muestras con fines de identificación Genética: Grupo Español y Portugués de la ISFG, (2000) Este Grupo publicó unas sugerencias generales para el recogido de fluidos corporales:
• Manchas secas en muestras pequeñas y de fácil transporte se introducen por separado en bolsas de papel o cartón. Evidencia de colillas y chicles se recogen con pinzas. Estos últimos se guardan en envases de plástico. Los sobres y sellos se introducen en bolsas de papel o plástico, sin despegarlos. •
Para manchas secas en lugares no transportables o no absorbentes como metal y cristal se recomienda utilizar un hisopo estéril ligeramente mojado con agua destilada. Se puede raspar la mancha con una navaja o bisturí sobre un papel blanco limpio. Debe ser doblado cuidadosamente y embalado en una bolsa de papel.
•
Para lugares absorbentes como las telas, manteles, alfombras, etc. se recorta la mancha y se guarda en una bolsa de papel.
•
El semen encontrado en la piel se recoge con un hisopo estéril.
•
Siempre es necesario obtener información de los hechos, de la víctima y del sospechoso.
•
Semen líquido encontrado en preservativos se atan para que no se derrame su contenido y se introduce en un frasco plástico.
• De la boca se pueden hacer dos muestras bucales con hisopos estériles que se pasan con cuidado y sin frotar mucho por la lengua, encías, los dientes y el paladar.
Saliva
Curiosamente la saliva carece de ADN, pero está en un medio lleno de células epiteliales que se desprenden constantemente y que llegan a formar parte de la misma. Aún así, es el mejor medio para obtener muestras de esta huella genética. La localización de manchas en la escena del crimen es difícil, ya que es mínima la secreción. Pero en los secuestros o robos, cuando la víctima ha sido amordazada, se produce una máxima salida-expulsión de saliva. En estos hechos delictivos la víctima por la fuerte excitación que sufre, segrega gran cantidad de saliva, espuma y en ocasiones vestigios sanguinolentos, como consecuencia de ligeras autolesiones debidas
al
forcejeo
para
evadirse
de
la
mordaza.
(Gaston
Passi,
2008,
http://unicit-
criminalistica.blogspot.com/) Búsqueda y localización •
1. Sobre las telas las manchas de saliva son blanquecinas o amarillentas.
•
2. En el suelo da la apariencia de "rastros de caracol", con aspecto de focos brillantes.
•
3. En el caso de soporte impermeable presenta la forma de pequeñas costras-escamas.
• 4. Son restos pequeños y la mancha aparece como cuarteada. (Gaston Passi, 2008, http://unicitcriminalistica.blogspot.com/)
• 5. Recoger con un hisopo húmedo (agua destilada) la mancha en cuestión, dejar secar a temperatura ambiente y enfundar el hisopo. (www.slagf.org/toma.html) •
6. La saliva puede encontrarse en el piso, paredes o ropas. Chicle, hueso de aceituna, boquilla de cigarro pueden contener células del epitelio bucal y por tanto ADN.
• 7. Debido a la existencia de mucosidades, la mancha de saliva observada con la lámpara de Word da fluorescencia azulada. (Gaston Passi, 2008, http://unicit-criminalistica.blogspot.com/) •
8. También puede utilizarse la Luz Forense UltraLite ALS
• 9. Si la muestra está seca puede rasparse con un instrumento cortante esterilizado. (Procuraduría General de la República Dominicana, 2006, Procedimientos Básicos de Recolección en el Sitio del Suceso) Admisibilidad de fluidos corporales Todas las muestras de fluidos corporales tienen que cumplir con la cadena de evidencia. Esta establece un control sobre las personas que manejan la prueba desde el inicio de la investigación hasta que se presente en corte. Vanderbosch recomienda tomar las siguientes medidas de seguridad: •
Limitar el número de personas que manejan o entran en contacto con la evidencia.
•
Si la evidencia deja de estar bajo la custodia del investigador:
a. Anote a quien se la entrego. b. Fecha y hora c. Motivo d. Condiciones al ser entregadas e. Cuando y por quien fue devuelta
f. Condiciones al ser recibida g. Documentar el procedimiento con recibos Los fluidos corporales corresponden a características físicas del sospechoso. La presentación en corte es admisible por tratarse de pruebas científicas cuyas garantías de confiabilidad deben ser corroboradas por el juzgador de los hechos. (Rafael Díaz, 1997, Evidencia Criminal para el oficial del orden público) El Tribunal Supremo de Puerto Rico ha emitido importantes decisiones judiciales que han limitado la forma de recogido de muestras que luego serán presentadas como piezas de evidencia, debido a que se utilizan para comparar y analizar los fluidos corporales característicos de una persona. No constituyen una intromisión irrazonable en contra del derecho a la autoincriminación. En una sociedad tan compleja como la nuestra, en donde cada día tenemos menos testigos dispuestos a testificar, la evidencia física relacionada a los fluidos corporales tiene un valor incalculable. Por eso es tan importante que los investigadores forenses sigan los procedimientos establecidos para garantizar que las muestras levantadas en la escena no se contaminen o destruyan, perdiendo así su valor probatorio. Mientras más conserven sus características originales más fácil y confiable será el trabajo de los especialistas en Serología Forense. Se podrá lograr la identificación del sospechoso, la evidencia será admisible en los tribunales, se lograra la convicción y castigo del verdadero autor del delito. Son muchos los que desean trabajar como investigadores forenses; pero son pocos los que tienen las cualidades necesarias para seguir los procedimientos establecidos para recolectar y embalar adecuadamente la evidencia de fluidos corporales en la escena del crimen. Se pueden adiestrar yproveerles las herramientas necesarias para realizar un trabajo de excelencia que garantice el cumplimiento de la justicia.
QUÍMICA FORENSE: QUÍMICA ANALITICA APLICADA A LA CRIMINOLOGIA La ciencia forense se basa en la aplicación de los métodos científicos a los procesos de la materia que se involucran con un crimen. Existen muchas ramas de la ciencia forense debido a que las ciencias en general tienen alguna aplicación en los asuntos públicos y criminales. Algunas de sus principales áreas son las siguientes: · Química · Biología · Odontología · Patología · Entomología · Psicología · Antropología La Química Forense es otra alternativa a los muchos caminos que puede seguir un químico en el ámbito de la investigación, además de ser una buena opción a la hora de hacer aportes
significativos a la sociedad, donde su actuar, junto con su alto nivel de conocimiento analítico y su capacidad de manejo instrumental, es de vital importancia para descifrar las evidencias y contribuir a la búsqueda de la verdad. Uno de los principios fundamentales en los cuales se rige la Ciencia Forense y específicamente la Química Forense se basa en la premisa de que cuando dos objetos entran en contacto, habrá un intercambio entre los dos. Es decir, “cada contacto deja un rastro”, frase que popularizó Edmund Locard, padre de la Criminalística moderna, provocando así un giro en la metodología investigativa. Es por esto que el químico forense rastrea este intercambio entre materiales y trae a la luz lo que es invisible a los ojos. Basándose en sus conocimientos y en las tecnologías desarrolladas, tiene la capacidad de rastrear sustancias o huellas que éstas dejan en una escena del crimen. El químico forense, por lo tanto trabaja con sustancias no-biológicas, tales como pintura, vidrio o líquidos, Lic. Gabriela Valdebenito Zenteno Departamento de Química Inorgánica y Analítica Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas Universidad de Chile Dra. Maria E. Báez Contreras Departamento de Química Inorgánica y Analítica Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas Universidad de Chile trazas de pólvora provenientes de un disparo, todas muestras que pueden ser muy bien analizadas mediante métodos analíticos apropiados. Otro de los campos en que un químico forense puede desarrollarse es en Toxicología donde principalmente trata con muestras biológicas, orina, pelo, sangre, semen, saliva o contenido gástrico y así poder determinar por ejemplo el nivel de alcohol o drogas que una persona ha consumido. Entender la evidencia requiere de herramientas provenientes de muchas disciplinas como la Química Analítica, la Biología, Ciencias de los Materiales y Genética. De hecho, el análisis de ADN está haciendo que el conocimiento en genética sea de mucha importancia. Con el paso del tiempo la Química Analítica ha adquirido una gran importancia en la investigación criminal, sobre todo a la hora de conocer la naturaleza intrínseca de cualquier sustancia o elemento y más aún, cuando sirve para auxiliar en la investigación científica de los delitos. Por lo tanto los químicos forenses tienes tres tareas principales: primero, analizar las evidencias en el laboratorio, luego, se interpreta la información que se saca de ellas y por último, se puede llegar a defender lo encontrado, mediante la testificación del químico forense en un juicio. Aplicaciones La Química Forense es aplicada en una gran variedad de técnicas, tanto cualitativas como cuantitativas, cuya principal finalidad es la búsqueda de respuestas provenientes de las diferentes evidencias que ayuden a la resolución de algún caso criminal. Algunos de estos análisis se detallan a continuación: · Test de drogas En la actualidad se busca presencia o ausencia de drogas, ya sea en polvos, líquidos, tabletas o cápsulas. Son pruebas cualitativas de laboratorio que se hacen uniendo un antígeno y su anticuerpo homólogo, para identificar y calificar el antígeno y anticuerpo específicos de una muestra; a éstos se les denomina inmunoensayos. El método consiste en el uso de una mezcla de anticuerpos selectivos para las distintas drogas (principios activos) y sus metabolitos, obteniendo un resultado con un alto grado de sensibilidad. · Análisis de muestras de incendios La manera en que un incendio ocurre naturalmente en una habitación indica si su comienzo fue deliberado o no, pero la evidencia es difícil de encontrar en estos casos ya que generalmente está cubierta por escombros. Habitualmente los incendios son provocados por el uso de acelerantes de la combustión, los cuales son examinados mediante Cromatografía Gaseosa, acoplada a Espectrometría de Masas, donde se pueden identificar aquellos residuos de líquidos de ignición presentes en las muestras de escombros. El químico
