ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS. INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL
Siembra de Pleurotus ostreatus.
Catedra:
Biotecnología Biotecnología Ambiental.
Integrantes:
Fecha:
Erika Erazo
2466
Johana Paredes
2405
David Cárdenas
2406
Richard Esparza
2476
Edwin Silva
2386
27 de noviembre de 2017
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1. Objetivos 1.1. General
Preparar agar sabouraud mediante la técnica impartida por el técnico docente para la siembra de micelio Pleorotus ostreatus.
1.2. Específico
Conocer las reglas que dispone el laboratorio mediante la explicación del técnico docente para proporcionar información sobre la preparación de agar sabouraud.
Realizar los respectivos cálculos mediante la técnica de preparación de medios de cultivo sólidos para la preparación de las placas.
Observar las características de crecimiento del micelio Pleorotus ostreatus en medio agar sabouraud.
2. Marco teórico 2.1. Pleurotus ostreatus
Es un hongo saprofítico o parásito débil, descomponedor del grupo de la podredumbre blanca que crece de forma natural en árboles como aliso, balso y arce, principalmente en los valles de los ríos. La palabra Pleurotus viene del griego “pleuro”, que significa formado lateralmente o en posición lateral, refiriéndose a la posición del estípite respecto al píleo. La palabra ostreatus en latín quiere decir en forma de ostra y en este caso se refiere a la apariencia y al color del cuerpo fructífero. (Alfredo, 2009)
Es las características de la seta Pleurotus ostreatus que ya describimos entonces. Se trata de un hongo que, en su ambiente natural, crece sobre árboles, tocones, arbustos y otras plantas leñosas, alimentándose a costa de su madera y destruyéndola. El sombrerillo, o parte superior de la seta, es redondeado, con la superficie lisa, abombada y convexa cuando es joven, aplanándose luego poco a poco. El borde está algo enrollado al principio. El tamaño depende de la edad, oscilando de 5 a 15 centímetros de diámetro, aunque pueden encontrarse ejemplares mucho más grandes. El color es muy variable, desde gris claro 0 gris pizarra hasta pardo; con el paso del tiempo el color va palideciendo hasta tomar un tono amarillo sucio. (Ruiz, 2012) Pleurotus ostreatus es un típico hongo agarical, que a menudo se encuentra recubierto de una capa micelial en la base y presenta carne delgada y blanca. El píleo cuando madura
adquiere forma de concha, las láminas son blancas o de color crema en las cuales se disponen los basidios no tabicados con cuatro basiodiosporas blanquecinas elípticas de 8 11 x 3-4 mm. El píleo es de superficie lisa, brillante y un poco viscosa en tiempo húmedo. El estí pite es corto de 1-4 x 1- 2 cm, las lámelas son blancas, decurrentes y ampliamente espaciadas y las esporas en masa son blanquecinas o de color gris-blanquecino. Pleurotus ostreatus posee un píleo regularmente de 4 a 13 cm de diámetro, aunque ocasionalmente puede presentar tamaños mayores de acuerdo a las condiciones de fructificación. La superficie superior puede presentar color variable según la intensidad de la luz, con tonos entre blanquecinos, grises o azulados. Su margen es suave, delgado, ondulado y ocasionalmente enrollado. (Mushiberica, 2015)
