Arequipa, 30 de Marzo del 2015.
Biotecnología Médica
Las soluciones en química, son mezclas homogéneas de sustancias en iguales o distintos estados de agregación. La concentración de una solución constituye una de sus principales características y sebe ser siempre expresada en mol/lt (según el SI). Bastantes propiedades de las soluciones dependen exclusivamente de la concentración. Su estudio resulta de interés tanto para la física como para la química. La sustancia presente en mayor cantidad suele recibir el nombre de solvente, y a la de menor cantidad se le llama soluto y es la sustancia disuelta. Al momento de preparar soluciones hay que tomar en cuenta varios aspectos, en el análisis químico son de particular importancia las micropipetas.
La Micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y transferir pequeños volúmenes de líquidos por lo cual es indispensable que sean lo más precisas y exactas posibles. Los volúmenes captables por estos instrumentos varían según el modelo: los más habituales, denominados p20, p200 y p1000, admiten un máximo de 20, 200 y 1000 μl,
respectivamente. Es de destacar que el uso de Micropipetas permite emplear distintos líquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plástico, que habitualmente hab itualmente son estériles. Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las amarillas para pipetear volúmenes pequeños (por ejemplo, 10 μl), y las azules para pipetear volúmenes grandes (por ejemplo, 800 μl). Palabras Clave: Exactitud, precisión, tips, rack, molaridad, disolución.
Chemical solutions are homogeneous mixtures of substances in the same or different states of aggregation. The concentration of a solution is one of its main characteristics and sebe always be expressed in mol / l (according to SI). S I). Quite a few properties of solutions depend solely on concentration. Their study is of interest to both physics and for chemistry. This substance in greater quantity is often called solvent, and the t he lowest amount is called the solute and the dissolved substance. When preparing solutions must take into account several aspects, in chemical analysis they are of particular importance i mportance micropipettes. micropipettes.
MANRIQUE MURILLO, JOSÉ LUIS
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Biotecnología Médica
The micropipette is a laboratory instrument used to absorb and transfer small volumes of liquid so it is essential to be as precise and accurate possible. The captables volumes by these instruments vary by model: the most common, called p20, p200 and p1000, support a maximum of 20, 200 and 1000 .mu.l, respectively. It is noteworthy that the use of micropipettes allows to use different liquids without having to wash the apparatus: for that, disposable tips, plastic, which are usually used sterile. Several types of points: for example, yellow for pipetting small volumes (eg, 10 .mu.l), and blue for pipetting large volumes (eg, 800 .mu.l). Keywords: Accuracy, precision, tips, rack, molarity, dissolution. b.
c.
Tris Base Cloruro de Amonio SDS NaCl Etanol Isopropanol EDTA Ácido Acético Bromuro de Etidio Azul de bromoenol
d.
e.
f.
Balanza Analítica Potenciómetro Probetas Beakers Fiolas Micropipetas p200 y p1000 a.
b.
a.
Seleccionar la Micropipeta a utilizar
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c.
Se presiona el botón superior suavemente hasta el primer tope. Se sumerge la punta, en la solución que se necesita pipetear estando seguros que la punta este bien colocada y que no haya ningún tipo de residuos entre la punta y el cuerpo de la pipeta. Mantenga la pipeta verticalmente mientras toma la solución. Para descartar la solución de la punta presione el botón hasta el segundo tope. Descarte las puntas utilizando el eyector que traen las pipetas
Se pipeteó agua destilada; la medidas de 50ul, 100ul y 200ul con la Micropipeta p200 y 250ul, 500ul y 1000ul con la Micropipeta p1000. Se hicieron diez (10) repeticiones de cada medición. Se pesó en balanza analítica cada uno de las repeticiones y se anotaron los pesos.
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Biotecnología Médica
a.
Se preparó el buffer partiendo de las soluciones Stock que se detallan a continuación.
b.
ClNH4 (1.6M)
Se hicieron los cálculos para el volumen que exigía la práctica (50ml) NaHCO3 5ml ClNH4 2ml EDTA 1.8612 g
Stock:
NaHCO3 (0.1M) EDTA (PM=372,24gr/mol)
0.0473
0.0986
0.1873
0.2543
0.5125
1.0106
0.0506
0.0985
0.1936
0.2568
0.5108
1.0055
0.0492
0.0984
0.1986
0.2542
0.5087
1.0087
0.0503
0.0986
0.1982
0.2572
0.5111
1.0312
0.0501
0.0986
0.1998
0.258
0.5127
1.0032
0.0502
0.099
0.1952
0.2582
0.5131
1.0215
0.0499
0.0991
0.199
0.2582
0.5108
1.0411
0.0494
0.0995
0.198
0.2605
0.5112
1.0133
0.05
0.0998
0.1998
0.2575
0.511
1.0135
0.0502
0.0995
0.2
0.2572
0.5128
1.0129
0.04972
0.09896
0.19695
0.25721
0.51147
1.01615
-99.90056
-99.901
-99.9015
-99.8971
-99.8977
-99.8983
-99.901041
-99.897735
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La Micropipeta p200 no presenta mayor desviación estándar respecto al valor nominal por lo cual es considerada apta para el trabajo en laboratorio. La exactitud de la Micropipeta p1000 se aleja imperceptiblemente del valor nominal por lo cual recomendamos calibrarla y usarla solo en caso de no disponer de otra. Durante la práctica la cantidad de EDTA fue insufiente por lo cual se preparó más para el resto de alumnos, con ellos quedaron solidos los conocimientos adquiridos respecto a la preparación de soluciones.
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Conceitos Basicos de Tecnicas em Biologia Molecular Ministerio de Agricultura, Pecuaria e Abastecimiento (Brasil) Editorial Embrapa Setembro, 2008
Instrumental en el laboratório de Analisis Clinico HNCASE (ESSALUD – AREQUIPA) Afiche SINESSS Abril 2005
https://es.wikipedia.org/wiki/Precisi%C3%B3n_y_exactitud www.monografias.com
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