forense debe concentrar la pequeña cantidad de muestra, mediante la adsorción del residuo de acelerante en tiras de carbón activado. Luego este concentrado es eluido desde el carbón activado disolviéndolo en un solvente adecuado, dejando la muestra de una forma apropiada para luego analizarla por medio de cromatografía. · Análisis de pisadas Los ensayos fisicoquímicos sirven en el caso de estudiar las huellas de pisadas dejadas en una escena del crimen para luego compararlas con las obtenidas desde el calzado de algún sospechoso. Mediante un procedimiento electroestático, se obtiene la muestra final sobre una matriz gelatinosa la cual contiene una capa de adhesivo que permite levantar las huellas de casi la gran mayoría de las superficies, incluyendo materiales porosos o carbónicos. Este procedimiento también puede ser usado cuando la pisada no pueda ser vista (por ejemplo en el caso de que el sospechoso se haya parado sobre una hoja de diario), ya que el polvo proveniente de la hoja de diario mostrará la impresión de la forma única de la pisada, o incluso la marca de calzado que el individuo usó. · Análisis de rastros de pintura. El rastro de pintura que queda en un accidente de auto donde el culpable huye en su vehículo, sirve para relacionarla con el vehículo sospechoso. De esta manera se puede obtener datos sobre la manufactura del vehículo y el año en el que fue fabricado. Este tipo de prueba puede ser realizada observando el espectro de absorción de la muestra de pintura u observando su composición en un Fluorómetro · Uso del agua fuerte (ácido nítrico - agua). Cada arma de fuego tiene grabado un número de serial único, el cual en algunos casos criminales son borrados o lijados para impedir el rastreo e identificación del tipo de arma y a que fabricante pertenece. Mediante el uso de la restauración química, en este caso el uso de agua fuerte, estos números pueden volver a ser legibles nuevamente. · Análisis de residuos de disparo y balas Los residuos de las descargas de armas de fuego es otra área de investigación. Estos residuos pueden ser encontrados en las manos o en la ropa de algún sospechoso. Los químicos forenses pueden encontrar la clasificación del arma y relacionarla con el tipo de bala encontrado en una escena del crimen. Cuando un arma de fuego es disparada, se generan gases que contienen componentes incinerados y no incinerados provenientes de los casquillos de la bala y del propulsor del arma. Este material se puede depositar en la ropa de la víctima o en las manos de la persona que disparó el arma, pasando a ser un residuo. Mediante el uso de un Microscopio de Barrido Electrónico acoplado con un Espectrómetro de Energía Dispersiva, se pueden examinar las muestras recolectadas de los posibles sospechosos. Este instrumento es capaz de buscar en cientos de lugares microscópicos la presencia de pequeñas partículas del residuo. · Falsificación de documentos. Usando un aparato de detección electroestático se pueden identificar las diferentes hendiduras de la escritura en el caso de firmas falsas o alteración de documentos. En este caso al aplicar una descarga electroestática sobre la superficie del papel, causará diferentes patrones en los lugares donde están las hendiduras provocadas por la escritura. Al aplicar una carga opuesta, una tinta negra se adherirá en los lugares de las hendiduras. · Análisis cualitativo en caso de envenenamiento. En este caso se determina la molécula individual que está presente en la muestra. Con el tiempo se ha podido recolectar mucha información acerca de este tipo de sustancias, su composición, que tipo de drogas son etc. Este tipo de test se realiza generalmente por fotometría, aun cuando existen test químicos específicos para algunas sustancias. Cuando se trata de sustancias naturales venenosas, son más difíciles de identificar. Aun si la especie es identificada correctamente, existen variaciones en la cantidad de sustancia activa presente, por lo que se deben llevar a cabo estudios sobre la composición molecular y así confirmar la presencia de sustancias nocivas. · Búsqueda de huellas dactilares. La técnica más popular usada para revelar huellas dactilares es la que usa polvo de carbón activado finamente tamizado. La mayoría de los dedos de las personas son de composición grasosa y oleosa. Cuando éstos entran en contacto con cualquier superficie o material
relativamente suave, la fricción suelta los aceites provenientes de las ranuras de la huella. Cuando el polvo es aplicado a la superficie, se pega a estos aceites y revela el patrón de la huella. Esta técnica es muy usada en muestras de lana, metales, vidrio o plástico. En el caso de que la huella digital esté sobre una superficie muy colorida, se usa polvo fluorescente. Cuando la superficie es expuesta a la luz ultravioleta, el polvo brillará mostrando la huella digital, sin importar el color de fondo en que se encuentre. En materiales porosos, tales como el cuero, superficies de madera o papel, la técnica preferida es el uso de polvo magnético, compuesto de partículas de hierro finamente divididas las cuales son suspendidas en la superficie mediante el uso de una barra magnética. · Detección de manchas de sangre. Todos los test usados en la detección de sangre se basan principalmente en la actividad de las enzimas peroxidasas presentes en la sangre, las cuales reaccionan con los agentes químicos causando un cambio de color. Algunas de las pruebas usadas son: el test de benzidina, de leucomalaquita verde, fenolftaleina o tetrametil benzidina. Pero uno de los más famosos es el uso del Luminol, que se utiliza en química forense para detectar trazas de sangre. Éste compuesto es un derivado del ácido ftálico que cataliza la oxidación con peróxido de hidrógeno bajo emisión de luz, es decir su mayor importancia reside en la reacción de químioluminiscencia que da con peróxidos en presencia de complejos de hierro como catalizador. · Análisis de muestras biológicas (orina, sangre o contenido gástrico) y pelo. Las muestras biológicas usadas entregan información acerca de la presencia de algún tóxico en particular, o de sus metabolitos en el organismo. Se debe tomar en cuenta los tiempos de vida media de los tóxicos, el volumen de distribución y su afinidad por los distintos tejidos. Las muestras principales en este tipo de análisis, son la sangre, el plasma o el suero, ya que éstas distribuyen las sustancias por todo el cuerpo. En los casos de las intoxicaciones o muertes por envenenamiento, se eligen las muestras de contenido gástrico ya que pueden contener restos de comprimidos o líquidos que pueden orientar la investigación. En los órganos, como el riñón y el hígado y en la bilis, procedentes de las autopsias, se pueden encontrar grandes concentraciones de tóxicos. También en el tejido cerebral, el cual aporta información en la detección de sustancias psicoactivas que actúen en el sistema nervioso central. Para el caso en que se investigue el consumo reciente de drogas en individuos vivos, la muestras de orina son importantes ya que en ella se excretan los principios activos y/o sus metabolitos de la sustancia tóxica. El consumo crónico, en cambio, es principalmente analizado en muestras de pelo ya que éstas proveen una especie de “calendario de consumo” debido a que la sustancia tóxica no se metaboliza en el pelo. Papel de las Técnicas Analíticas. Es importante destacar el papel fundamental que cumple la analítica instrumental dentro de las técnicas mencionadas anteriormente, ya que gracias a los avances instrumentales hechos por científicos forenses es posible llegar a resultados certeros, tan necesarios a la hora de defender las metodologías y los resultados obtenidos ante la ley. Por esta razón es cada vez más importante contar con instrumentos más sensibles capaces de llegar a límites de detección más pequeños, mediante el uso de cantidades mínimas de muestra y técnicas analíticas acopladas, para poder determinar la presencia de sustancias donde en un pasado cercano se creía que no existían. Hoy en día, el desarrollo de la analítica instrumental está fuertemente orientado a la investigación de campo, donde los científicos se han volcado a la implementación de “laboratorios móviles”, que se caracterizan por el uso de equipos portátiles útiles a la hora de trabajar con sustancias inestables, perecibles o demasiado tóxicas como para llevarlas al laboratorio. Un ejemplo de este tipo de equipo es el Cromatógrafo portátil de Gases acoplado a Espectrómetro de Masas (GC-MS), donde se ha reducido el tamaño del equipo convencional de 114 kilogramos a uno de 28 kilogramos. Sin la base química necesaria, muchas de las técnicas mencionadas no podrían ser aplicadas a las Ciencias Forenses, por lo tanto es importante que el desarrollo de la Química Analítica siga avanzando y aportando a la investigación criminal. En nuestro país, la introducción de la Reforma Procesal Penal al nuevo sistema de justicia,