El contenido nutricional de Pleurotus ostreatus presenta un alto valor nutritivo pues contiene minerales, vitaminas y proteínas. Igualmente presenta un sabor agradable que hace que sea apetecible en muchas regiones del mundo. Por su alto conteni do proteínico, a este hongo se le llama "bistec vegetal", su proteína es asimilable y además presenta buenas características organolépticas. Este hongo posee bajo contenido de grasa y sodio, unido al relativamente alto contenido de potasio, lo cual hace que tenga también importancia para padecimientos cardiovasculares y estados de hipertensión, así como para combatir la obesidad. En él están presente todos los aminoácidos esenciales, e s una rica fuente de vitaminas y se han reportado contenidos de ácido absórbico (vitamina C) en diferentes etapas de su desarrollo. Es rico en ergosterol y vitamina D, así como en minerales como fósforo, sodio, magnesio, calcio, hierro, manganeso, zinc y cobre. (Soca, 2016)
2.2 Etapas del cultivo de Pleurotus ostreatus
El cultivo del hongo Pleurotus ostreatus posee las mismas etapas que las del cultivo de hongos comestibles en bloques estériles, pero se diferencia básicamente en las etapas de incubación y fructificación, puesto que se hace necesario adecuar las condiciones ambientales del cuarto de producción, permitiendo simular sus condiciones de crecimiento en la naturaleza. 2.3. Condiciones de Incubación
La incubación tarda de 22 a 30 días y es necesario que la temperatura en el sitio de incubación permanezca de 23 a 24 ºC. El área de incubación debe ser un lugar oscuro, fresco y cerrado para mantener una humedad relativa de 70 a 80%. (Castro, 2016)
2.4. Condiciones de fructificación
Se aumenta la humedad relativa de un 80 a 93% para inducir la formación de los cuerpos fructíferos. Esta etapa se puede realizar en el mismo cuarto de incubación, si todas las bolsas están cubiertas por el micelio, de lo contrario debe destinarse un cuarto para esta etapa. Así mismo, se debe manejar una temperatura de16-18ºC.
2.5. Sustratos utilizados para el cultivo de Pleurotus ostreatus
Se han utilizado una gran cantidad de sustratos para el cultivo de Pleurotus ostreatus. Los materiales más comúnmente utilizados como fuente de carbono incluyen paja de trigo, de avena, de centeno, de sorgo y de al godón, virutas de madera y cortezas, subproductos del algodón, heno, tallos de plantas de maíz, plantas y desperdicios de café, tusa de mazorca, hojas de té, cáscaras de maní, harina de soya, cáscaras de semillas de girasol, desperdicios de alcaucil, desperdicios de yuca, agave, residuos de la industria papelera (diarios, cartones), hojas de plátano, cactus, yuca, pulpa de cardamomo, fibra de coco, hojas de limón, tallos de menta, paja de arroz, bagazo de caña, entre otros. También se pueden realizar cultivos sobre bloques o troncos sintéticos. Las ventajas principales de utilizar estos sustratos en lugar de la producción en troncos naturales, es que los tiempos se acortan y la eficiencia aumenta. Las eficiencias biológicas varían de 75 a 125 % en troncos sintéticos. (ROLLAN, 2014)
3. Resultados
3.3.Se obtuvieron 6 cajas petri de medio con Agar Sabouraud, en total, de las cuales en las 6 si se desarrolló el Pleurotus ostreatus, pero no por completo, iniciando tan solo la primera etapa de desarrollo del hongo; en 2 cajas petri había contaminación por otro microrganismo que se lo identifico como levadura por su elavacion convexa, brillante y un color amarillo intenso de superficie lisa, inhibiendo el desarrollo del Pleurotus ostreatus. 3.4.En cuanto a la morfología de lo que se pudo obtener del Pleurotus ostreatus, presentaron una trama completamente irregular de forma irregular, conformados
por hifas de pared delgada y en alguna gruesa. Esporada de color blanco puro o color crema más frecuentemente pálido. Esporas hialinas, lisas de pequeñas a largas.
