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BIOQUÍMICA REACCIONES DE EDMAN
Jorge Andrés Espinoza
Se utiliza para determinar la secuencia de péptidos, es decir, en que orden se encuentran unidos los aminoácidos de una proteína Además sirve para separar el amino terminal del péptido, dejando intacto el resto de la cadena polipeptídica Puede determinar la secuencia de hasta unos 25 aminoácidos, ya que cuando se acumulan residuos estos interfieren en la reacción
La reacción de Edman es una reacción de grupo amino y se da en 3 pasos que son: Paso 1: Primero el Fenilisotiocianuro o también conocido como Reactivo de Edman reacciona con el grupo N- terminal de un polipéptido, en un medio alcalino débil, consecuentemente produce un feniltiocarbamil que se deriva del aminoácido. Paso 2: Este derivado se trata posteriormente con un acido anhidro fuerte (Trifluroacético) , causante de la ruptura entre los residuos Paso 3: El derivado del residuo N-terminal se reagrupa a continuación para dar un derivado de feniltiohidantoína del aminoácido. En conclusión con esta reacción puede separarse el grupo N-Terminal del resto del péptido que queda intacto. Esta serie de reacción puede repetirse teóricamente hasta que se haya determinado la secuencia completa de la cadena polipeptidica, en condiciones favorables solamente puede darse hasta para 25 aminoácidos aproximadamente, ya que despues de este ciclo las impurezas del mismo, impiden que se sigan dando más reacciones.
Esta reacción se evidencia en el laboratorio mediante la técnica de la cromatografía, método el cual consiste en separar moléculas relativamente pequeñas, para determinar la composición los distintos componentes permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Al colocar el reactivo de Edman cuando existe la formación de una sustancia azul violácea existe la presencia de aminoácidos, en cambio al no mostrar ninguna coloración quiere decir que hay ausencia de aminoácidos.
HERRERA, E. Bioquímica 1ª Edición España Interamericana, S. A. 1986 HORTON, MORAN, OCHS, RAWN, SCRIMGEOUR. Bioquímica 1ª Edición México Prentice Hall Hispanoamericana, S.A. 1995 S.A. (2007) : Propiedades químicas de las proteínas .05/05/2007. s.l.. Consultado el: 21/04/2010. Disponible en:http://www.doschivos.com/trabajos/biologia/88.htm