hace necesaria la formación de una policía científica o de instituciones forenses capaces de dar respuestas rápidas en la interpretación de las evidencias, capaces de crear nuevas técnicas analíticas apropiadas a nuestra realidad nacional y, sobre todo, capaces de generar profesionales dedicados ciento por ciento a la ciencia de la investigación criminal. Si bien la Ciencia Forense, y en especial la Química Forense, en nuestro país aún es una ciencia incipiente entregada principalmente a las instituciones policíacas y al Servicio Medico Legal, es posible vislumbrar un futuro auspicioso de la investigación forense en las universidades, abriendo caminos a nuevos investigadores ansiosos por expandir los límites de la Química hacia una ciencia que es pilar fundamental de la criminología y un eslabón muy importante al momento de administrar justicia y buscar la verdad. Referencias · “Manual de Química Forense”. Patricia M. Caro. Ediciones la Roca. Buenos Aires, Argentina. 2004 · Web del laboratorio Lawrence Livermore Nacional, Forensic Science Center. San Francisco, USA · Handbook of Forensic Services 2003. Manual de Laboratorio Forense del FBI. QUÍMICA FORENSE: QUÍMICA ANALITICA APLICADA A LA CRIMINOLOGIA La ciencia forense se basa en la aplicación de los métodos científicos a los procesos de la materia que se involucran con un crimen. Existen muchas ramas de la ciencia forense debido a que las ciencias en general tienen alguna aplicación en los asuntos públicos y criminales. Algunas de sus principales áreas son las siguientes: · Química · Biología · Odontología · Patología · Entomología · Psicología · Antropología La Química Forense es otra alternativa a los muchos caminos que puede seguir un químico en el ámbito de la investigación, además de ser una buena opción a la hora de hacer aportes significativos a la sociedad, donde su actuar, junto con su alto nivel de conocimiento analítico y su capacidad de manejo instrumental, es de vital importancia para descifrar las evidencias y contribuir a la búsqueda de la verdad. Uno de los principios fundamentales en los cuales se rige la Ciencia Forense y específicamente la Química Forense se basa en la premisa de que cuando dos objetos entran en contacto, habrá un intercambio entre los dos. Es decir, “cada contacto deja un rastro”, frase que popularizó Edmund Locard, padre de la Criminalística moderna, provocando así un giro en la metodología investigativa. Es por esto que el químico forense rastrea este intercambio entre materiales y trae a la luz lo que es invisible a los ojos. Basándose en sus conocimientos y en las tecnologías desarrolladas, tiene la capacidad de rastrear sustancias o huellas que éstas dejan en una escena del crimen. El químico forense, por lo tanto trabaja con sustancias no-biológicas, tales como pintura, vidrio o líquidos, Lic. Gabriela Valdebenito Zenteno Departamento de Química Inorgánica y Analítica Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas Universidad de Chile Dra. Maria E. Báez Contreras Departamento de Química Inorgánica y Analítica Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas Universidad de Chile trazas de pólvora provenientes de un disparo, todas muestras que pueden ser muy bien analizadas mediante métodos analíticos apropiados. Otro de los campos en que un químico forense puede desarrollarse es en Toxicología donde principalmente trata con muestras biológicas, orina, pelo, sangre, semen, saliva o contenido
gástrico y así poder determinar por ejemplo el nivel de alcohol o drogas que una persona ha consumido. Entender la evidencia requiere de herramientas provenientes de muchas disciplinas como la Química Analítica, la Biología, Ciencias de los Materiales y Genética. De hecho, el análisis de ADN está haciendo que el conocimiento en genética sea de mucha importancia. Con el paso del tiempo la Química Analítica ha adquirido una gran importancia en la investigación criminal, sobre todo a la hora de conocer la naturaleza intrínseca de cualquier sustancia o elemento y más aún, cuando sirve para auxiliar en la investigación científica de los delitos. Por lo tanto los químicos forenses tienes tres tareas principales: primero, analizar las evidencias en el laboratorio, luego, se interpreta la información que se saca de ellas y por último, se puede llegar a defender lo encontrado, mediante la testificación del químico forense en un juicio. Aplicaciones La Química Forense es aplicada en una gran variedad de técnicas, tanto cualitativas como cuantitativas, cuya principal finalidad es la búsqueda de respuestas provenientes de las diferentes evidencias que ayuden a la resolución de algún caso criminal. Algunos de estos análisis se detallan a continuación: · Test de drogas En la actualidad se busca presencia o ausencia de drogas, ya sea en polvos, líquidos, tabletas o cápsulas. Son pruebas cualitativas de laboratorio que se hacen uniendo un antígeno y su anticuerpo homólogo, para identificar y calificar el antígeno y anticuerpo específicos de una muestra; a éstos se les denomina inmunoensayos. El método consiste en el uso de una mezcla de anticuerpos selectivos para las distintas drogas (principios activos) y sus metabolitos, obteniendo un resultado con un alto grado de sensibilidad. · Análisis de muestras de incendios La manera en que un incendio ocurre naturalmente en una habitación indica si su comienzo fue deliberado o no, pero la evidencia es difícil de encontrar en estos casos ya que generalmente está cubierta por escombros. Habitualmente los incendios son provocados por el uso de acelerantes de la combustión, los cuales son examinados mediante Cromatografía Gaseosa, acoplada a Espectrometría de Masas, donde se pueden identificar aquellos residuos de líquidos de ignición presentes en las muestras de escombros. El químico forense debe concentrar la pequeña cantidad de muestra, mediante la adsorción del residuo de acelerante en tiras de carbón activado. Luego este concentrado es eluido desde el carbón activado disolviéndolo en un solvente adecuado, dejando la muestra de una forma apropiada para luego analizarla por medio de cromatografía. · Análisis de pisadas Los ensayos fisicoquímicos sirven en el caso de estudiar las huellas de pisadas dejadas en una escena del crimen para luego compararlas con las obtenidas desde el calzado de algún sospechoso. Mediante un procedimiento electroestático, se obtiene la muestra final sobre una matriz gelatinosa la cual contiene una capa de adhesivo que permite levantar las huellas de casi la gran mayoría de las superficies, incluyendo materiales porosos o carbónicos. Este procedimiento también puede ser usado cuando la pisada no pueda ser vista (por ejemplo en el caso de que el sospechoso se haya parado sobre una hoja de diario), ya que el polvo proveniente de la hoja de diario mostrará la impresión de la forma única de la pisada, o incluso la marca de calzado que el individuo usó. · Análisis de rastros de pintura. El rastro de pintura que queda en un accidente de auto donde el culpable huye en su vehículo, sirve para relacionarla con el vehículo sospechoso. De esta manera se puede obtener datos sobre la manufactura del vehículo y el año en el que fue fabricado. Este tipo de prueba puede ser realizada observando el espectro de absorción de la muestra de pintura u observando su composición en un Fluorómetro · Uso del agua fuerte (ácido nítrico - agua). Cada arma de fuego tiene grabado un número de serial único, el cual en algunos casos criminales son borrados o lijados para impedir el rastreo e identificación del tipo de arma y a que fabricante pertenece. Mediante el uso de la restauración química, en este caso el uso
de agua fuerte, estos números pueden volver a ser legibles nuevamente. · Análisis de residuos de disparo y balas Los residuos de las descargas de armas de fuego es otra área de investigación. Estos residuos pueden ser encontrados en las manos o en la ropa de algún sospechoso. Los químicos forenses pueden encontrar la clasificación del arma y relacionarla con el tipo de bala encontrado en una escena del crimen. Cuando un arma de fuego es disparada, se generan gases que contienen componentes incinerados y no incinerados provenientes de los casquillos de la bala y del propulsor del arma. Este material se puede depositar en la ropa de la víctima o en las manos de la persona que disparó el arma, pasando a ser un residuo. Mediante el uso de un Microscopio de Barrido Electrónico acoplado con un Espectrómetro de Energía Dispersiva, se pueden examinar las muestras recolectadas de los posibles sospechosos. Este instrumento es capaz de buscar en cientos de lugares microscópicos la presencia de pequeñas partículas del residuo. · Falsificación de documentos. Usando un aparato de detección electroestático se pueden identificar las diferentes hendiduras de la escritura en el caso de firmas falsas o alteración de documentos. En este caso al aplicar una descarga electroestática sobre la superficie del papel, causará diferentes patrones en los lugares donde están las hendiduras provocadas por la escritura. Al aplicar una carga opuesta, una tinta negra se adherirá en los lugares de las hendiduras. · Análisis cualitativo en caso de envenenamiento. En este caso se determina la molécula individual que está presente en la muestra. Con el tiempo se ha podido recolectar mucha información acerca de este tipo de sustancias, su composición, que tipo de drogas son etc. Este tipo de test se realiza generalmente por fotometría, aun cuando existen test químicos específicos para algunas sustancias. Cuando se trata de sustancias naturales venenosas, son más difíciles de identificar. Aun si la especie es identificada correctamente, existen variaciones en la cantidad de sustancia activa presente, por lo que se deben llevar a cabo estudios sobre la composición molecular y así confirmar la presencia de sustancias nocivas. · Búsqueda de huellas dactilares. La técnica más popular usada para revelar huellas dactilares es la que usa polvo de carbón activado finamente tamizado. La mayoría de los dedos de las personas son de composición grasosa y oleosa. Cuando éstos entran en contacto con cualquier superficie o material relativamente suave, la fricción suelta los aceites provenientes de las ranuras de la huella. Cuando el polvo es aplicado a la superficie, se pega a estos aceites y revela el patrón de la huella. Esta técnica es muy usada en muestras de lana, metales, vidrio o plástico. En el caso de que la huella digital esté sobre una superficie muy colorida, se usa polvo fluorescente. Cuando la superficie es expuesta a la luz ultravioleta, el polvo brillará mostrando la huella digital, sin importar el color de fondo en que se encuentre. En materiales porosos, tales como el cuero, superficies de madera o papel, la técnica preferida es el uso de polvo magnético, compuesto de partículas de hierro finamente divididas las cuales son suspendidas en la superficie mediante el uso de una barra magnética. · Detección de manchas de sangre. Todos los test usados en la detección de sangre se basan principalmente en la actividad de las enzimas peroxidasas presentes en la sangre, las cuales reaccionan con los agentes químicos causando un cambio de color. Algunas de las pruebas usadas son: el test de benzidina, de leucomalaquita verde, fenolftaleina o tetrametil benzidina. Pero uno de los más famosos es el uso del Luminol, que se utiliza en química forense para detectar trazas de sangre. Éste compuesto es un derivado del ácido ftálico que cataliza la oxidación con peróxido de hidrógeno bajo emisión de luz, es decir su mayor importancia reside en la reacción de químioluminiscencia que da con peróxidos en presencia de complejos de hierro como catalizador. · Análisis de muestras biológicas (orina, sangre o contenido gástrico) y pelo. Las muestras biológicas usadas entregan información acerca de la presencia de algún tóxico en particular, o de sus metabolitos en el organismo. Se debe tomar en cuenta los tiempos de vida media de los tóxicos, el volumen de distribución y su afinidad por los distintos