4. Discusión
Los resultados obtenidos muestran que las cajas Petri presentan la formación de colonias separadas del hongo Pleurotus ostreatus perteneciente al filo de los basidiomicetos, el cual se halla compuesto por hifas que en conjunto forma micelios visibles a simple vista en las cajas Petri, los cuales se muestran como una masa algodonosa de color blanco y filamentosa, la cual es producto de la ramificación y entrecruzamiento de hifas. Como medio de soporte para el hongo se empleó Agar Sabouraud, el cual al ser preparado en cajas Petri es un medio sólido y selectivo que provee de los nutrientes necesarios al hongo y permiten su crecimiento optimo, además dicho medio contiene agentes que inhibe el crecimiento de microorganismos que no se quiere estudiar. Las seis cajas sembradas reportaron poca acumulación de micelio, esto debido a que la muestra escogida fue una semilla semidesnuda y también a la repartición no equitativa del medio de cultivo Agar Sabouraud dentro de las cajas Petri. De las seis cajas sembradas con el inoculo dos de ellas presentaron contaminación debido a la presencia de colonias ajenas a la muestra del hongo, se trata de levaduras debido a las características morfológicas que presenta la misma, esta contaminación es producto a que dicha caja con el medio fue alejada del radio de esterilidad durante la siembra y como los microorganismos se encuentran en todos lados es decir son ubicuos se produjo la contaminación. 5. Conclusiones
• Finalmente se ha preparado el agar saboread para la siembra del micelio pleorotus ostreatus a través de la técnica impartida permitiendo reconocer que este medio es muy recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos, particularmente los asociados con infecciones cutáneas (piel, pelo, etc.). En el medio de cultivo, la pluripeptona y la glucosa, son los nutrientes para el desarrollo de microorganismos por lo que el alto contenido de glucosa, la presencia de cloranfenicol y el ph ácido, favorecen el crecimiento de hongos por sobre el de bacterias. • Las normas de seguridad del laboratorio son muy importantes para la seguridad y protección de cada uno de los estudiantes debido a las características del trabajo que se realiza en el laboratorio como la preparación de medios por lo que se pueden provocar accidentes de diversa consideración, como incendios, explosiones, intoxicaciones y
quemaduras. Debe disponerse, por tanto, de elementos de actuación adecuados para que estos efectos puedan ser controlados. • Realizamos el cálculo correspondiente por lo que se debe considerar las indicaciones que se den en el envase del agar sabouraud sabiendo que en 65 g del polvo por litro de agua destilada se relaciona a la cantidad de cajas que se desea realizar, de tal manera que permitirá realizar una mezcla homogénea para que los respectivos medios sean distribuidos equitativamente en relación a ¾ del agar en cada caja y esparcidos correctamente ya que este medio es muy característico porque provee de nnutrientes indispensables para el crecimiento del Pleorotus Ostreatus • Observamos las características de crecimiento del micelio Pleorotus Ostreatus en medio agar sabouraud por lo que se presentó en 5 cajas las siguientes características importantes como una forma tubular y se estructura filamentosa de color blanco tamaños entre mediano y pequeño un aspecto brillante y elevaciones con un margen lobular .Mientras que en las restantes se presentó márgenes enteras que permitían identificar su adaptación al medio no se presentó un aspecto y sus colores fueron crema 6. Bibliografía
EVALUACIÓN DEL CRECIMIENTO Y
Alfredo, H. R. (28 de Mayo de 2009).
PRODUCCIÓN
DE
Pleurotus
Ostreatus .
Obtenido
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http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis257.pdf Castro, A. J. (16 de Diciembre de 2016).
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Como Cultivar Setas Pleurotus ostreatus o seta de
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http://www.cultivodesetas.es/setas-comestibles/como-cultivar-setas-pleurotusostreatus Mushiberica. (3 de Mayo de 2015). el
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cultivo
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http://www.mushiberica.es/cultivos/cultivos/pleurotus.php ROLLAN, M. G. (6 de Febrero de 2014).
NUEVAS TECNICAS DE CULTIVO DEL
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http://www.mapama.gob.es/ministerio/pags/biblioteca/hojas/hd_1985_08.pdf Ruiz, R. A. (11 de Junio de 2012).
COMESTIBLE
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AISLAMIENTO Y CULTIVO DEL HONGO afin
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Obtenido
de
http://www.innovacion.gob.sv/inventa/attachments/article/2048/Folia5_articulo1 .pdf
Soca, B. d. (19 de Agosto de 2016).
ostreatus).
Obtenido
Sustrato para el cultivo de seta de ostra (Pleurotus de
Instrucciones
para
el
cultivo::
https://www.boletsdesoca.com/es/producto/sustrato-cultivo-seta-ostra-interior pleurotus-ostreatus/
7. Anexos