tejidos. Las muestras principales en este tipo de análisis, son la sangre, el plasma o el suero, ya que éstas distribuyen las sustancias por todo el cuerpo. En los casos de las intoxicaciones o muertes por envenenamiento, se eligen las muestras de contenido gástrico ya que pueden contener restos de comprimidos o líquidos que pueden orientar la investigación. En los órganos, como el riñón y el hígado y en la bilis, procedentes de las autopsias, se pueden encontrar grandes concentraciones de tóxicos. También en el tejido cerebral, el cual aporta información en la detección de sustancias psicoactivas que actúen en el sistema nervioso central. Para el caso en que se investigue el consumo reciente de drogas en individuos vivos, la muestras de orina son importantes ya que en ella se excretan los principios activos y/o sus metabolitos de la sustancia tóxica. El consumo crónico, en cambio, es principalmente analizado en muestras de pelo ya que éstas proveen una especie de “calendario de consumo” debido a que la sustancia tóxica no se metaboliza en el pelo. Papel de las Técnicas Analíticas. Es importante destacar el papel fundamental que cumple la analítica instrumental dentro de las técnicas mencionadas anteriormente, ya que gracias a los avances instrumentales hechos por científicos forenses es posible llegar a resultados certeros, tan necesarios a la hora de defender las metodologías y los resultados obtenidos ante la ley. Por esta razón es cada vez más importante contar con instrumentos más sensibles capaces de llegar a límites de detección más pequeños, mediante el uso de cantidades mínimas de muestra y técnicas analíticas acopladas, para poder determinar la presencia de sustancias donde en un pasado cercano se creía que no existían. Hoy en día, el desarrollo de la analítica instrumental está fuertemente orientado a la investigación de campo, donde los científicos se han volcado a la implementación de “laboratorios móviles”, que se caracterizan por el uso de equipos portátiles útiles a la hora de trabajar con sustancias inestables, perecibles o demasiado tóxicas como para llevarlas al laboratorio. Un ejemplo de este tipo de equipo es el Cromatógrafo portátil de Gases acoplado a Espectrómetro de Masas (GC-MS), donde se ha reducido el tamaño del equipo convencional de 114 kilogramos a uno de 28 kilogramos. Sin la base química necesaria, muchas de las técnicas mencionadas no podrían ser aplicadas a las Ciencias Forenses, por lo tanto es importante que el desarrollo de la Química Analítica siga avanzando y aportando a la investigación criminal. En nuestro país, la introducción de la Reforma Procesal Penal al nuevo sistema de justicia, hace necesaria la formación de una policía científica o de instituciones forenses capaces de dar respuestas rápidas en la interpretación de las evidencias, capaces de crear nuevas técnicas analíticas apropiadas a nuestra realidad nacional y, sobre todo, capaces de generar profesionales dedicados ciento por ciento a la ciencia de la investigación criminal. Si bien la Ciencia Forense, y en especial la Química Forense, en nuestro país aún es una ciencia incipiente entregada principalmente a las instituciones policíacas y al Servicio Medico Legal, es posible vislumbrar un futuro auspicioso de la investigación forense en las universidades, abriendo caminos a nuevos investigadores ansiosos por expandir los límites de la Química hacia una ciencia que es pilar fundamental de la criminología y un eslabón muy importante al momento de administrar justicia y buscar la verdad. Referencias · “Manual de Química Forense”. Patricia M. Caro. Ediciones la Roca. Buenos Aires, Argentina. 2004 · Web del laboratorio Lawrence Livermore Nacional, Forensic Science Center. San Francisco, USA · Handbook of Forensic Services 2003. Manual de Laboratorio Forense del FBI. La química es la rama de las ciencias naturales que se encarga de estudiar los elementos así como sus interacciones las transformaciones y la energía. Si bien esto es la química en general la química forense es la rama de la química que se encarga de clasificar y dosificar todos aquellos indicios relacionados con un presunto hecho delictivo.
Obviamente se presentan diversas aéreas de investigación como son hematología , sexología, toxicología etc. La hematología es el estudio de la sangre que es el único tejido líquido en el ser humano y esta compuesta de dos fracciones, la liquida y la solida, la primera conformada por agua, proteínas, lípidos, carbohidratos y sales minerales. La segunda compuesta por células que se pueden dividir en tres series a saber, roja, blanca y plaquetas. La serie roja esta compuesta por los eritrocitos que en su forma madura carecen de núcleo, tienen la función de trasportar el oxígeno y en su superficie se encuentran los antígenos que configuran el grupo sanguíneo , por tener la hemoglobina reaccionan con la peroxidasa permitiéndonos identificar la sangre. La serie blanca esta conformada por varios tipos de células cuya función esta ligada a la respuesta del organismo a la infección por lo cual poseen muchos anticuerpos y tienen la característica de ser nucleadas motivo por el cual se pueden utilizar para extraer Acido dexosi ribonucleico a diferencia de los eritrocitos que no nos sirven para esta función. Por último las plaquetas son células encargadas de proporcionar la hemostasia o sea la reparación del daño al organismo a través de la coagulación y formación de un coagulo que sella las heridas. En la figura 1 se observa la composición de la sangre con los porcentajes aproximados de cada componente y las principales células.
La hematología es el estudio de la sangre la cual puede analizarse desde el punto de vista físico, bioquímico e inmunológico. Desde el punto de vista físico podemos describir la sangre por sus características como son color, forma de escurrimiento, absorción, y adsorción características de las manchas. Esto da al criminalista mucha información puesto que puede saber si el individuo siguió vivo hacia donde camino, si el cadáver fue movido o no.
Para tal fin se basa en los diferentes tipos de manchas que pueden ser producidas por goteo que puede ser estático con manchas casi circulares o bien dinámico que por el movimiento las manchas van adquiriendo la forma de una raqueta. Por escurrimiento que generalmente son manchas lineales. Por proyección cuando se rompe una cavidad o se secciona un gran vaso y se caracterizan porque el latido del mismo produce sangrado y expulsión de un chorro de sangre. Las manchas de apoyo o contacto se producen al macularse el sujeto con sangre y tocar objetos y paredes dejando en las mismas impresiones que asemejan sus manos. Las manchas de arrastramiento se producen al movilizar un cuerpo y nos informan la dirección en la que fue desplazado . El lago hemático se caracteriza por ser una mancha de sangre uniforme que se produce al quedar mucho tiempo el sangrado por lo que se produce una mancha irregular de grandes dimensiones. En cuanto a el aspecto bioquímico tenemos que recurrir a las reacciones enzimáticas de la sangre [1]que reacciona específicamente con la peroxidasa. Basándonos en esta reacción podemos realizar pruebas de orientación de dos maneras por un lado con las leucobases como la fenoftaleina y el verde malaquita[2]así como la quimioluminicencia que al usar el luminol y la fluroceina nos permite revelar rastros de sangre. En cuanto a el aspecto inmunológico nos basamos en reacciones especificas antígeno anticuerpo . lo que nos permite identificar por un lado si la sangre encontrada es humana o no y por otro lado el tipo sanguíneo que ayuda al criminalista a incluir o excluir a un sujeto dentro de una investigación. Para obtener anticuerpos necesitamos inyectar a un animal de experimentación una pequeña dosis de sangre para posteriormente sangrar al animal y al centrifugar extraer los anticuerpos específicos.
El criminalista ante el hallazgo de sangre tiene que hacerse 4 preguntas fundamentales que son: ¿Es realmente sangre? ¿Es humana o animal? ¿A que grupo pertenece? ¿De quien es?. Con respecto a la primera pregunta todas las sangres reaccionan ante la peroxidasa por lo cual con tener una reacción positiva a esta podemos decir si es sangre o algún otro liquido de coloración roja.
Con respecto a la segunda pregunta tenemos que basarnos en las precipitinas que son anticuerpos específicos , en el caso del criminalista solo le interesa si es humana o de otro animal puesto que pudieran teóricamente hacerse reacciones para identificar la especie pero eso no le interesa al criminalista. El tipo sanguíneo esta basado en que en los eritrocitos poseemos antígenos de superficie que sirven como un marcador genético y se pueden identificar por reacciones de aglutinación.
La existencia de estos grupos sanguíneos en la practica clínica puede presentar problemas graves cuando por equivocación se pone un tipo de sangre no compatible con el paciente puede llegar a ser tan violenta la reacción que puede desencadenar desde una hemolisis o destrucción de la sangre hasta un shock anafiláctico. Se han descubierto cerca de 15 sistemas diferentes como el Dufyy Diego MN pero en la practica clínica solo se observan dos sismas principales el ABO y el RH. De manera que se puede clasificar a la gente en 8 grupos diferentes. El sistema ABO se hereda siguiendo tres reglas que son A y b son dominantes sobre O los genes están cifrados por dos alelos y pueden ser homocigotos o heterocigotos de tal manera que pueden ser puros o mezclados siendo los fenotipos A,A B,B y O,O homocigotos mientras que los A,O B,O y A,B heterocigotos.
Otro tópico muy importante dentro de la química forense son las armas de fuego dentro de lo que tenemos que estudiar como parte importante el cartucho de las mismas formado por 4 partes a saber casquillo, capsul carga de detonación y bala o ojiva. El casquillo es una pieza metálica que contiene todos los elementos del cartucho y que generalmente es de latón, acero y aluminio aunque para las escopetas puede ser de plástico. El capsul o fulminante está compuesto por un explosivo muy sensible a los golpes al calor y a la fricción que está destinado a iniciar los fenómenos de la balística interna al recibir el impacto del percutor. La carga de proyección desde los inicios de las armas de fuego estaba formada por la pólvora negra, aunque en la actualidad con mayor frecuencia se encuentran en la actualidad la pólvora blanca de doble o blancas que contienen una mezcla de nitrocelulosa, nitroglicerina y acetona. Tiene como función producir una gran cantidad de gases que producen que el proyectil sea impulsado a gran velocidad y a una distancia considerable. La bala u ojiva es un cuerpo sólido que se convierte en proyectil al ser disparada del arma de fuego y puede clasificarse por el número de elementos en un solo elemento cuando esta formada por un solo núcleo de plomo, de dos elementos cuando contienen además una mezcla de antimonio y por último de tres elementos cuando hay una camisa de zinc.
Una de las cuestiones más importantes dentro de la química forense es saber si un persona realizo un disparo recientemente o no.
Esta cuestión es facíl de contestar a través de nuestro conocimiento que en el momento del disparo se forman dos conos con gases que van a arrastrar una gran cantidad de elementos, el anterior que va a llevar la bala junto con residuos de pólvora y suciedad del canon que en el momento de hacer impacto con el cuerpo a distancias menores de 70 centímetros forman el tatuaje y el anillo de enugamiento. Por otro lado se forma el cono posterior que sobre todo cuando se trata de revólveres dejan una gran cantidad de residuos que se pueden identificar en la mano del autor de un disparo.
En química es muy fácil hacer pruebas para demostrar estos residuos en la mano del presunto culpable de disparar un arma de fuego en donde podemos encontrar niveles elevados de tres elemento químicos que son. el plomo, el bario y el antimonio que son los restos del fulminante. Para lo cual debemos tomar con una tela limpia para cada parte[3]teniendo cuidado de usar guantes y cambiarnos en cada toma para evitar la contaminación y embalar cada muestra por separado bajo cadena de custodia para evitar alteraciones de la evidencia.
COMPARACIÓN DE DOS MÉTODOS PARA DETECTAR ESPERMA Toulouse Cedes, Francia Existen dos métodos bioquímicos para probar la presencia de semen en muestras biológicas de mujeres que sufrieron ataques sexuales. La técnica que mide la actividad de la fosfatasa ácida es más fehaciente que la que detecta la presencia de zinc. Generalmente no existen testigos de las violaciones, por lo que la identificación de semen juega un papel crucial para confirmar los dichos de las víctimas. El examen médico permite recolectar evidencia física y muestras biológicas para confirmar la presencia
de esperma y condenar al violador. El hallazgo de espermatozoides es el criterio utilizado actualmente para aseverar el antecedente de relaciones sexuales. Dicha evidencia biológica es aceptada por los equipos médicos forenses, para quienes la citología es el estándar de oro, y por las autoridades judiciales. Existe una amplia variedad de métodos alternativos que ayudan al forense a pesquisar la presencia de esperma en una muestra. Científicos franceses compararon los dos métodos más simples con el fin de determinar cuál de ellos es el mejor en relación con la citología. Fueron estudiadas 174 mujeres atendidas en un centro de infertilidad masculina de Toulouse, con una edad media de 30 años. A ellas se les realizó un cuestionario mediante el cual se determinó exactamente la fecha de su última relación sexual. Luego se tomaron muestras del contenido vaginal. Todos los extendidos fueron examinados mediante citología, la cual fue elegida como prueba de referencia para confirmar la presencia de semen. La técnica que mide la actividad de la fosfatasa ácida resultó ser notablemente más efectiva que la que identifica cinc para la detección de esperma. El primer método es el más sencillo y varios trabajos han evaluado su utilización. Sin embargo, su uso en medicina forense es limitado debido a la corta vida media de la proteína. El intervalo más prolongado entre la última relación sexual y la toma de la muestra que permitió la detección de esperma mediante la fosfatasa ácida fue de 106 horas. Los autores se valieron de tiras de papel disponibles comercialmente para llevar a cabo la técnica enzimática. El material del extendido cervical es puesto en contacto directamente con la cintilla y el técnico registra el cambio de color inmediatamente. Generalmente la actividad de la fosfatasa ácida dura 48 horas. Esta prueba tiene una buena sensibilidad y especificidad. El dato estadístico más importante es que tiene un valor predictivo negativo de 98%. Por lo tanto, es valioso para pesquisar y no como confirmación. Algunas de las muestras positivas para la fosfatasa ácida con citología negativa correspondieron a hombres con azoospermia u oligospermia. Este descubrimiento promueve dudas sobre si la prueba de la fosfatasa ácida no es más sensible que la citología en dichos casos. La técnica del cinc, por el contrario, puede ser efectuada sin límites de tiempo. Para descubrir su presencia se utilizó el reactivo mejorado de Hooft. El cambio en la coloración también es leído en forma inmediata por el personal de laboratorio. Lamentablemente los resultados obtenidos por esta prueba fueron decepcionantes. Una muestra positiva para el cinc tiene apenas 50% de posibilidades de contener semen. El valor predictivo positivo es de 49% y su valor predictivo negativo es demasiado bajo para un estudio de tamizaje (84%). Hay otros exámenes que deben ser estudiados con mayor detenimiento para estimar su utilidad práctica. La medición de la colina libre es uno de ellos, aunque ésta es rápidamente degradada en el ambiente de la vagina (antes de las 24 horas). También existen métodos inmunológicos altamente especializados que pueden detectar sustancias específicas, como la isoenzima C4 de la lactato deshidrogenasa o los antígenos específicos de las vesículas seminales y de la pared de los espermatozoides. Hasta se ha desarrollado un método cromatográfico de extracción de la prostaglandina E, pero su compleja tecnología limita el uso rutinario en la medicina forense.
La conclusión de los investigadores es que la prueba de la fosfatasa ácida es útil como examen de pesquisa y puede ser utilizado en forma rutinaria por la medicina forense. Debido a su simpleza, rapidez y elevado valor predictivo negativo parece ser el método de elección para los detectives en las primeras horas luego de una denuncia de violación. La técnica del cinc, realizada tal cual está descripta en la literatura, no es satisfactoria para identificar semen.
A partir de estas muestras podemos realizar dos tipos de pruebas por un lado las cualitativas como son el Rodizononato, la prueba de Harrison y la de activación de neutrones en las que podemos afirmar la existencia de residuos. El otro tipo de pruebas son las cuantitativas que no solo nos indican la presencia o ausencia de estos elementos sino la cantidad de los mismos que se conocen como pruebas cualitativas y están representados por la absorción atómica [4]y la microscopia electrónica. Un segundo punto de interés es el de la identificación de residuos de la deflagración en las ropas para lo cual es utilizada la prueba de Walker que es una prueba colorimétrica que esta destinada a buscar residuos de nitratos ya sea alrededor de orificios de entrada o bien en las mangas y puños de la ropa de sospechosos de haber disparado un arma de fuego. Es importante que las prendas de ropa a analizar estén totalmente secas puesto que la humedad pudiera diluir los residuos y hacer poco fable la negatividad de la prueba. El resultado positivo de esta prueba indica una cercanía de 80 centímetros entre el disparo y el arma de fuego. Un tercer punto de interés es determinar si un arma fue disparada o no recientemente lo que se logra a a tráves de la prueba de Gries que consiste en la búsqueda de nitritos en el ánima del cañon de un arma . Esta es una prueba colorimétrica basada en la reacción de la alfa naftil amina y que da un color rosa cuando el resultado es positivo. Otro tema de mucho interés dentro de la química forense son los delitos sexuales puesto que este tipo de ilícitos deja profundas alteraciones psicológicas en la victima. Si bien es importante la revisión por parte del medico legista este podrá encontrar muchas alteraciones e indicios pero necesita la ayuda del químico forense para poder confirmar la certeza de sus hallazgos y en el caso necesario intentar extraer de ellos factores de individualización que permitan demostrar la inocencia o culpabilidad de un presunto delincuente. Vargas Alvarado[5]dice que en estos casos se deben buscar indicios en tres areas que para el son: el area genital, el area extragenital y el area paragenital . la primera abarca al región genital y el ano, la segunda la cara interna de los muslos, glúteos y monte de Venus y por último la tercera abarca otras zonas erógenas como son mamas y cuello.
Dentro de los indicios que se pueden encontrar podemos mencionar sangre, saliva células epiteliales de descamación pelos [6]y semen. El semen es uno de los elementos más importantes puesto que se puede estudiar mucho y es prueba irrefutable de eyaculación[7]y esta conformado para su estudio químico de dos fracciones , la primera que es la fracción celular que esta compuesta por los espermatozoides que son sus células características y que pueden no estar presentes por diversas situaciónes como son la azoespermia o oligoespermia, la vejez del sujeto y la realización de la vasectomía[8] La fracción liquida esta conformada por proteínas, sales minerales, lípidos y carbohidratos dentro de los cuales destaca la fructuosa que es un azúcar que utilizan los espermatozoides como fuente de energía. Para la identificación química del semen existen dos tipos de pruebas las presuntivas y las confirmativas dentro de las primeras tenemos la del desarrollo del color, las cristalográficas y la luz de Wood y dentro de las segundas la observación al microscopio de los espermatozoides y las inmunológicas[9] Puesto que los espermatozoides constituyen solo el 5% del semen y mueren con facilidad fuera del cuerpo y son fáciles de fragmentarse si bien su observación es una prueba irrefutable y la mas sencilla de la presencia de semen muchas veces se tiene que recurrir a otras pruebas que indican la presencia de liquido seminal y por lo tanto dan resultados mas confiables.
La fosfatasa acida es una enzima presente en abundancia en el liquido seminal desafortunadamente no es especifica de este y puede encontrarse en hígado y en secreciones vaginales motivo por el cual muchas pruebas dirigidas a demostrar su presencia pueden ser falsas como la reacción de desarrollo del color y se necesitan pruebas específicas como la proteína P-30 que reacciona específicamente con la fracción prostática de la enzima y puede identificarse por radioinmunoensayo o por inmunoelectroforesis. Otro aspecto importante dentro de la química forense son los pelos que plantean varios problemas al criminalista uno de los principales que se presentan es la identificación si se tratan de seres humanos o se tratan de un animal. A la observación microscópica podemos decir que el pelo del humano predomina la corteza sobre la medula además de que contiene dentro de esta una estructura desordenada mientras que en el pelo del animal esta tiende a ser geométrica.
La toxicología forense también es una rama de estudio de la química que se encarga de estudiar la acción de las sustancias nocivas al organismo Existen una infinidad de sustancias tóxicas que potencialmente pueden dañar al cuerpo humano pero se pueden clasificar por su origen en tres grandes grupos, en orgánicos, inorgánicos y semisinteteticos. Y a su vez podemos dividir los orgánicos en animales, vegetales todos hemos visto el ataque de un alacrán o nos ha producido alergia alguna planta que justamente produce sustancias tóxicas. En cuanto a los tóxicos inorgánicos tenemos a los metales pesados que se producen muchas veces como residuos de reacciones químicas y que contaminan el ambiente además de existir ácidos y bases fuertes que son fáciles de conseguir y se utilizan frecuentemente en suicidios.
Por ultimo tenemos los elementos semisinteticos que son una serie de sustancias producidas no de manera natural sino por el hombre y que pueden causar daño al organismo dentro de este grupo se encuentran los medicamentos y drogas .
Para la química forense es importante el estudio de sus rutas metabólicas desde que ingresa una sustancia al organismo hasta su excreción final en lo que se conoce como toxicocinetica. El primer paso de la toxicocinética es la absorción que se puede dar por vía digestiva respiratoria, cutánea parenteral y mucosa y es la vía de ingreso del tóxico al organismo.
Obviamente la vía oral es la mas frecuente porque implica la ingestión voluntaria del toxico al organismo, la vía respiratoria se refiere a ciertos gases que penetran al organismo a través de esta vía, la cutánea a algunos tóxicos que se absorben por la pié, la parenteral puede estar relacionada mas bien con el ataque de algunos animales que inyectan su ponzoña o bien la administración de medicamentos y por último la via mucosa esta relacionada con la inhalación de algunas sustancias o bien el uso de medicamentos que se aplican utilizando la ventaja de la rapidez de absorción de algunas mucosas como es el caso de los supositorios. La distribución esta relacionada con el paso de la sustancia al torrente sanguíneo o a los órganos blanco donde actúa y se deposita. La biotranformación tiene como objeto eliminar el tóxico o por lo menos hacerlo menos toxico lo cual se logra en dos fases la de oxidación reducción e hidrólisis y la de conjugación . Este fenómeno se desarrolla principalmente en el hígado pero otros tóxicos pueden actuar a nivel de otros órganos como son el riñón, pulmón. Intestino y cerebro. Por ultimo tenemos la excreción o eliminación de los tóxicos que puede ser a través de varios órganos como el pulmón para eliminar los anestésicos volátiles, la bilis para las sustancias liposolubles y el riñón para sustancias solubles en agua.
Esto tiene mucha importancia en la medicina forense puesto que al hacer una autopsia de una persona que murió por intoxicación y sabiendo cual es la toxicocinetica del producto que empleo sabemos que órganos deberían de estar dañados y por lo cual tomar las muestras correspondientes con el objetivo de comprobar por medios químicos nuestra sospecha.
Las muestras mas útiles pueden ser sangre porque en ella es distribuido el toxico. Orina porque conserva mas fiablemente las concentraciónes del toxico y al ser una via de excreción nos permite obtener trazas del tóxico antes de ser eliminado. El humor vítreo localizado en los ojos al ser un punto alejado de la circulación
general además de ser muy fácil de obtener en la autopsia puncionando el ojo con una simple jeringuilla. El hígado como dijimos anteriormente es el centro principal de la biotranformación por la gran cantidad de enzimas y la estructura que posee además de que en cadáveres en estado de putrefacción es útil para análisis toxicológico. En el estomago se pueden encontrar restos del toxico cuando se ingirió el mismo y se pueden encontrar tabletas parcialmente disueltas en el caso de suicidio.
COMPARACIÓN DE DOS MÉTODOS PARA DETECTAR ESPERMA Toulouse Cedes, Francia Existen dos métodos bioquímicos para probar la presencia de semen en muestras biológicas de mujeres que sufrieron ataques sexuales. La técnica que mide la actividad de la fosfatasa ácida es más fehaciente que la que detecta la presencia de zinc. Generalmente no existen testigos de las violaciones, por lo que la identificación de semen juega un papel crucial para confirmar los dichos de las víctimas. El examen médico permite recolectar evidencia física y muestras biológicas para confirmar la presencia de esperma y condenar al violador. El hallazgo de espermatozoides es el criterio utilizado actualmente para aseverar el antecedente de relaciones sexuales. Dicha evidencia biológica es aceptada por los equipos médicos forenses, para quienes la citología es el estándar de oro, y por las autoridades judiciales. Existe una amplia variedad de métodos alternativos que ayudan al forense a pesquisar la presencia de esperma en una muestra. Científicos franceses compararon los dos métodos más simples con el fin de determinar cuál de ellos es el mejor en relación con la citología. Fueron estudiadas 174 mujeres atendidas en un centro de infertilidad masculina de Toulouse, con una edad media de 30 años. A ellas se les realizó un cuestionario mediante el cual se determinó exactamente la fecha de su última relación sexual. Luego se tomaron muestras del contenido vaginal. Todos los extendidos fueron examinados mediante citología, la cual fue elegida como prueba de referencia para confirmar la presencia de semen. La técnica que mide la actividad de la fosfatasa ácida resultó ser notablemente más efectiva que la que identifica cinc para la detección de esperma. El primer método es el más sencillo y varios trabajos han evaluado su utilización. Sin embargo, su uso en medicina forense es limitado debido a la corta vida media de la proteína. El intervalo más prolongado entre la última relación sexual y la toma de la muestra que permitió la detección de esperma mediante la fosfatasa ácida fue de 106 horas. Los autores se valieron de tiras de papel disponibles comercialmente para llevar a cabo la técnica enzimática. El material del extendido cervical es puesto en contacto directamente con la cintilla y el técnico registra el cambio de color inmediatamente. Generalmente la actividad de la fosfatasa ácida dura 48 horas. Esta prueba tiene una buena sensibilidad y especificidad. El dato estadístico más importante es que tiene un valor predictivo negativo de 98%. Por lo tanto, es valioso para pesquisar y no como confirmación. Algunas de las muestras positivas para la fosfatasa ácida con citología negativa correspondieron a hombres con azoospermia u oligospermia. Este descubrimiento promueve dudas sobre si la prueba de la fosfatasa ácida no es más sensible que la citología en dichos casos. La técnica del cinc, por el contrario, puede ser efectuada sin límites de tiempo. Para descubrir su presencia se utilizó el reactivo mejorado de Hooft. El cambio en la coloración también es leído en forma inmediata por el personal de laboratorio. Lamentablemente los resultados obtenidos por esta prueba fueron decepcionantes. Una muestra positiva para el cinc tiene apenas 50% de posibilidades de contener semen. El valor predictivo positivo es de 49% y su valor predictivo negativo es demasiado bajo para un estudio de tamizaje (84%).
Hay otros exámenes que deben ser estudiados con mayor detenimiento para estimar su utilidad práctica. La medición de la colina libre es uno de ellos, aunque ésta es rápidamente degradada en el ambiente de la vagina (antes de las 24 horas). También existen métodos inmunológicos altamente especializados que pueden detectar sustancias específicas, como la isoenzima C4 de la lactato deshidrogenasa o los antígenos específicos de las vesículas seminales y de la pared de los espermatozoides. Hasta se ha desarrollado un método cromatográfico de extracción de la prostaglandina E, pero su compleja tecnología limita el uso rutinario en la medicina forense. La conclusión de los investigadores es que la prueba de la fosfatasa ácida es útil como examen de pesquisa y puede ser utilizado en forma rutinaria por la medicina forense. Debido a su simpleza, rapidez y elevado valor predictivo negativo parece ser el método de elección para los detectives en las primeras horas luego de una denuncia de violación. La técnica del cinc, realizada tal cual está descripta en la literatura, no es satisfactoria para identificar semen.
GENÉTICA FORENSE: ASPECTOS CIENTÍFICOS, ÉTICOS Y LEGALES I. INTRODUCCIÓN
La Genética forense consiste en el análisis del polimorfismo o variabilidad genética humana aplicada a los problemas judiciales. Estos pueden ser: ·
Investigación de la paternidad: Impugnación por parte del supuesto padre o reclamación por parte de la madre y/o del hijo.
·
Criminalística: Asesinato y delitos sexuales (violación). Se analizan restos orgánicos humanos (sangre, pelo, saliva, esperma, piel).
·
Identificación: Restos cadavéricos (por ejemplo, los restos del zar Nicolás II de Rusia y su familia) o personas desaparecidas (como sucedió en Argentina con los niños desaparecidos durante la dictadura militar).
El contenido del presente texto está basado mayoritariamente en las publicaciones de Carracedo (1995), Guillén y col. (1998) y Choclán (1998) indicados en la bibliografía.
II.
ASPECTOS CIENTÍFICOS 1. ¿QUÉ ADN SE ANALIZA? ADN cromosómico (genómico): ADN repetido en tandem o VNTR (acrónimo inglés por Variable Number of Tandem Repeats), que puede ser: ·
Minisatélite o MVR (minisatellite variant repeats): secuencia de unas 30 pb (pares de bases).
·
Microsatélite o STR (short tandem repeats): secuencia de 2 a 6 pb, normalmente 4. Por ejemplo, la secuencia ACTTACTTACTT ... ACTT puede aparecer repetida 8 veces en un locus y 12 veces en otro locus. Así, un individuo puede ser homocigoto 8-8, heterocigoto 8-12 u homocigoto 12-12.
ADN mitocondrial (ADN mt): Presenta herencia materna y es más estable que el ADN cromosómico. Se suelen analizar dos regiones hipervariables del “lazo D”. Polimorfismo del cromosoma Y: Se analizan microsatélites (STRs) y el polimorfismo de nucleótidos simples (SNPs). 2. ANÁLISIS DEL POLIMORFISMO ·
Análisis de ADN minisatélite mediante sondas: Se identifican como polimorfismos basados en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLPs) -
Sondas multilocus: La historia de las aplicaciones forenses de los polimorfismos de ADN se inició en 1984 cuando Weller y colaboradores descubrieron en un intrón del gen humano
de la mioglobina la existencia de una región hipervariable constituida por cuatro repeticiones en tandem de una secuencia de 33 pares de bases (minisatélite). Al año siguiente, Jeffreys y colaboradores (1985 a) encontraron que dicha región hipervariable aparecía con ligeras modificaciones en otros genes, diseñando sondas de ADN (sondas multilocus) que permitían identificar simultáneamente muchas de dichas regiones hipervariables. Este hecho les llevó a pensar que dichos patrones de minisatélites multilocus detectables por la sonda serían característicos de cada individuo, constituyendo algo así como su “huella dactilar de ADN” (DNA fingerprint) (Jeffreys y col., 1985 b). Sin embargo, debido a la dificultad de estandarización de la técnica y de la creación de bases de datos, así como a los problemas de interpretación bioestadística de los resultados, esta metodología tuvo una escasa utilización. -
Sondas de locus único (SLPs, single locus probes): La técnica permite detectar loci minisatélites únicos bajo condiciones de hibridación molecular muy restrictivas. Se utiliza principalmente en investigaciones de paternidad porque identifica loci minisatélites muy informativos. Para validar estas técnicas fue necesario estandarizar las enzimas de restricción utilizadas para fragmentar el ADN (en Europa se eligió en principio la enzima Hinf I), así como las sondas que reconocen los loci minisatélites muy variables (con más del 90% de heterocigosis). Los individuos se caracterizan por el tamaño de los RFLPs y no por el número de repeticiones.
·
Análisis de polimorfismos de ADN mediante PCR (reacción en cadena de la polimerasa):
Es una técnica muy usada en criminalística porque se puede realizar a partir de cantidades muy pequeñas de ADN de la muestra (restos de sangre, semen, etc.) o por la propia degradación del ADN (restos cadavéricos). Aunque se han utilizado polimorfismos del locus HLA o minisatélites, sin embargo el método PCR se aplica especialmente utilizando microsatélites (STRs). Por ejemplo, utilizando simultáneamente cuatro microsatélites de cuatro bases se consigue un poder de discriminación superior al 99,9 %. ·
Otras aplicaciones forenses de la PCR La técnica de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se utiliza también en la determinación del sexo a partir de muestras de ADN, amplificando loci específicos de los cromosomas sexuales X o Y (por ejemplo, el gen de la amelogenina). El análisis del ADN mitocondrial (ADNmt) es especialmente útil en aquellos casos en los que solamente se disponga de restos óseos muy antiguos y deteriorados. Como el ADNmt se transmite sólo por vía materna, puede ser utilizado cuando se trate de investigar en la reconstrucción de linajes. Por ejemplo, tal es el caso del estudio de niños de padres desaparecidos al comparar el ADNmt de los niños con los de sus presuntos abuelos, tal como ocurrió en muchos casos ocurridos durante la dictadura militar argentina (Orrego y col., 1990). Fue especialmente notable la identificación llevada a cabo en 1994 de los restos óseos de la familia del último zar de Rusia (Nicolás II, su mujer Alexandra y tres hijos) encontrados en una cueva a 35 Km de Ekaterinburgo y que habían sido asesinados el 16 de Julio de 1918 (Gill y col., 1994). Incluso se manejó como muestra comparativa la del ADNmt del actual Duque de Edim-
burgo (esposo de la reina Isabel de Inglaterra) emparentado con la familia imperial rusa por vía materna (bisnieto de la madre de la zarina Alejandra). Su ADNmt era idéntico al de los supuestos restos de la zarina y sus tres hijos. El análisis genético realizado por Gill y colaboradores utilizó 5 repeticiones cortas en tandem (STR), 2 regiones hipervariables del ADNmt y la determinación del sexo de los huesos utilizando el análisis del gen de la amelogenina. Los resultados científicos fueron congruentes con los datos históricos de que la familia imperial (el zar Nicolás II, la zarina Alexandra y tres hijos) fue asesinada junto con tres sirvientes y el médico de la familia. III.
ASPECTOS ÉTICOS Y LEGALES 1. EL VALOR DE LA PRUEBA EN LA INVESTIGACIÓN DE PATERNIDAD (basado en Castellano, 1995)
Por reclamación de la paternidad se entiende la acción de reivindicar la paternidad biológica de un hombre determinado para un niño nacido de una mujer concreta. Por impugnación de la paternidad se entiende la acción interpuesta por un hombre encaminada a rechazar o rebatir su paternidad biológica con respecto a un niño; paternidad que, hasta ese momento, era tenida por legítima. Se indican a continuación algunas características generales en relación con las pruebas de paternidad: ·
La Constitución Española reconoce la posibilidad de la investigación de la paternidad (art. 39.2).
·
El Código Civil español (Art. 127, Título V “De la paternidad y la filiación”) dice que
“En los juicios sobre filiación será admisible la investigación de la paternidad y de la maternidad mediante toda clase de pruebas, incluidas las biológicas. El Juez no admitirá la demanda si con ella no se presenta un principio de prueba de los hechos en que se funde.” ·
Según el Tribunal Constitucional (Sentencia del 17 de enero de 1994), “el demandado en un proceso de filiación (...) sólo podría legítimamente negarse a unas pruebas biológicas si no existieran indicios serios de la conducta que se le atribuye o pudiera existir un gravísimo quebranto de su salud.”
·
Cuando el interesado no otorga el consentimiento, la decisión judicial que disponga la pericia genética en contra de su voluntad deberá valorarse en función de los derechos fundamentales siguientes: el derecho a la integridad física, el derecho a no declarar contra sí mismo ( a no declararse culpable) y el derecho a la intimidad
·
No obstante lo indicado en el párrafo anterior, la negativa a someterse a la prueba puede ser interpretada por el juez como certeza de paternidad. Así ha sido considerado por el Tribunal Constitucional que ha sostenido la obligatoriedad de someterse a las pruebas, las cuales “no atentan contra el derecho a la intimidad y a la integridad física” (STC de 20 de diciembre de 1993).
·
Ante la negativa a la prueba, la Sentencia del Tribunal Constitucional STC 7/1994 establece que los derechos del hijo, la madre y la sociedad priman sobre el derecho a la integridad física que pudiera suponer la toma de muestra.
·
La investigación biológica de la paternidad se basa en que todo el patrimonio biológico presente en un individuo procede a
partes iguales de su padre y de su madre a través de la información genética contenida en los gametos masculino y femenino, respectivamente. Por tanto, la constitución genética (genotipo) de un individuo debe ser explicada en términos de las leyes genéticas de la herencia. ·
La exclusión directa de la paternidad hace referencia a que cuando un niño tiene una información genética que no tiene la madre ni el presunto padre, éste debe ser excluido como padre biológico del niño.
·
Asimismo, se produce la exclusión directa de la paternidad cuando a un individuo homocigoto para un gen de un locus determinado se le atribuye la paternidad biológica de un hijo que sea homocigoto para otro alelo del mismo locus.
·
La probabilidad de exclusión a priori es la probabilidad de demostrar la “no paternidad” de un hombre falsamente implicado en una paternidad biológica a través del estudio de diversos marcadores genéticos en los tres protagonistas: la madre, el hijo y el presunto padre. La probabilidad de exclusión a priori de cada marcador depende de su polimorfismo y de su distribución en la población general. Para una distribución de las frecuencias de marcadores moleculares genéticos en la población española ver Castellano (1991). Cuando el resultado de los análisis realizados nos dice que la probabilidad de exclusión a priori es del 99,9 % esto significa que si se realizaran 1.000 pruebas de paternidad de falsos padres, en 999 se demostraría la exclusión y solamente en un caso de esos mil el falso padre no sería excluido.
·
La probabilidad de la paternidad debe calcularse cuando, tras realizar los oportunos análisis, no se ha producido la exclusión del presunto padre. Esto sucede cuando todos los marcadores genéticos presentes en el niño están presentes en su madre o en el supuesto padre, lo cual significa que ha podido
ser él quien los ha transmitido. La probabilidad de paternidad indicará cuál es la probabilidad de que ese hombre sea realmente el padre del niño. El cálculo de la probabilidad viene dado por la fórmula W = (X / X+Y) .100 donde X es la probabilidad que tiene el presunto padre de transmitir un marcador genético del que es portador y que está presente en el niño, mientras que Y es la frecuencia con que dicho marcador está en la población general El valor obtenido W representa la probabilidad de que el hombre en cuestión sea el verdadero padre del niño. En temas de paternidad para los peritos genéticos los porcentajes de probabilidad se transforman en predicados verbales, tal como se indica a continuación: 99,8-99,9 % : “paternidad prácticamente probada” 99,0-99,7 % : “paternidad extremadamente probable” 95,0-98,9 % : “paternidad muy probable” 90,0-94,9 % : “paternidad probable” 80,0-89,9 % : “cierta insinuación de paternidad” menos de 80% : “paternidad despreciable o no útil” ¿Qué nivel de probabilidad aceptaría un juez para dar por concluyente la prueba? 2.
EL VALOR DE LA PRUEBA DE ADN EN LA INVESTIGACIÓN CRIMINAL
Es obvio que el mayor valor de la prueba de ADN dependerá del número de polimorfismos analizados. Una vez obtenidos los resultados se comparan con los datos genéticos del supuesto agresor (restos orgánicos encontrados en la víctima) o de la víctima (manchas de sangre halladas sobre el supuesto agresor), estableciéndose las siguientes conclusiones:
·
Si los patrones comparados son diferentes, el supuesto agresor es inocente.
·
Si los patrones comparados coinciden, entonces hay que valorar la probabilidad de que las muestras analizadas pertenezcan al presunto agresor habida cuenta de las frecuencias de tales polimorfismos en la población a la que pertenece. Por ejemplo, tendría poco valor probatorio si se utilizara como elemento genético de comparación el hecho de que el resto de sangre del agresor en la víctima y la sangre del sospechoso pertenecieran al mismo grupo sanguíneo, cuya frecuencia en la población fuera, por ejemplo, del 40%.
·
Suponiendo la coincidencia en las muestras tomadas de la víctima y del supuesto agresor de los perfiles genéticos de los polimorfismos analizados y que la frecuencia de encontrar en la población un individuo con dicho perfil genético fuera de un 1%, la valoración biológica de la prueba puede dar lugar a lo que se conoce como “falacia del fiscal” y “falacia de la defensa”:
·
-
El fiscal argumentaría que el sospechoso tiene una probabilidad del 99% de ser el agresor
-
La defensa argumentaría que si en la ciudad donde se cometió el crimen había un cierto número de personas (por ejemplo 100.000) potencialmente capaces de haber cometido el crimen atendiendo a sus características de edad, sexo, etc., entonces el 1% de las mismas (es decir, 1000) podían ser el criminal. Por consiguiente, según la defensa del acusado, 1/1000 sería una probabilidad muy pequeña para declarar culpable al sospechoso.
Dados los razonamientos anteriores, el análisis bayesiano sería el modo correcto de valorar la prueba; es decir, calcular la probabilidad condicional de un suceso aplicando el teorema
de Bayes que permite calcular el valor de una probabilidad teniendo en cuenta datos previos: El juez debería valorar de forma objetiva la prueba científica multiplicando su grado de creencia previa sobre la culpabilidad del acusado, expresado en forma de apuesta (5 a 1 a favor de su inocencia, 10 a 1 a favor de su culpabilidad) por un factor (“razón de verosimilitud”, LR, o “likelihood ratio” ) que el perito genético debe proporcionar al juez y que puede denominarse “razón bayesiana de probabilidad”, cuyo valor es: LR = P(E/C) / P(E/I) Es decir, LR es igual al cociente entre la probabilidad del hallazgo científico E, dada la culpabilidad C y la probabilidad del hallazgo científico E, dada la inocencia I. En el ejemplo que se ponía en el apartado anterior, el valor de LR sería 1/0,01 = 100; es decir, la probabilidad de culpabilidad del sospechoso (en opinión del juez) expresada en forma de apuesta se habría multiplicado por cien. En la tabla siguiente, a modo de ejemplo, se incluyen las comparaciones entre las probabilidades a priori de culpabilidad basadas en otras pruebas judiciales y las probabilidades a posteriori después de aplicar la prueba del ADN, suponiendo que LR = 100: Probabilidad a priori Probabilidad a posteriori de culpabilidad de culpabilidad (basa(después de la prueba de ADN)
da en otras pruebas judiciales) 1.000 a 1 en contra (1/1.000)
10 a 1 en contra
100 a 1 en contra (1/100)
1 a 1 (igual a favor que en contra)
10 a 1 en contra (1/10)
10 a 1 a favor
5 a 1 en contra (1/5)
20 a 1 a favor
1 a 1 (igual a favor que en contra)
100 a 1 a favor
5 a 1 a favor
500 a 1 a favor
10 a 1 a favor
1.000 a 1 a favor
100 a 1 a favor
10.000 a 1 a favor
1.000 a 1 a favor
100.000 a 1 a favor
Es decir, si por las otras pruebas que posee, el juez considera que el acusado es inocente con una probabilidad de 1.000 a 1, después de la prueba de ADN del caso anterior (LR = 100) el acusado sigue teniendo más probabilidad de ser inocente que culpable (10 a 1 contra su culpabilidad, o sea a favor de su inocencia). Si por las pruebas judiciales practicadas el juez duda a partes iguales entre inocencia y culpabilidad, después de la prueba del ADN podrá inclinarse objetivamente 100 contra 1 a favor de la culpabilidad del sospechoso. ·
Finalmente, es necesario poner de manifiesto la importancia de la población de referencia. El perito genético debe escoger la población del entorno del caso, que normalmente coincide con un grupo poblacional concreto.
3. LA PRUEBA DE ADN EN LOS TRIBUNALES DE JUSTICIA La utilización de la prueba de ADN en los tribunales de justicia plantea una serie de problemas generales tales como:
·
Difícil comprensión del significado de la prueba pericial genética por parte de los juristas (jueces y abogados)
·
Posibilidad de caer en la falacia del fiscal o en la falacia de la defensa
·
La comunicación de los resultados por el perito en el juicio oral es enormemente importante, siendo preciso dejar claros tres principios:
·
-
Para calcular el valor de una prueba científica es necesario considerar (al menos) dos explicaciones para su ocurrencia
-
La prueba de debe evaluar calculando su probabilidad bajo cada una de las explicaciones alternativas
-
El valor de la prueba en relación con una de las explicaciones es la probabilidad de su ocurrencia dada esa explicación, dividida por la probabilidad de su ocurrencia dada la explicación alternativa (razón bayesiana de probabilidad referida en el apartado anterior (LR, likelihood ratio)
Para paliar las dificultades de entendimiento, muchos peritos utilizan explicaciones semánticas de la probabilidad obtenida en forma de predicados verbales de forma similar a las pruebas de paternidad. En Europa la escala de predicados verbales más utilizada en criminalística es la de Ewett (1987).
4. LAS BASES DE DATOS DE ADN CON FINES DE INVESTIGACIÓN CRIMINAL (basado en Guillén y col. 1998) El establecimiento de bases de datos genéticos y su regulación legal en Europa es muy variable de unos países a otros. Por ejemplo, en el Reino Unido, que es el más permisivo se están introduciendo a un ritmo de un millón / año, hasta alcanzar los cinco millones de individuos, mientras que otros países, como Holanda, solamente se incluyen los datos de individuos que hayan cometido delitos importantes contra las personas. Aquí habría que recordar que, dado que muchos de los criminales que producen delitos
de violación son reincidentes, el disponer de un archivo policial de su ADN permitiría esclarecer los posibles nuevos delitos. La creación de las bases de datos de ADN a nivel nacional puede plantearse bajo las siguientes perspectivas: ·
Bases de datos de ADN realizados a nivel general poblacional Según algunos autores y sentencias de tribunales, este planteamiento podría afectar al derecho a la intimidad, la dignidad de la persona, el derecho a la integridad física y moral, el derecho a no declarar contra sí mismo, a la presunción de inocencia, al derecho a la salud y el derecho a la libertad
·
Bases de datos restringidas por la vinculación del sujeto pasivo con el delito, por razón del propio delito investigado y por el tiempo de conservación de los análisis Basado en el principio de proporcionalidad, se considera necesario que haya un grado de vinculación entre el delito investigado y el sujeto a quien se va a hacer la prueba. Un segundo criterio delimitador es la determinación de un “catálogo de delitos” que permita realizar la prueba de ADN incluso sin consentimiento del sospechoso. Ante el problema de la prescripción del delito y de la pena, será necesario plantear si los análisis de las muestras se conservan de manera indefinida o si deben ser suprimidas.
